刘平，李宗军,2*，许爱清,3

(1. 湖南农业大学 食品科学技术学院，湖南 长沙 410128；2. 国家植物功能成分利用工程技术中心功能食品分中心，湖南 长沙 410128；3. 湖南科技大学 生命科学学院，湖南 湘潭 411201)

茯砖是一种砖形蒸压黑茶。目前，对茯砖茶功能的研究主要集中在减肥、降血脂方面[1]，而关于其对免疫系统影响的研究较少。笔者以细菌感染小鼠为模型，研究茯砖茶水提物对模型小鼠免疫功能的影响。现将结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 材 料

1.1.1 供试动物

昆明种SPF小鼠190只，雌、雄各半，体质量(20±2)g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,许可证号码为SCXX(湘)2009–0004。鼠颗粒饲料由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供。供试小鼠均饲喂在湖南农业大学动物科学院标准动物房，适应性喂养3 d后开始试验。

1.1.2 茯砖茶水提物

金湘益茯砖茶由湖南益阳茶厂提供。取 100 g茯砖茶敲碎，浸泡于400 mL蒸馏水中，搅拌，煮沸15 min，静置冷却1 h，过滤后定容至100 mL，制成高剂量茶汁(1 g/mL)，再分别用无菌生理盐水稀释至中剂量(0.5 g/mL)、低剂量 (0.05 g/mL)茶汁，备用。

1.1.3 攻毒菌液

Escherichia coli O157:H7(21530)菌种购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。活化后接种 2 mL菌悬液到100 mL液体培养基，37 ℃摇床培养18 h。将培养好的菌液离心，用无菌生理盐水洗涤3次，收集菌体，加适量无菌生理盐水，据预试验结果以OD600nm1.0的菌液作为攻毒菌液。

1.1.4 主要试剂

主要试剂：E. coli O157:H7检测试剂盒；绵羊血；印度墨汁；兔抗小鼠CD4和CD8单克隆抗体(Epitomics)；Envision二步法通用型抗小鼠免疫组化试剂盒和DAB显色剂试剂盒(Novocastra)。

1.2 方 法

将190只昆明小鼠适应性喂养3 d后随机分成5组：对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量茶汁组(1 g/(kg·d)，C 组)、中剂量茶汁组(10 g/(kg·d)，D 组)、高剂量茶汁组(20 g/(kg·d)，E组)。……