内源性硫化氢调节慢性阻塞性肺疾病大鼠氧化/抗氧化平衡*
2011-01-30何艳晶陈亚红齐永芬姚婉贞毕小瑞关育红朱瑞霞唐朝枢
何艳晶, 陈亚红△, 齐永芬, 姚婉贞, 毕小瑞, 关育红, 朱瑞霞, 唐朝枢
(北京大学1第三医院呼吸内科,2医学部生理及病理生理系,3第三医院儿科,北京100191)
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是具有气流受限特征的气道慢性炎症疾病,氧化应激在COPD的发病机制中起重要作用[1],因此,调节氧化抗氧化平衡在COPD的治疗中具有重要意义。硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)既往被认为是一种具有臭鸡蛋气味的有毒气体。然而近年来研究发现,在哺乳动物体内,H2S可由3种酶催化产生,即是胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)、胱硫醚-β-合酶(cystathionine-βsynthase,CBS)和3-巯基丙酮酸盐硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulphurtransferase,3 -MST)联合半胱氨酸转氨酶(cysteine aminotransferase,CAT),它具有多种生理病理作用,包括抗氧化作用。然而它在COPD发病过程中是否具有抗氧化作用尚未阐明。本研究在香烟烟雾和脂多糖建立的COPD大鼠模型中探讨H2S在COPD氧化应激中的作用。
材料和方法
1 主要试剂
“都保”牌香烟(市售,焦油含量17 mg,烟气烟碱量1.2 mg)、炔丙基甘氨酸(DL -propargylglycine,PPG)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,Escherichia coli,serotype O55∶B5)、硫氢化钠(sodium hydrosulfide hydrate,NaHS)均购自Sigma,过碘酸-雪夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色液试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司,Masson三色染色试剂盒购自珠海贝索生物技术有限公司,丙二醛(malondialdehyde,MDA)测定试剂盒、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)测试盒、过氧化氢酶(catalase,CAT)测试盒均购自南京建成科技有限公司。CSE抗体购自Abnova,其它化学试剂均为分析纯。
2 动物模型的建立及分组
健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠32只,体重210-250 g,购于北京大学医学部动物中心。按体重大小随机分成4组,每组8只:对照组(A组),吸烟 +LPS组(B组),吸烟 +LPS+NaHS组(C组),吸烟+LPS+PPG组(D组)。C组每次吸烟或LPS滴入前 2 h 腹腔注射 NaHS(14 μmol/kg,400 μmol/L),D 组腹腔注射 PPG(37.5 mg·kg-1·d-1),B组腹腔注射与C组相同剂量的生理盐水。……
