李 娜 刘建勋 曾瑞红 (河北医科大学免疫教研室,石家庄050017)

呼吸道合胞病毒(RSV)是婴幼儿下呼吸道感染的最重要病原,主要引起肺炎和支气管炎,严重感染者可导致哮喘综合征;另外,RSV也是老年人和免疫缺陷成人哮喘、肺炎、支气管炎的主要病因,随着老龄社会的来临,因RSV感染而住院和死亡的老年人数逐年上升[1]。接种疫苗是重要的预防措施,世界卫生组织已将RSV疫苗定为优先发展的疫苗之一,但由于免疫病理相关的安全性问题,至今尚无安全有效的疫苗上市。粘附蛋白G是RSV的两种主要跨膜糖蛋白之一,是RSV感染后适应性免疫应答的靶标,M2蛋白是RSV的基质蛋白,含有特异性细胞毒性T细胞(CT L)表位。我们制备了一例RSV重组蛋白疫苗 G1F/M2,含有 G蛋白的中和抗体表位片段(G：125-225)和RSV-M2蛋白的CD8+T细胞表位片段(M2：81-95),并已经对其免疫原性和保护性进行了广泛的研究[2,3]。含非甲基化CpG基序的DNA或寡核苷酸(CpGODN)是目前已知的最有潜力的佐剂,通过激活T oll-like受体9(T LR9)等受体激活细胞,不仅能刺激固有免疫而且还能激活适应性免疫应答[4]。本实验人工合成了硫代CpG2216寡核苷酸(简称CpG),将其作为佐剂与重组疫苗 G1G/M2共免疫BALB/c小鼠,研究其对G1F/M2的细胞免疫原性的佐剂效应。胞;取1×106ml-1SP2/0细胞,加入 G1F/M2蛋白至终浓度为10μmol/L,置CO2培养箱中37℃培养2小时得靶细胞;将效应细胞与靶细胞SP2/0-NS3按效靶比50∶1加载到96孔细胞培养板中,未刺激的SP2/0细胞作为对照细胞,同时设置靶细胞SP2/0自然释放LDH孔和最大释放LDH孔,分别设3个复孔,在CO2培养箱37℃共培养6小时,根据LDH释放试剂盒说明书检测CT L活性。……