刘四化，王倩倩，肖 良，张黎明

(第二军医大学 海医系防化医学教研室，上海 200433)

蛋白质结晶方法的研究进展

刘四化，王倩倩，肖 良，张黎明

(第二军医大学 海医系防化医学教研室，上海 200433)

蛋白质结晶是蛋白质分子从过饱和溶液中析出形成晶体的过程，结晶是蛋白质结构生物学研究的基础，也是主要的技术难点。本文总结了常用的蛋白质结晶方法，介绍了近年来蛋白质结晶相关的新技术和新策略。

蛋白质结晶;蒸汽扩散;籽晶技术;多孔材料;化学修饰

蛋白质结晶即蛋白质分子从过饱和的溶液中析出形成晶体。结晶的过程是蛋白质分子相变的过程，分为晶核形成和晶体生长两个阶段。伴随着晶核的形成，溶液中蛋白质的浓度逐渐降低，推动体系向相对稳定的区域转变，该区域晶体长大而晶核数量不再增加［1］。晶核可以由均相成核或非均相成核两种过程形成［2-3］，同时晶体的生长过程首先是处于过饱和临界点的溶液体系中溶质分子聚集在一起，其次是这些溶质分子从无序集群到有序结构的重组过程。大部分蛋白分子的结晶过程都遵循这一规律［4］。

蛋白质结晶是结构生物学研究的主要难点。尽管高通量结构基因组学的出现简化了目标蛋白质的表达、纯化、结晶以及数据的收集过程，但仍然只有少量蛋白质能生成满足衍射要求的单晶［5］，这从侧面反映了获取蛋白质优质单晶的困难程度。迄今为止，除已有大量经验积累外，还没有发现蛋白质的结晶条件与其结构之间有明显的相关性，也没有任何一套实验系统或理论能保证优良蛋白质晶体的产生和生长。……