马瑜，李勃*，肖明

(1.陕西省微生物研究所，陕西西安710043;2.西北大学附属中学，陕西西安710069)

蛋壳内膜(eggshell membrane，ESM)是指蛋壳与蛋白之间的一层厚度约70 μm的生物膜，其中有机组分占70%，无机组分占10%，含水量约为20%;有机组分中主要包括一些不溶性的蛋白质，如胶原蛋白(Ⅰ型、Ⅴ型和Ⅹ型)、骨桥蛋白和骨唾液酸糖蛋白，以及少量的碳水化合物和脂质［1］。蛋壳内膜的骨架结构主要是由角蛋白和粘多糖通过角蛋白分子链间及链内高度的二硫键交联形成内外2层紧密的纤维网状蛋白［2］。因蛋壳内膜中富含的角蛋白及构成胶原蛋白的羟脯氨酸以及透明质酸、粘多糖等多种有机成分与人体皮肤密切相关［3］，所以在医疗卫生、化妆品、生物制药以及轻工等领域都具有很大的应用价值［4］。但是由于蛋壳内膜特有的纤维网状结构使其在自然条件下非常稳定，对于酸、碱以及蛋白酶都具有极好的耐受性，且不溶于水和多种溶剂，因而目前仍是一种无法有效利用的生物质资源［5］。随着我国现代蛋制品加工业的不断发展，在很大程度上改变了原来的蛋壳来源分散、不易收集的情况，但由于不能对其进行有效利用从而造成了资源的浪费，因此对蛋壳及蛋壳内膜资源化研究与开发具有重要的理论与实践意义。本研究从土壤中分离筛选到1株能够有效分解蛋壳内膜的细菌菌株Pes207，通过生理生化试验以及16S rRNA的序列测定确定其为假单胞菌属(Pseudomonas)的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。通过对其发酵产物的分离纯化，从中分离到了一种能够分解蛋壳内膜的蛋白酶，并对其酶学性质进行了初步研究。……