杨 帆，钱 宁，戴 欣，彭 俊

（松辽流域水资源保护局，吉林 长春130021）

近年来环境污染和富营养化程度不断加剧，蓝藻水华频繁发生，这已经成为国内外普遍关注的问题。微囊藻毒素即为水体中蓝藻类如铜绿微囊藻、鱼腥藻和念珠藻等藻属水华释放一类具有强烈致癌、具有肝毒性的单环七肽化合物，它的一般化学结构可表示为：环D-丙氨酸-L-X-赤-β-甲基-D-异天冬氨酸-L-Y-Adda-D-异谷氨酸-N-甲基脱氢丙氨酸。其中Adda是表达MC活性的必需基因，其结构改变或被去除，毒素的毒性都会降低。X，Y为2个可变的L-氨基酸。由于X，Y的不同而产生多种异构体，目前已知有60多种。其中存在最普遍、含量较多、毒性较大的是MCLR，MC-RR和MC-YR(L，R，Y分别代表亮氨酸、精氨酸和酪氨酸)。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

Agilent 1200 series-Agilent 6310 Ion Trap MS液相色谱-离子阱质谱联用仪；Caliper Life Scienes全自动固相萃取装置；ISOLUTE C18（EC）固相萃取柱（200 mg，3 mL）；OA-SYSTM 氮吹装置；电子天平（0.0001 g）；KD-浓缩瓶；滤膜（0.45 μm GF/C玻璃纤维滤膜）；过滤头。甲醇、甲酸均为Burdick&Jackson色谱纯；水为wahaha纯净水；微囊藻毒素标准样品10 mg/L。

1.2 样品前处理

1.2.1 样品制备

用0.45 μm GF/C玻璃纤维滤膜过滤水样，用少量甲醇清洗滤膜。

1.2.2 样品的富集和洗脱

设置10 ml甲醇和10 ml高纯水，用流速为1 ml/min活化固相萃取柱。取1000 ml水样滤液（1.2.1）以及空白和加标样品，以10 ml/min的流速通过全自动固相萃取装置进行富集。当所有样品通过萃取柱后，用高纯氮气吹5 min，再用10 ml20%甲醇淋洗液淋洗固相萃取柱。最后用10 ml100%甲醇洗脱富集在柱上的微囊藻毒素，将洗脱液收集在KD-浓缩瓶内。

1.2.3 富集浓缩

将KD-浓缩瓶放在40℃的水浴上，用氮气吹脱浓缩至0.5 ml，用甲醇定容至1 ml，经过滤头转移至样品瓶。……