李玮 谭建 龙雷

肺癌是严重危害人类生命健康的常见病，目前国内外肺癌的发病率和死亡率还在不断上升。肺癌在城市占男性恶性肿瘤死亡的38.08%，女性的16%，均居首位。大多数肺癌患者确诊时已失去根治性手术切除的机会，全身化疗是一种有效的治疗。一项III期随机试验结果[1]显示，化疗对晚期NSCLC的有效率为20%-40%，1年生存率为35%-45%，中位生存期也仅为8个月-9个月。NSCLC的治疗疗效有待进一步提高，并需要建立新型高效的治疗方法。

放射性碘是治疗恶性肿瘤的一种有效治疗手段，但其发挥杀伤肿瘤细胞效应的基础是肿瘤细胞必须具有摄取碘的能力，从而利用131I发射的β射线发挥治疗作用。为了使原来不摄碘的肺癌细胞摄取碘，我们将人钠碘转运体（human sodium/iodide symporter, hNIS）基因引入大细胞肺癌细胞系H460；为了延长碘在甲状腺细胞中的滞留时间，使肿瘤细胞摄碘能力明显增高，我们同时共转染入人甲状腺过氧化物酶（human thyroperoxidase, hTPO）基因，从而达到提高治疗效果的目的。

1 材料与方法

1.1 材料和仪器 H460人大细胞肺癌细胞由中国医学科学院放射医学研究所惠赠，pcDNA3.1/hNIS质粒由本实验室构建并保存。G418硫酸盐、DMEM高糖型培养基和脂质体（LipofectamineTM2000）购自美国Invitrogen公司；实验用酶类均购自日本Takara（宝生物）公司。125I购自中国中核高通公司。1261型γ计数器为澳大利亚LKB公司生产。

1.2 实验方法

1.2.1 重组腺病毒的构建

1.2.1.1 hTPO的亚克隆 将hTPO插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV，C端融合6×His标签，插入位点为NotI和HindIII，并对目的基因测序。

1.2.1.2 获得腺病毒载体质粒AdTPO 使用限制性内切酶PmeI线性化pAdTrack-CMV-TPO，并与腺病毒骨架质粒AdEasy-1共同转化重组菌感受态大肠杆菌BJ5183，获得重组质粒，PacI酶切鉴定电泳。……