费建明 吴 岩 占鹏飞 李玉峰 王文兵

(1浙江省湖州市农业科学研究院,浙江湖州 313000; 2江苏大学生命科学研究院,江苏镇江 212013)

家蚕 Bm NPV多角体蛋白与大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ的融合表达

费建明1吴 岩2占鹏飞1李玉峰1王文兵2

(1浙江省湖州市农业科学研究院,浙江湖州 313000;2江苏大学生命科学研究院,江苏镇江 212013)

L-天冬酰胺酶是一种重要的蛋白类抗肿瘤药物,可通过降解 L-天冬酰胺从而抑制肿瘤细胞中蛋白质的正常合成,导致肿瘤细胞的死亡。通过基因融合的方法,将大肠杆菌的asp基因在家蚕杆状病毒中表达,其活性进一步提高到 5 940 U/mg,为利用家蚕生物反应器生产该蛋白打下了基础。

家蚕;多角体;L-天冬酰胺酶;大肠杆菌

L-天冬酰胺是蛋白质合成必需的氨基酸。肿瘤细胞中天冬酰胺合成酶(asparagines synthetase,AS)活性非常低,不能有效合成 L-天冬酰胺,需依赖外源 L-天冬酰胺才能生存和复制。L-天冬酰胺酶(L-asparaginase,L-ASP)可通过降解 L-天冬酰胺从而抑制肿瘤细胞中蛋白质的正常合成,导致肿瘤细胞的死亡［1-3］。L-ASP是一种重要的蛋白类抗肿瘤药物,在临床上广泛用于淋巴瘤和儿童急性淋巴细胞白血病、黑素肉瘤、胰腺癌及霍金森病等疾病的治疗［3-4］。L-天冬酰胺酶Ⅱ的生产大多采用以大肠杆菌为宿主的基因工程菌,存在着发酵水平低和分离纯化步骤繁多等问题［2］,难以广泛应用。本试验通过基因融合的方法,将大肠杆菌的 asp基因在家蚕杆状病毒中表达,以提高其活性,为利用家蚕生物反应器生产该蛋白打下了基础。……