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葡萄籽提取物原花青素对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡的影响

2011-06-25易芳芳朱秀娟袁云香贺丽萍

湖南师范大学学报(医学版) 2011年3期
关键词:实验

易芳芳,龚 建,朱秀娟,向 真,袁云香,贺丽萍

(湖南师范大学医学院,湖南 长沙410006)

睾丸生精细胞凋亡是生精过程中产生的一种生理现象,隐睾由于生精细胞的过度凋亡而使生精功能低下,甚至导致不育。隐睾所致的生精细胞过度凋亡与活性氧所致的过氧化有关。原花青素是一种良好的氧游离基清除剂和脂质过氧化抑制剂,可有效清除超氧阴离子自由基和羟基自由基,也参与磷脂、花生四烯酸的新陈代谢和蛋白质磷酸化,保护脂质不发生过氧化损伤[1,2]。本实验通过模拟隐睾模型,探讨原花青素对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡的影响。

1 材料和方法

1.1 动物模型的建立及处理

40只健康雄性SD大鼠 (42日龄,体重120~160g),购自湖南农大实验动物中心。喂养7天后,随机分为隐睾+原花青素(低、中、高剂量组分别按300,450,600 mg/kg,稀释至 5mL,)组、隐睾+生理盐水组 (生理盐水5 mL)、假手术组。巴比妥钠(50mg/Kg)腹腔内注射麻醉,下腹正中切口,假手术组将左侧睾丸切断引带后还纳入阴囊关腹。其他五组大鼠切断左侧睾丸引带后,用5-0尼龙线将左侧睾丸固定于腹后壁后关腹。术后隐睾+生理盐水组及隐睾+原花青素(高、中、低剂量)组分别灌胃给予生理盐水和原花青素,每天三次,定时定量灌胃,7天后快速脱颈椎法处死所有大鼠,双侧睾丸称湿重,之后置4%多聚甲醛中固定。

1.2 主要试剂

原花青素为红棕色粉末(南京泽朗医药科技开发有限公司),纯度95% ,临用时用30℃温水配置成混悬液。DAB显色试剂盒购自武汉博士德生物工程公司,细胞凋亡检测试剂盒购自南京建成生物工程公司。……

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