慕娟，问清江，李叶昕，党永

(陕西省微生物研究所，陕西西安710043)

木聚糖酶是可将木聚糖降解成低聚木糖和木糖的水解酶，其中包括内切β-木聚糖酶和外切β-木聚糖酶，可以切割主链内部的糖苷键或从非还原端逐一切割单糖而将木聚糖水解，降解产物分别为低聚木糖或木糖［1］。关于木聚糖酶的研究起始于20世纪60年代，现在已知能够产生木聚糖酶的菌种包括细菌、真菌、霉菌等，不同来源的木聚糖酶的催化特性是有差异的［2］，有不同的最适pH和最适作用温度，可以应用于造纸工业、食品工业、饲料工业、制药工业等众多领域［3-6］。碱性木聚糖酶可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，减少传统漂白工艺中氯用量，降低排污负荷，有利于环境保护，同时还可以改善纸张品质。已选育出的产碱性木聚糖酶的短小芽胞杆菌M-26，最高产酶活力可达625 IU/mL，具有良好的开发价值。为了更好地开发碱性木聚糖酶产品，从M-26发酵液分离纯化碱性木聚糖酶，并对其酶学性质进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种短小芽胞杆菌M-26。

1.1.2 试剂桦木木聚糖(brich wood xylan)，Sigma公司产品;3，5-二硝基水杨酸(DNS)，化学纯;sephadexG-25(国产);cellulose DE-52(Sigma公司);其他试剂为市售分析纯。

1.1.3 仪器层析柱:1.5 cm×10 cm，1.5 cm×30 cm;GL-20M冷冻离心机(上海);BYY-10C电泳仪(北京);752紫外分光光度仪(上海);722分光光度仪(上海);LGJ-冷冻干燥机(河南)。

1.2 方法

1.2.1 粗酶液的制备M-26发酵液4 000 r/min低温离心15 min，收集上清液为粗酶液。

1.2.2 (NH4)2SO4盐析用量的确定分别取10 mL上清液，加入(NH4)2SO4至饱和度为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%，充分混合均匀;4℃，放置过夜;4℃，4 000 r/min离心15 min，收集沉淀，测定沉淀的酶活和蛋白含量。……