,孙元

(1航天中心医院,北京 100049;2第四军医大学药学系药物研究所)

染料木素(Gen)是从植物怀槐中提取的一类新药,国内外关于 Gen治疗骨质疏松(OP)的报道很多[1～4]。2007年 5月～2008年 5月本研究就 Gen对老年大鼠 OP的作用及机制进行了相关探讨。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物 雌性 SD大鼠 50只,12月龄(老年),体质量(330±20)g;雌性 SD大鼠 10只,5月龄 (青年),体质量(150±20)g。

1.2 药品与试剂 Gen药粉(纯度≥98.5%),临用前以生理盐水配制成不同浓度的混悬液备用。尼尔雌醇片购自上海华联制药有限公司,苦味酸、氯胺T、肌酐(Cr)及羟脯氨酸(Pyd)标准品购自北京化学试剂公司,血碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、降钙素(CT)、甲状旁腺激素(PTH)试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 模型复制及实验方法 老年雌性 SD大鼠 50只随机分为 5组:老年大鼠组(Model)、尼尔雌醇组(Nilestriol)和 Gen高 (GenH)、中 (GenM)和低(GenL)剂量组,每组 10只;另取 10只青年雌性大鼠作为对照组(Control)。以上大鼠给予治疗用药,剂量为 Nilestriol1.5mg/kg,GenH、GenM、GenL分别为 Gen 18、9、4.5 mg/kg,Control组和 Model组注射等容量生理盐水;以上给药除 Nilestriol组 1次 /周外其他各组均为 1次/d。给药后 6周称大鼠体质量,用代谢笼收集大鼠 24 h尿液,球后取血 5 ml,脱颈椎处死动物,剥离双侧股骨、胫骨和腰椎(L2～4),仔细剔除结缔组织,进行相关指标测定。

1.4 相关指标测定

1.4.1 骨量 大鼠右后肢股骨去净软组织后,经 105℃烤至恒重,用精密分析天平称量股骨称干重(WB),经灰化炉 550℃灰化6 h后称量股骨灰重(WBA)。

1.4.2 骨钙 在左胫骨上同一部位称取约 0.1 g的样品于烧杯中,加 3 ml消化液,盖上表面皿,置于通风橱内过夜,次日在电热板上加热消化至溶液为无色透明时,升高电热板温度继续消化并蒸干,取下冷却,加少量 0.5%HNO3溶液溶解残渣并定容至10 ml容量瓶中,充分摇匀后待测。……