施佳音,夏钰弘

(南京医科大学附属无锡市人民医院,江苏无锡 214023)

皮肤鳞状细胞癌(SCC)和基底细胞癌(BCC)为皮肤科常见肿瘤。本研究应用免疫组化EnVision二步法检测NF-κB、Ki-67和E-cad在正常皮肤组织、皮肤SCC和BCC的表达,并进行差异比较和相关性分析,以探讨此三者的相关性及其与皮肤SCC和BCC恶性程度之间的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 石蜡包埋标本来源于我院病理科1990～2005年存档标本,其病理诊断标准参照世界卫生组织肿瘤诊断标准。其中BCC 30例(男 17例、女 13例,平均年龄 59.6岁,发生于面部 19例、躯干1l例)、SCC 50例(男32例、女18例,平均年龄61.7岁,发生于面部33例、躯干 17例)及正常皮肤标本20例(分别来自头、面、躯干)。皮肤SCC标本根据Broders法判断分级：其中Ⅰ级26例,Ⅱ～Ⅲ级24例。

1.2 方法 兔抗人NF-κB/p50多克隆抗体,克隆号RAB-0531,即用型;兔抗人Ki-67单抗隆抗体,克隆号MIB-1,即用型;鼠抗人E-cad单抗隆抗体,克隆号MAB-0247;购自福州迈新生物技术开发有限公司。免疫组织化学采用EnVision法,切片经常规二甲苯脱蜡梯度乙醇水化。一抗孵育前切片经0.01 mol/L柠檬酸缓冲液(pH 6.0)煮沸抗原修复。操作步骤按产品说明书进行。二氨基联苯胺显色。选用已知阳性的肺癌组织为阳性对照,以PBS液代替一抗作为空白对照。

1.3 结果判断 NF-κB主要在细胞质着色,蛋白染色阳性信号均呈棕黄色颗粒。Ki-67染色信号定位于细胞核,胞核出现深棕色为阳性标记。E-cad阳性判断以细胞质、细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性,无着色为阴性。根据显色强度和阳性细胞数两项指标判断阳性等级。按显色强度分为无色、黄色、棕黄色和棕色,分别计分为 0、1、2、3分,按阳性细胞占同类细胞的比例分为：0、＜1/3、1/3～2/3、＞2/3,分别计分为 0、1、2、3分。……