吕根法,吴天顺,郑宏治,石宏伟,王晓红,王国治

内毒素是G-菌细胞外膜的主要组成部分,它是引起脓毒症、多器官功能衰竭等疾病的主要致病因子。由内毒素引起的脓毒症具有很高的死亡率,在西方发达的国家,已成为ICU病房的第一杀手。因此对内毒素及其拮抗措施的研究,一直是临床医学关注的焦点。近20年来,尽管各国科学家投入了大量的人力、财力,但是到目前为止,人们仍没有寻找到一种高效、低毒、来源容易的抗内毒素药物供临床使用[1]。中草药在我国具有来源广泛、价廉等优点,在治疗脓毒症方面具有悠久的历史,积累了丰富的验方,并显示出一定的临床效果[2]。近年,通过对中草药体内外拮抗内毒素的实验研究,已证实多种中草药具有拮抗内毒素作用。因此,从中草药中寻找并分离拮抗内毒素的有效成分,具有广阔的前景。

1 材料与方法

1.1 材料42 种中草药来源于本院中药房;LPS O55∶B5(酸抽提法, 批号 31K4120, Sigma产品)、Samonella Lipid A Re595(批号31K4053, Sigma产品;特异性鲎试剂、内毒素标准品O111∶B4,广州湛江安度斯生物工程公司;生物传感器及其疏水样品池为美国Thermo公司产品;EDS-99细菌内毒素测定系统,广州湛江科学仪器厂。

1.2 方法

1.2.1中草药样品液制备 42种中药各100 g,用自来水反复冲洗后,再用5 ～7 倍蒸馏水漂洗, 200 m L蒸馏水浸泡2 h,煎45 min,滤过, 40 000 g离心15 min,收集上清液100 mL。

1.2.2Lipid A的包被[3]疏水样品池上Lipid A的包被按Thermo公司样品池包被流程进行。

1.2.3结合能力测定 取中药水煎液5 μL上样,按照生物传感器操作流程分别进行亲和、解离、再生反应。结合反应值RU(Respose unit, RU)为解离平衡值与基线值的差。……