毛细管电泳法测定雷公藤饮片中雷公藤红素的含量
2011-02-08张婷
张 婷
(鲁东大学 生命科学学院,山东 烟台264025)
雷公藤红素(celastrol),存在于雷公藤(Tripterygiumwilfordii Hook.F)中。体外药理实验证实雷公藤红素具有抗炎、抑制肿瘤细胞增殖等作用,有良好的治疗肿瘤的应用前景[1,2]。鉴于雷公藤红素的毒性很大,为了有效控制雷公藤制剂的质量,必须建立准确快速测定雷公藤红素含量的方法。目前,关于雷公藤红素的含量测定,主要是高效液相色谱法(HPLC法)[3,4]。毛细管电泳法是用于药物有效成分分离和含测较为有效的一种方法[5,6],但运用毛细管电色谱分离和测定雷公藤红素的研究尚未见报道,本文首次探索了采用毛细管区带电泳测定雷公藤红素的方法,方法简单,时间快,有较好的应用前景。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
HP3DCE毛细管电泳仪(美国惠普公司,二极管阵列检测器,检测波长200~600nm)。
雷公藤红素(CSL)标准溶液:准确称取CSL(本实验室从雷公藤药材中分离得到,最后经二次重结晶,经HPLC测定,纯度大于99%),加适量甲醇溶解,定容于 100mL棕色容量瓶中,配成 2.0×10-3mol·L-1溶液,用时稀释到所需浓度;雷公藤饮片(采购于烟台市毓磺顶大药房)。
供试品溶液的制备 粉碎适量的雷公藤饮片,过6号药筛,在80℃干燥2h,至恒重。精密称取样品1.000g到5mL的三角瓶中,加适量甲醇,超声溶解15min后,放置10min,再超声溶解15min后,放置三角瓶中直到室温,转移至5mL容量瓶中再加甲醇至刻度,振摇均匀,取3mL溶液超滤后,得到测试溶液;
KH2PO4,K2HPO4,CH3OH,CHCl3等均为分析纯,购自上海国药集团化学试剂有限公司;实验用水为二次蒸馏水;实验开始前均用0.45μm滤膜过滤处理缓冲液、对照品溶液和样品溶液。……
