漏佳伟，傅盼翰，裘娟萍

(1.浙江工业大学 生物与环境工程学院，浙江 杭州 310014;2.浙江工业大学 健行学院，浙江 杭州 310014)

多杀菌素 (spinosad)是刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)有氧发酵产生的次级代谢产物，是一种安全、高效、广谱的大环内酯类杀虫剂，其主要有效成分是多杀菌素A和D［1-3］。实验证明多杀菌素能有效防治害虫，尤其对鳞翅目、缨翅目害虫有极强的选择性毒杀作用［4-7］。多杀菌素的杀虫作用具较强的靶标性，对烟芽夜蛾等重要农业害虫的杀虫活性远远超过常用的多种有机磷类、环戊二烯类、氨基甲酸酯类杀虫剂，对非靶标生物的毒性很低，对包括人在内的哺乳动物非常安全［8-9］，迄今为止没有发现与其他杀虫剂有交叉抗性［10-11］。国内外对于多杀菌素的物理化学性质、作用机理和毒性、杀虫谱、分析检测方法和发酵工艺都做了大量的研究，但由于菌种在保藏过程中易退化，产量极不稳定，导致国内多杀菌素依然没有实现工业化生产。为此，研究刺糖多孢菌的稳定性，找到维持产量稳定的保藏方法，对实现多杀菌素工业化生产具有重大意义。

1 材料与方法

1.1 菌种

刺糖多孢菌5个菌株 (本实验室保存菌种)，其特性列于表1。

表1 待保藏菌株的典型特性

1.2 培养基

固体培养基。葡萄糖0.9%，MgSO4·7 H2O 0.2%，酵母膏0.3%，玉米浆1.0%，琼脂2.0%，pH值7.0

种子培养基。葡萄糖1.0%，酵母膏0.4%，蛋白胨 0.4%，MgSO4·7 H2O 0.05%，KH2PO40.002%，K2HPO40.004%，p H值7.0

发酵培养基。葡萄糖7.0%，蛋白胨2.5%，CaCO30.5%，玉米浆1.5%，大豆油4.0%，棉籽粉2.5%，p H值7.0。

1.3 主要仪器与试剂

主要仪器有:gilent 1100 series液相色谱仪(美国安捷伦公司)，Thermo Scientific Heraeus Multifuge X1 R离心机 (美国热电公司)，SPX-250B-Z生化培养箱……