黎叶飞，盛祖龙，姚玉宇，马根山，2

(1.东南大学医学院，江苏南京 210009;2.东南大学附属中大医院心血管内科，江苏 南京 210009)

急性心肌梗死是世界范围最主要致死性疾病之一［1］。然而，临床上对其行标准药物治疗及再灌注治疗的作用有限，梗死后心力衰竭的死亡率和致残率持续上升，大量的心肌细胞丢失是梗死后心衰的细胞学基础［2-3］。近年来研究者［4-6］认为，干细胞移植治疗似乎充满希望，其中骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)是最早应用于动物实验和临床研究的细胞之一。BMMSCs能够分化为心肌细胞和血管细胞，最终修复受损心脏，改善心脏功能［7］。然而 Carr等［8］认为，干细胞治疗效果有限或无确切效果。这些结果的差异性可能与干细胞不同移植途径有关。本研究在建立小鼠心肌梗死模型基础上，分别心肌内和尾静脉移植体外扩增的BM-MSCs，观察不同移植途径对2周后小鼠心功能的影响，为临床治疗探求更为理想的干细胞移植途径。

1 材料与方法

1.1 BM-MSCs的分离与培养

取20～22 g清洁级雄性ICR小鼠(购于南京医科大学实验动物中心)，脱颈椎处死后无菌条件下取股骨、胫骨，剪去两端骨骺，用含10%胎牛血清(Hyclone)的DMEM低糖培养基(Gibco公司，USA)冲冼骨髓腔，收集骨髓，离心10 min(1 000 r·min-1)，去上清液，将骨髓细胞按2×105ml-1加全培接种于底面积为25 cm2的培养瓶，置于37℃、体积分数为0.05的 CO2、95%饱和湿度的培养箱中培养。48 h首次换液去除悬浮生长的细胞，以后每隔2～3 d换液1次，当细胞铺满瓶底时0.25%胰蛋白酶消化细胞传代，传至4代后干细胞已经比较纯净，制备成细胞浓度为5×107ml-1的悬液备用。……