氢醌抑制HL-60细胞分化上调过氧化物酶2-Cys过氧化物氧还蛋白表达
2011-05-14韦潇湘王春双陈长艳陆彩玲郭松超李习艺
韦潇湘,唐 深,王春双,陈长艳,陆彩玲,郭松超,李习艺
(广西医科大学1.公共卫生学院;2.基础医学院;广西南宁 530021)
氢醌(hydroquinone,HQ)又名对苯二酚[C6H(OH)],是苯在生物体内的代谢产物,在苯血液毒性中发挥重要的作用,可导致再生障碍性贫血、骨髓异常增生综合征、白血病及淋巴瘤等多种造血系统功能障碍,研究HQ血液毒性机制对探讨苯的毒性机制具有重要的意义。前期研究发现,在人胚肺成纤维细胞MRC-5及人脐血单个核细胞中,HQ的毒性可能与过氧化物酶2-Cys过氧化物氧还蛋白(peroxiredoxins)(2-Cys Prxs)有关[1-2]。2-Cys Prxs是细胞内一类抗氧化蛋白家族,它们都有两个高度保守的具有氧化还原活性的半胱氨酸残基,即过氧化活性的胱氨酸残基cys51和还原活性的半胱氨酸残基cys172。2-Cys Prxs在氧化应激中发挥重要的作用[3],保护细胞免受氧自由基损害,同时它们在细胞增殖与分化中也起着重要的作用[4]。HL-60细胞株是人前髓细胞株,其髓系祖细胞特性明显,具有多向分化能力,在豆蔻酰佛波醇(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)或二甲亚砜(DMSO)诱导下可分别向单核系或粒系分化,适用于粒系、单核系分化研究[5-6]。本实验主要研究HQ对HL-60细胞向单核系、粒系分化的影响,并探讨2-Cys Prxs在其中的作用。
1 材料与方法
1.1 细胞与试剂
HL-60细胞购自上海细胞生物所,IMDM培养基购自美国海克隆实验室公司,PMA和HQ购自Sigma公司,硝基四氮唑蓝(NBT)购自Sanland公司,Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)、显影定影试剂盒购自碧云天生物技术研究所。cDNA合成试剂盒、PCR试剂盒与荧光定量 PCR引物购自沈阳TaKaRa公司;Trizol购自美国 Invitrogen公司,Western印迹抗体购自Santa Cruz公司及Fermantas公司,其余试剂为国产分析纯。……
