李景峰 郑启新 郭晓东 卢宏伟 林振宇 兰生辉

(华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科，武汉 430022)

引言

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)是目前能够诱导骨组织形成的一类局部生长因子，其中以 BMP2的成骨能力最强[1]。本课题组自行设计并合成的 BMP2活性多肽是根据天然BMP2具有诱导成骨功能的核心功能区设计合成的含24个氨基酸的寡肽，在前期的体外细胞实验研究中，已证明其具有与BMP2类似的骨诱导活性[2-3]。

胶原支架材料被认为是骨形态发生蛋白载体的金标准[4]。鼠尾Ⅰ型胶原作为天然的生物材料，在结构和抗原性方面与人体组织的Ⅰ型胶原基本相同;同时胶原支架材料的三维空间结构具有一定的强度以及适宜的孔径，保持了天然的渗透性，对BMP2活性多肽可以起到锚定和支持作用，为细胞增殖和功能分化提供合适的微环境[5-6];而且它来源广泛，成分较为单一，制备比较方便[7]，是构建组织工程支架的良好原料。本实验利用鼠尾Ⅰ型胶原作为BMP2活性多肽的载体，植入大白鼠股四头肌肌袋，验证与评价BMP2活性多肽诱导成骨能力，为下一步临床应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 鼠尾Ⅰ型胶原

实验所用胶原为酸溶性鼠尾胶原，其主要成分为Ⅰ型胶原，参照文献的方法[7-8]进行提取，具体方法为：①从新鲜大鼠尾尾根部切断鼠尾，置于75%乙醇中浸泡30 min，抽出尾腱至于平皿中;②抽取的肌腱浸入70%酒精中浸泡20 min，剪碎，三蒸水清洗转移至0.5%乙酸中，每根鼠尾约250 mL，搅拌48 h，充分溶解;③冷冻离心，20000 r/min，20 min后取上清……