环介导恒温扩增技术快速检测非洲猪瘟病毒*

2010-09-21王彩霞林祥梅吴绍强

动物医学进展 2010年2期

王彩霞,刘建,林祥梅,吴绍强

(中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所,北京 100029)

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒科的非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病[1]。1921年Montgomery在非洲肯尼亚首先发现。由于对养猪业危害较大,而且尚无有效的疫苗用于防控,因此它被世界动物卫生组织(OIE)列为必报传染病之一。

我国地域辽阔,北部与东欧国家接壤,而东欧国家最近发生的非洲猪瘟疫情必须引起我们的关注。从2007年11月以来的1年时间里,俄罗斯共计暴发非洲猪瘟 45起,感染发病2 586头,死亡2 481头,共计10 583万头猪被淘汰[2]。我国与俄罗斯接壤边境线长达4 300 km,而且很多地区还是陆地接壤,野猪等野生动物跨境活动频繁,建立现场快速检测方法,对于防止疫病跨境传播极为必要。

环介导恒温扩增 (loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是日本学者开发的一种新颖的恒温核酸扩增方法,具有快速、敏感、特异、仪器设备要求低、结果判定简单等特点。近年来,国内外已应用该法在细菌性疾病[3]、病毒性疾病[4]、寄生虫病[5]等多种动物疫病的检测方面以及植物物种鉴别、转基因与耐药基因研究和胚胎性别鉴定等方面开展了大量的研究工作。

本研究以人工合成的ASFV P72基因为模板,通过设计外引物和内引物,建立了快速检测ASFV的LAMP检测方法,并对结果判定方法进行了敏感性比较。