季节性流感病毒H1N1实时荧光定量PCR检测方法的建立
2011-02-01许黎黎鲍琳琳
中国比较医学杂志 2011年7期
关键词:检测
许黎黎,鲍琳琳,秦 川
(中国医学科学院医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,北京 100021)
流行性感冒是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,其流行特点是传播迅速,波及范围广。迄今为止,流感病毒已引起四次世界流感大流行,给人类社会的经济及健康造成了巨大损失[1]。
流感病毒属于正黏病毒科,其基因组为分节段负链RNA,根据病毒核衣壳蛋白(NP)和基质蛋白(M)不同可分为甲、乙、丙三种型别,均可感染人。甲、乙型流感病毒是人群中主要的流行病毒,甲型流感病毒根据病毒表面血凝素抗原的不同分为16个HA亚型;根据神经氨酸酶抗原的不同分为9个NA亚型[2]。甲型流感病毒中的 H1N1亚型曾经在1918年引起世界流感的大流行,自 1997年以后,H1N1亚型与 H3N2亚型交替在人群中流行。从2002开始我国的流感一直由H3N2占优势,持续了近3年后,2005年的9月以后H1N1亚型流感毒株重新成为我国的流感流行的优势毒株[3,4],已对人类的健康及社会经济造成极大的威胁。因此,研究快速、敏感、特异的实验室诊断技术是早期发现病人,掌握传播途径和制定预防措施的根本。
目前国内诊断流感病毒的主要方法包含病毒分离和血清学诊断反应等,但这些方法费时费力,不宜于疾病初期的快速诊断与筛查,而核酸检测灵敏度高、快速、特异等优势决定了其在临床检测中的重要地位,传统的聚合酶链式反应(PCR)不仅无法对样本中的病毒进行定量检测,而且扩增反应后需要电泳检测,这不仅不适于大批量样本的筛选,而且容易因操作污染造成假阳性。……
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