韩硕,赵前程,吴斌,李叶,王玫

(1.大连海洋大学食品工程学院,辽宁大连116023;2.辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001)

传染性造血器官坏死病毒毒株核蛋白基因片段的克隆及序列分析

韩硕1,赵前程1,吴斌2,李叶2,王玫2

(1.大连海洋大学食品工程学院,辽宁大连116023;2.辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001)

利用RTG-2细胞对传染性造血器官坏死病毒(IHNV)的敏感性对IHNV-DL进行扩增,采用TRIzol法提取病毒RNA,用IHNV核蛋白基因的一对通用引物进行RT-PCR扩增,将扩增出的一条786 bp的基因纯化、克隆至pMD18-T载体中进行序列测定,并与国内外已公布的病毒核蛋白基因进行比对和分析。结果表明:此病毒的核酸序列与标准毒株RB-1、代表毒株WRAC的同源性分别为96.3%和93.6%;翻译出的氨基酸序列与标准毒株RB-1、代表毒株WRAC的同源性分别为96.1%和93.5%。系统进化树分析结果表明,此毒株与中国近期公布的毒株zyx有密切的亲缘关系。

传染性造血器官坏死病毒;纯化;克隆;序列分析

传染性造血器官坏死病(Infectious haematopoietic necrosis,IHN)是一种主要感染大马哈鱼和虹鳟鱼苗及其幼鱼的急性、系统性的严重传染病[1],给全球大马哈鱼和虹鳟的养殖业造成巨大的经济损失[2]。以前IHN只在北美及欧洲的一些国家流行。1968年,IHNV随红大马哈鱼鱼卵从阿拉斯加传入日本北海道[3]。近年来,随着水生动物及其产品进口贸易的增加,IHN也传入中国,并在中国一些地区流行,在自然环境中也可以爆发并造成严重的经济损失[4]。所以OIE(Office International Des Epizooties)将IHN命为口岸鱼类第一类检疫病害。

IHN病原即传染性造血器官坏死病毒(Infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV),属弹状病毒科、诺拉弹状病毒属[5],单链负股RNA,基因组全长为11 kbp。……