蒋 霞，唐德智，杨玉芳(.广西医科大学第一附属医院药剂科，南宁市 5300;.南宁市食品药品检验所，南宁市 53000)

妇炎康复胶囊为国家药品标准(新药转正标准中药第三十五册)收载品种，含败酱草、陈皮、薏苡仁、川楝子、柴胡、黄芩、赤芍等7味中药，具有清热利湿，化瘀止痛等功效，用于治疗湿热瘀阻所致妇女带下，色黄质黏稠或如豆渣状，气臭，少腹、腰骶疼痛，舌暗苔黄腻等症及慢性盆腔炎见上述证候者。为有效控制该制剂质量，确保其临床疗效，在参考其他文献的基础上［1，2］，笔者以处方中主药陈皮的有效成分橙皮苷为定量控制指标，采用反相高效液相色谱法测定其含量，现报道如下。

1 仪器与试药

日本岛津 LC－2010A HT高效液相色谱仪(包括 LC－2010A紫外检测器)。LC－Solution色谱数据工作站;日本岛津UV－1601紫外分光光度计;SB25－12DTS型超声波清洗器(功率:250 W，频率:33 kHz)。乙腈为色谱纯，磷酸为色谱纯，水为超纯水。橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110721－200211，供含量测定用)。妇炎康复胶囊(陕西 A药业有限公司，批号:071001;吉林 B药业有限公司，批号:071227，080102;江西 C药业有限公司，批号:20061203、20070601;规格:每粒装0.38 g)为市售药品。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:岛津 Shim－pack VP－0DS C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈 － 0.2% 磷酸(19∶81);检测波长:283 nm;流速 1.0 mL·min－1;柱温 30℃;进样量:10 μL 。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取60℃减压干燥4小时的橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含100 μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取本品适量，研细，取约1.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，密塞，称定重量，超声处理25 min(功率250 W，频率33 kHz)，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 阴性供试品溶液的制备

取不含陈皮的处方，按制备工艺制成缺陈皮的阴性供试品，再按供试品溶液的制备方法制成阴性供试品溶液。

2.5 系统适用性试验

分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录色谱图，结果见图1。在此条件下阴性供试品对橙皮苷的测定无干扰，而且橙皮苷与其他组分可达到基线分离，分离度R>1.5。

2.6 线性关系考察

精密称取橙皮苷对照品9.86 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为橙皮苷对照品储备液。精密吸取对照品储备液 0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 mL，分别置 10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件进样，记录峰面积，以橙皮苷对照品进样量(μg)为横坐标，以峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为:Y=1.792×106X+2.058×104，r=0.999 9。结果表明，橙皮苷进样量在0.099～1.775 μg范围内线性关系良好。

图1 妇炎康复胶囊HPLC图 Fig1 HPLC chromatograms of Fuyan Kangfu Capsules

2.7 精密度试验

精密吸取橙皮苷对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，重复进样6次，测定橙皮苷峰面积，结果 RSD为0.36%，表明仪器精密度良好。

2.8 稳定性试验

精密吸取新制备的供试品溶液(陕西A药业有限公司，批号:071001)，按上述色谱条件，分别于 0、2、4、6、8、10、24 h 进样1次，记录色谱峰面积，RSD为1.32%。表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.9 重复性试验

取同一批号样品 6份(陕西 A药业有限公司，批号:071001)，按供试品溶液的制备方法制备6份供试品溶液，分别测定，计算橙皮苷含量，其平均含量为 0.44 mg/粒，RSD为1.25%(n=6)，说明本文方法有较好的重复性。

2.10 回收率试验

精密称取已知橙皮苷含量(陕西A药业有限公司，批号:071001橙皮苷含量0.44 mg/粒)的样品约0.75 g共6份，分别精密加入一定量的橙皮苷对照品(橙皮苷10.85 mg→50 mL，分别精密加入4 mL)照“2.3”项下方法操作，制备供试品溶液，测定橙皮苷的含量，计算回收率，测定结果见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=6)Tab1 Results of recovery rate(n=6)

2.11 样品含量测定

取5批妇炎康复胶囊，按“2.3”项下方法制备供试品溶液并按上述色谱条件测定峰面积，按外标法计算样品中橙皮苷的含量，结果见表2。

表2 妇炎康复胶囊的含量测定结果(n=3)Tab2 Contents of Fuyan kangfu Capsules(n=3)

3 讨论

陈皮为妇炎康复胶囊的组成成分之一，主要含橙皮苷。本实验参考文献［3～5］，建立高效液相色谱法测定制剂中橙皮苷含量的定量分析方法，该方法操作简便，提取完全，杂质对分离组分无干扰，灵敏度高，重现性好，可用于妇炎康复胶囊的质量控制。取橙皮苷对照品溶液，在紫外分光光度计上于波长200～400 nm处进行扫描，结果在283 nm处有最大吸收，故选择283 nm为检测波长。本实验对样品分别用甲醇、50%甲醇、70%乙醇进行超声处理 ，结果发现甲醇超声提取较好;为确保样品中橙皮苷充分提取完全，分别超声提取 10、15、20、25、30、45 min后进样测定峰面积比较，结果超声处理25 min以后橙皮苷峰面积基本不变，故选用超声处理25 min。笔者比较了甲醇 － 水(25∶75)、乙腈 －0.2%磷酸(19∶81)，甲醇 －0.2%磷酸(45∶55)等 3种流动相，结果表明:乙腈 －0.2%磷酸比例为(19∶81)时，橙皮苷峰形对称，分离完全，阴性样品无干扰，故选用此为流动相。

［1］徐天玲.高效液相色谱法测定妇炎康复胶囊中芍药苷的含量［J］.湖北中医杂志，2006，28(8):51.

［2］王隶书，严玉清，程东岩.妇炎康复胶囊中芍药苷的HPLC 测定［J］.中国药师，2004，7(9):698.

［3］国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)［S］.2005年版.北京:人民卫生出版社，2005:132.

［4］王举涛，陈 明，刘丛彬，等.HPLC测定养胃舒软胶囊中橙皮苷的含量［J］.中成药，2008，30(2):309.

［5］付梅红，方 婧，杨 桦，等.郁枢达片中橙皮苷的含量测定［J］.中国中药杂志，2007，32(24):2 671.