董志军， 李晓红， 董微丽， 张铁民

(承德医学院附属医院眼科，河北承德067000)

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病眼部并发症中严重的致盲病变，是导致视力丧失的主要原因［1，2］。以往对DR发病机制的研究主要集中在视网膜新生血管方面。近年的研究表明［3］，DR不仅有视网膜微血管病变，而且早期即存在视网膜神经组织的功能损害，视网膜神经保护治疗日益受到关注。本研究旨在通过观察菩人丹超微粉(Purendan superfine powder，PRD)对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及相关基因表达的影响，探讨其对糖尿病大鼠视网膜神经组织的保护作用。

材料和方法

1 材料

1.1 药物与试剂 菩人丹超微粉由苦瓜、人参、丹参、制首乌、葛根、水蛭组成，河北以岭药业集团有限公司代加工生产;链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)购自Sigma;Trizol购自Invitrogen;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TdT－mediated dUTP nick end labeling，TUNEL)细胞凋亡检测试剂盒购自Roche;B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原2(B－cell leukemia/lymphoma 2，Bcl－2)和 B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(Bcl－associated X，Bax)兔抗多克隆抗体均购自Santa Cruz;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase－3)兔抗多克隆抗体购自Bioworld Technology;bcl－2、bax和 caspase－3引物购自上海生工公司;SP免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物技术公司;RT－PCR试剂盒购自大连宝生物工程有限公司。

1.2 动物 清洁级雄性Wistar大鼠［北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证编号为SCXK(京)2006－0009］，体重200－250g。

2 方法

2.1 动物分组、模型制备与给药 将36只大鼠应用随机数字表法进行完全随机化分组，分为正常对照组、糖尿病模型组和PRD治疗组，每组12只。糖尿病模型组、PRD治疗组大鼠均采用2%STZ(25 mg·kg－1·d－1，3 d)连续腹腔注射建立糖尿病动物模型，以血糖≥16.7 mmol·L－1作为成模标准［4］。……