药用植物天门冬染色体核型分析
2011-01-25乔永刚白雯婷
乔永刚,宋 芸,白雯婷
(山西农业大学生命科学学院,山西太谷 030801)
天门冬 Asparagus cochinchinensis(Lour.)Merr.为百合科天门冬属植物。全世界有 300余种,我国有 24种和一些外来种。在我国以气候温暖湿润的长江以南地区为天门冬主产区,自然分布在秦岭对南各省区[1]。天门冬以干燥块根入药,天门冬性寒,味甘、苦,归肺、肾经。主要功能为养阴润燥,清肺生津[2]。染色体核型分析是细胞遗传学、染色体工程、现代分类学和进化理论的重要研究手段,研究天门冬染色体数目、核型和染色体组组成,为其鉴定、起源、演化、育种培育等提供必要的细胞学资料。
1 材料与方法
1.1 材料
天门冬种子由山西天然药用生物研究所提供。
1.2 方法
将天门冬种子常温下浸泡 12 h,使种子充分吸水膨胀,然后,置于 28℃的培养箱中发芽。当根长至 0.5~1 cm时取根尖部分,用饱和对二氯苯溶液在 4℃下预处理 4 h,用蒸馏水清洗后加入新配制的固定液 (冰醋酸与无水乙醇体积比 =1∶3),固定24 h,将材料清洗后再用 1 mo l/L HC l中在室温条件解离 10 m in,洗掉 HC l后用卡宝品红染色进行常规压片,冰冻法揭片,干燥后用中性树胶封片。
通过镜检找到染色清晰而且分散良好的中期分裂相,用 OLY M PUS BX51显微镜观察并摄影,利用VIDEOTEST-KARYO 3.0自动核型分析软件进行核型分析。核型分析按李懋学等[3]报道的标准,核型分类以 Stebbins[4]的方法进行,利用染色体参数在 Excel中绘出核型模式图[5]。
2 结果与分析
2.1 染色体数目
对根尖染色体制片进行镜检并选择 30个染色体分散良好的有中期分裂相观察计数,所有观察统计的细胞染色体数目均为 2n=20,未发现染色体非整倍体细胞。……
