张树成 贺 斌 任彤彤 王尚明 张长勇 高 宇 刘永军 陈西华 王介东

洗涤剂(洗洁精)属于低毒或微毒类产品，在现代生活中广泛普遍的使用，其对环境及人体健康的影响也日益引起人们的关注。民用洗洁精的主要表面活性剂为阴离子型的直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzenesulfonate，LAS)，由于其成本低、性能好，因而广泛用于家用洗涤剂中，如餐具洗涤剂和洗衣粉中，洗发水和浴液中也含有少量。LAS含有剧毒苯的成分，虽然含量较低，但其化学性质稳定，不易降解和消除，因此大量的接触会产生毒性，儿童误服会产生肾衰等急性症状［1］和5%［2］死亡。洗洁精通常是通过皮肤接触、餐具和蔬菜水果残留等方式进入人体，剂量非常小，一般认为不会产生明显毒性。由于洗洁精在人们日常生活中经常广泛使用，且是低剂量长期密切与人体接触，其蓄积作用下的生殖毒性是人们关注的问题，而相关研究极少。为此，我们利用小鼠进行了市售民用洗洁精的雄性生殖毒性实验，报告如下。

材料和方法

一、 民用洗洁精的来源和配制

购买市售民用洗洁精2种，生产厂家均标识为执行国家“手洗餐具用洗涤剂标准”(GB9985)，分别以LB和BM表示。用自来水配制为1/万、1/10万、1/100万共3个剂量。

二、 实验动物和分组

选择无特定病原菌(SPF级，三级动物)成年(16周龄)雄性NIH小鼠，在屏障环境中饲养和进行操作。自由饮食，自由饮用配制的3个不同剂量的LB和BM连续30天为实验组(每组10只)，以自由饮食自来水动物为对照组(每组15只)。

三、 实验方法和观察

各组动物每周称量体重，连续30d至动物20.5周龄。断脊处死，解剖各种组织器官称重。精子分析方法为双侧附睾称重后，按照文献方法［3］进行操作和分析。

四、 病理组织检查

睾丸(2侧)和附睾(1侧)于Bouin中固定，常规石蜡包埋，5μ切片，HE染色，镜检。

五、 统计分析

结 果

一、 体重

动物初始体重、每周体重、处死前体重和每周体重变化率，实验组与对照组间差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。显示对动物生长发育和体重无明显影响。

表1 洗洁精对动物体重的影响(±s，g)

表1 洗洁精对动物体重的影响(±s，g)

分 组 给药前给药后1周 2周 4周LB 组1/万 41.7 ±2.9 40.9 ±3.4 41.3 ±3.6 42.0 ±3.5 1/10 万 40.9 ±3.5 40.3 ±4.6 41.1 ±4.6 42.1 ±4.4 1/100 万 40.6 ±2.9 39.1 ±3.7 39.9 ±3.7 41.6 ±2.7 BM组1/万 42.7 ±3.4 42.6 ±3.4 43.5 ±2.9 43.4 ±3.8 1/10 万 40.9 ±3.1 41.3 ±3.8 42.3 ±3.6 43.7 ±4.0 1/100 万 41.9 ±2.8 40.7 ±3.7 42.7 ±3.7 43.4 ±2.6对照组41.5 ±3.1 41.8 ±3.3 42.5 ±3.4 43.6 ±3.2

二、 组织器官重量

由表2可见，动物5种主要脏器组织重量，LB的3个剂量实验组均比对照组有增加的趋势;BM只有脾脏重量在3个剂量组，均比对照组显示有增加的趋势，其他4种器官重量均与对照组接近;LB和BM的3个剂量组与对照组比较，均无统计学差异(P＞0.05)。

表2 洗洁精对动物组织器官重量的影响(±s，g)

分 组 心脏 肝脏 脾脏 肺脏 肾脏LB 组1/万 0.237 ±0.02 1.929 ±0.25 0.174 ±0.04 0.308 ±0.08 0.661 ±0.05 1/10 万 0.255 ±0.07 1.927 ±0.25 0.229 ±0.08 0.330 ±0.09 0.670 ±0.05 1/100 万 0.223 ±0.04 1.951 ±0.25 0.210 ±0.08 0.272 ±0.05 0.644 ±0.11 BM组1/万 0.223 ±0.04 1.792 ±0.25 0.197 ±0.07 0.247 ±0.06 0.581 ±0.09 1/10 万 0.204 ±0.03 1.783 ±0.17 0.166 ±0.05 0.254 ±0.06 0.619 ±0.11 1/100 万 0.228 ±0.08 1.761 ±0.19 0.193 ±0.08 0.304 ±0.09 0.591 ±0.10对照组 0.206 ±0.04 1.792 ±0.29 0.155 ±0.02 0.274 ±0.060.597 ±0.07

三、 生殖器官重量

LB和BM对动物储精囊前列腺的重量均有增加趋势，显示出一定的剂量效应关系，但与对照组比较无统计学差异(P＞0.05);对睾丸、附睾和会阴复合体也均无明显影响(均P＞0.05)。见表3。

四、 精子功能指标

1.对精子运动性指标的影响 以精子优秀快速前向泳动(a级)、良好一般前向泳动(b级)、慢速前向泳动(c级)的精子活动分级和精子存活率的6项指标的分析显示，LB和BM的3个剂量组与对照组比较，均无统计学差异(P＞0.05)，见表4。

2.精子数目指标 LB和BM的3个剂量组与对照组比较，均无统计学差异(P＞0.05)，见表5。

3.精子形态指标 LB和BM的3个剂量组与对照组比较，均无统计学差异(P＞0.05)，见表6。

表3 洗洁精对生殖器官组织重量的影响(±s，g)

表3 洗洁精对生殖器官组织重量的影响(±s，g)

分 组 睾丸 附睾 储精囊+前列腺 会阴复合体LB 组1/万 0.242 ±0.04 0.092 ±0.03 0.469 ±0.16 0.064 ±0.02 1/10 万 0.220 ±0.05 0.104 ±0.02 0.385 ±0.10 0.053 ±0.01 1/100 万 0.230 ±0.06 0.090 ±0.01 0.373 ±0.08 0.062 ±0.01 BM组1/万 0.241 ±0.03 0.088 ±0.01 0.395 ±0.14 0.071 ±0.01 1/10 万 0.242 ±0.02 0.092 ±0.01 0.382 ±0.15 0.065 ±0.01 1/100 万 0.240 ±0.02 0.097 ±0.01 0.377 ±0.06 0.058 ±0.01对照组 0.233 ±0.03 0.098 ±0.01 0.366 ±0.06 0.062 ±0.01

表4 洗洁精对精子运动性指标的影响(±s，%)

表4 洗洁精对精子运动性指标的影响(±s，%)

分 组 活动率 存活率a b c a+b LB 组1/万 48.85 ±5.23 66.56 ±11.22 10.43 ±2.99 15.71 ±2.89 22.71 ±6.21 26.14 ±2.92 1/10 万 43.00 ±14.33 68.78 ±10.06 8.86 ±4.88 12.86 ±4.88 21.28 ±5.70 21.72 ±4.86 1/100 万 42.43 ±15.69 69.51 ±8.25 8.66 ±4.22 13.91 ±3.63 19.86 ±4.21 22.57 ±3.84 BM组1/万 44.85 ±21.4 70.24 ±18.61 7.86 ±4.87 14.28 ±7.31 22.71 ±10.84 22.14 ±6.4 1/10 万 40.71 ±9.32 71.17 ±20.63 6.85 ±4.74 10.71 ±3.45 23.14 ±3.76 17.56 ±3.9 1/100 万 44.71 ±7.78 69.97 ±15.36 8.57 ±3.91 12.86 ±3.91 23.28 ±3.68 21.43 ±3.8对照组 44.28 ±11.57 70.49 ±17.43 9.28 ±4.33 13.92 ±5.25 21.07 ±5.61 23.20 ±4.7

表5 洗洁精对精子数目指标的影响(±s)

表5 洗洁精对精子数目指标的影响(±s)

分 组 计数(×106/ml)总数( ×106/个睾丸)每克睾丸精子总数(×106/g)每克附睾精子总数(×106/g)LB 组1/万 15.43 ±2.99 30.86 ±5.98 127.52 ±33.55 335.43 ±69.25 1/10 万 15.86 ±6.01 31.71 ±10.02 144.14 ±22.46 304.90 ±56.45 1/100 万 14.79 ±6.51 29.57 ±11.22 128.56 ±34.23 328.56 ±60.10 BM组1/万 15.36 ±8.43 30.71 ±16.87 127.42 ±43.35 348.98 ±78.91 1/10 万 14.05 ±1.53 28.01 ±3.06 115.74 ±15.24 304.46 ±46.81 1/100 万 14.53 ±3.21 29.05 ±6.43 121.04 ±25.40 299.48 ±71.47对照组 15.29 ±6.51 30.57 ±13.02 131.22 ±34.23 311.94±76.82

表6 洗洁精对精子形态指标的影响(±s，%)

表6 洗洁精对精子形态指标的影响(±s，%)

分 组 正常形态 异常形态 头部异常 尾部异常LB 组1/万 92.97 ±45.04 7.03 ±45.04 3.52 ±1.36 3.51 ±1.44 1/10 万 93.78 ±22.78 6.22 ±22.78 2.94 ±2.01 3.28 ±1.83 1/100 万 93.88 ±46.09 6.12 ±46.09 3.69 ±2.61 2.43 ±0.96 BM组1/万 93.65 ±45.81 6.35 ±45.81 4.02 ±2.17 2.43 ±1.08 1/10 万 95.02 ±33.08 4.98 ±33.08 2.20 ±1.95 2.78 ±1.85 1/100 万 94.22 ±25.65 5.78 ±25.65 3.63 ±2.01 2.15 ±2.03对照组95.23 ±23.41 4.77 ±23.41 2.20 ±1.95 2.57 ±1.03

五、 组织形态

LB和BM的3个剂量组的睾丸组织形态学分析显示，睾丸生精上皮和间质组织的各种细胞功能均为正常表现，生精功能未受到明显影响。

讨 论

我们在以往对大鼠实验中观察到高剂量的洗洁精具有一定的雄性生殖毒性作用［3］。本实验是选择成年小鼠以自由饮水方式给予不同剂量洗洁精连续30天摄取。摄取量换算，若按照雄性小鼠生命周期100周(雄性小鼠平均寿命700d)和男性平均寿命70岁(3 650周)换算分析，小鼠摄取洗洁精量相当于人连续每天喝下洗洁精1 095天(3年)。若以正常人每天平均耗水量为2 000～2 500ml，以夏季需要3 000ml的最大量换算，本实验小鼠每日摄入的洗洁精量，在1/万、1/10万、1/100万剂量时，相当于人每天摄取了 0.3ml、0.03ml、0.003ml的洗洁精。也就是说，本实验得到的结果，相当于人每天摄入了0.3ml、0.03ml、0.003ml的洗洁精连续3年(1095天)。

本实验结果显示:2种市售民用洗洁精在1/万、1/10万、1/100万剂量下连续通过饮水摄取30天，对雄性NIH小鼠未发生雄性生殖毒理作用表现。

1 Suri V，Mahi S，Bhalla A，et al.Detergents － uncommon household poisons.Indian J Med Sci 2009，63:311 ～312.

2 李雅轩，郭平仲，史晓红.洗涤剂对小麦根尖分生细胞影响的研究。云南大学学报(自然科学版遗传性专辑)，1999，21(3):95～97.

3 贺斌，张树成，任彤彤，等.洗洁精对雄性大鼠生殖功能的影响.中国计划生育学杂志，2010，18(4):268 ～272.