余 倩

(1.仲恺农业工程学院，广东 广州 510225;2.中山大学 有害生物控制与资源利用国家重点实验室，广东 广州 510275)

1972年Kerr等人［1］首次提出细胞凋亡的概念，即在一定的生理或病理条件下，细胞受内在遗传机制控制，自动结束生命的过程。细胞凋亡有明显形态学和生化学的特征，形态学特征包括:细胞核浓缩和片段化，胞质浓缩、细胞体急剧变小，细胞骨架解体，且常伴随有细胞质膜出泡现象［2］。生化学特征包括:染色质片段化，形成长度180～200 bp整数倍的寡聚核苷酸片段，琼脂糖凝胶电泳时呈现“梯状”条带 (DNA ladder)。

在多细胞生物体中，细胞凋亡作为一种抗病毒应答机制能限制入侵细胞中的病毒，从而减少子代病毒的产生，及造成流产性感染［3－5］。目前已发现多种杆状病毒可诱导昆虫离体细胞凋亡，如野生型苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒诱导海灰翅夜蛾S.littoralis细胞 SL2 凋亡等［6］。

斜纹夜蛾 (Spodoptera litura，Splt)和甜菜夜蛾 (Spodoptera exigua，Se)同属夜蛾科灰翅夜蛾属的昆虫，亲缘关系很近，且斜纹夜蛾核多角体病毒 (Splt nucleopolyhedrovirus，SpltMNPV和SeMNPV基因组相似性很高［7－8］，但这两种病毒不能交叉感染各自宿主。SeMNPV感染SpLi-221会引起细胞凋亡［9］，而SpltMNPV感染Se301的研究还未见报导。本文在显微水平和亚显微水平上对SpltMNPV感染离体细胞Se301的过程进行了描述，并对感染失败原因进行了初步分析。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 昆虫细胞与病毒 野生型SpltMNPV中山大学分离株由本实验室保存。SeMNPV－SeUS1引自美国加州大学Riverside分校B.A.Federici教授实验室。甜菜夜蛾细胞Se301由荷兰Wageningen大学J.M.Vlak教授惠赠，用φ=10%胎牛血清的Grace's培养基(Invitrogen)27℃培养。

1.1.2 供试昆虫 斜纹夜蛾、甜菜夜蛾幼虫由本实验室养虫室提供，为人工饲料饲养的健康幼虫。……