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Harris苏木素与Gill苏木素染液的应用体会

2011-02-19

中国药物经济学 2011年6期
关键词:硫酸铝染液苏木

常 峰

HE染色是最基本的病理组织学染色,染细胞核的苏木素是HE染色过程中的关键,苏木素染色的好坏决定着细胞核的着色深浅,也决定了一张切片的质量[1]。苏木素染液的配制方法有很多,目前最常用的为Harris苏木素与Gi11苏木素,这两种染液的染色原理虽然相同,但在实际配制与染色过程中又有一些不同,现做以下探讨。

1 材料和方法

1.1 Harris苏木素液(1000ml)

1.1.1 材料:甲液:苏木素5g,无水乙醇50m1;

乙液:硫酸铝钾100g,蒸馏水 950m1;

丙液:一氧化汞2.5g。

1.1.2 方法:经典的配制方法是,先将甲液加热溶解后,密封待用,再将乙液加热溶解至沸,去火,待溶液仍处于小沸腾状态时再将甲液徐徐倾入其中,全部混合后,再使溶液在短时间内加热至沸腾,去火,最后将氧化汞缓慢倾入溶液中(氧化汞一定要慢慢少量分次加入,切忌急躁。因氧化汞倒入后,溶液会迅速膨胀易沸出容器外而发生危险。)此时液体变为深紫色,待氧化汞全部放入后,再将溶液加温至沸腾片刻,立即将溶液放入流动的冷水中,并缓缓地连续摇晃至溶液完全冷却为止。隔夜后过滤,加入冰醋酸(按5%比例)混匀,再过滤后保存于冰箱内备用。

1.2 Gill苏木素液(1000ml)

1.2.1 材料:苏木素2g,无水乙醇250m1;

硫酸铝17.6g,蒸馏水750m1;

碘酸钠0.2g,冰醋酸20m1。

1.2.2 方法:先将苏木素溶于无水酒精,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。

2 结果

两种苏木素液对常规石蜡切片和冰冻切片进行染色,均得到满意的结果。

3 讨论

3.1 Harris苏木素液是全氧化苏木素,苏木素用量大,被氧化成有染色能力的苏木红多,因此染色后需要盐酸乙醇分化,以退掉过染和不应着色的部分,属于退行性染色。Gi11苏木素是半氧化苏木素,苏木素用量小,被氧化成的苏木红少,因此在较短时间内不会产生过染色,自然也就不需要盐酸乙醇分化了[2]。

3.2 Harris苏木素和Gi11苏木素配制过程中使用的媒染剂分别是硫酸铝钾和硫酸铝,其中起作用的都是铝离子。Harris苏木素中的媒染剂已过量,因染液冷却后常有硫酸铝钾结晶析出。过多的媒染剂不但不能增强染色能力和延长染色剂的使用时间,反而使溶液呈胶状并很快失效[3]。

3.3 Gi11苏木素配制过程中使用的氧化剂为碘酸钠,Harris苏木素使用的氧化剂是氧化汞。苏木素只有变成苏木红才能发挥染料的作用,在这个过程中氧化是关键,氧化不充分其染色能力差,过度氧化则染液表面会出现一层氧化膜,引起切片污染。Harris苏木素通过加温氧化,虽然可以加速苏木红的形成,但易出现金属样氧化膜浮在液面和容器壁上[3]。碘酸钠氧化剂是水溶性氧化剂,在与苏木素氧化过程中呈均匀反应,氧化还原作用是持续增强的,无氧化膜形成,所以也减少了对切片的污染,且费用比使用氧化汞低廉,无毒性,还能减少环境污染[1]。

3.4 Harris苏木素是一种渐退性染液,配制后使用就呈现较强的着色力。Gi11苏木素的最佳染色力是在染色中期,因此在掌握染色时间上,二者有所不同[4]。

[1]李纪理.改良Harris苏木素液染色效果的观察[J].临床和实验医学杂志,2008,7(9):151.

[2]杨枫,魏艳华.介绍一种改良的Gi11苏木素液[J].临床与实验病理学杂志,2009,15(3):274.

[3]陈梦红,廖云萍,石琳俐,等.一种迅速混合配制苏木素的方法[J].河南肿瘤学杂志,2009,15(4):292.

[4]赵红艳.改良的苏木素-伊红染液配制法及应用[J].西北国防医学杂志,2010,24(1):24.

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