马 雷

(新乡市中心血站，河南新乡453000)

近年来，葡萄球菌耐药率不断升高，越来越受到临床的关注。葡萄球菌耐药监测是实施抗菌药物合理使用的技术策略之一，准确及时的细菌耐药监测结果可帮助临床医生掌握细菌对抗菌药物的耐药动向和耐药变迁，对指导抗菌药物的合理应用有重要意义。该工作对新乡市中心血站微生物室2009年从各类标本中检出的506株葡萄球菌进行了临床资料分析和药物敏感性测定，分析其分布及耐药性，以期为临床医生合理使用抗菌药物提供依据。

1 材料和方法

1.1 菌株来源 该站微生物室2009年1月至12月从患者各类标本中分离出的葡萄球菌506株，同一患者相同标本菌株不重复计入，对菌株鉴定到种。金黄色葡萄球菌ATCC29213为质控菌株。

1.2 试剂与仪器 检测用的抗菌药物包括阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、头孢噻吩、头孢唑林、万古霉素、替考拉宁、红霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、四环素、氯霉素、克林霉素、庆大霉素、利福平、复方新诺明等16种。VITEK-32型全自动微生物分析仪，GPI鉴定卡，仪器配套试剂等。药敏纸片与仪器均为法国生物梅里埃公司产品。

1.3 方法 样本采集，分离培养，菌株鉴定，药敏试验按照《全国临床检验操作规程》［1］进行操作。获得纯培养后，经革兰染色，触酶试验，凝固酶试验等初筛，用GPI鉴定卡在VITEK-32型全自动微生物分析仪上进行菌株鉴定。用K-B法作抗菌药物敏感性试验，用美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐标准判断结果。耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus，MRSA)和耐甲氧苯青霉素凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci，MRCNS)的测定:金黄色葡萄球菌对头孢西丁(30微克/片)抑菌圈小于或等于19 mm为MRSA;凝固酶阴性葡萄球菌对头孢西丁抑菌圈小于或等于24 mm为MRCNS。

1.4 统计学方法 用Whonet 5.4软件进行统计学分析。

2 结果

2.1 葡萄球菌的分布 在各类标本检出的微生物中，葡萄球菌检出率为72.0%，共506株。金黄色葡萄球菌占52.4%(265/506)，其中MRSA检出率为54.3%(144/265)，苯唑西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)为45.7%;分离自住院患者的202株金黄色葡萄球菌中MRSA占64.3%(130/202);来自门诊或急诊患者的63株金黄色葡萄球菌中MRSA占20.6%(14/63)，中枢神经系统中MRCNS检出率为85.6%(206/241)，苯唑西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)为14.4%;住院患者的196株CNS中，MRCNS占 90.8%(178/196);门诊或急诊患者的中枢神经系统中，MRCNS占62.2%(28/45)，在中枢神经系统中中，表皮葡萄球菌占46.5%(112/241)，溶血葡萄球菌占30.3%(73/241)，人葡萄球菌占14.1%(34/241)，头状葡萄球菌占4.9%(12/241)，腐生葡萄球菌占 2.5%(6/241)，其他葡萄球菌占1.7%(4/241)。MRSA和MRCNS在各类标本中的分布见表1。

表1 MRSA和MRCNS在各类标本中的分布情况［%(n/n)］

2.2 葡萄球菌对16种抗菌药物的耐药率 见表2。

表2 葡萄球菌对16种抗菌药物的耐药率(%)

3 讨论

葡萄球菌广泛存在于自然界，包括人和动物的皮肤及其与外界相通的腔道中，是人类感染性疾病重要的病原菌之一。当机体抵抗力降低或其进入非正常寄居部位时，可引起包括呼吸道、泌尿生殖系统、创面和血液等多种感染。葡萄球菌的耐药性近20年来呈不断上升趋势［2］。

分析发现，葡萄球菌在临床微生物中检出率最高，达72.0%，是医院感染的主要病原菌。金黄色葡萄球菌中MRSA检出率为54.3%，稍高于国内学者的报道［3］。在中枢神经系统中中，表皮葡萄球菌为主要流行株，其次为溶血葡萄球菌和人葡萄球菌，与文献［4］报道基本一致。MRCNS在中枢神经系统中中检出率为83.4%，略低于国内报道［5］，这可能是因为观察对象不同所致。分析发现，门诊或急诊患者中MRSA、MRCNS的检出率明显低于来自住院患者的检出率，可能与医生对住院患者使用抗菌药物种类及剂量不当有关。

从标本类型分析发现，尿标本中MRSA检出率最高，其余依次为呼吸道标本，血液标本，伤口分泌物等。MRCNS检出率血液中最高，其余依次为尿标本、伤口分泌物、呼吸道标本等。提示临床对不同部位感染经验用抗菌药物应区别对待。

该研究结果发现，MRSA对氯霉素和复方新诺明的耐药率较低，均在30.0%以下，对β-内酰胺类、喹诺酮类、红霉素类、大环内酯类，庆大霉素和四环素类仍保持很高的耐药率，与国内学者近年来对MRSA耐药监测结果相近［5］，但对利福平的耐药率有所上升;进一步分析发现，分离自门诊或急诊患者的MRSA对β-内酰胺类、喹诺酮类、利福平和氨基糖苷类的耐药率等于或稍低于分离自住院患者的MRSA，但对克林霉素、复方新诺明、氯霉素、四环素的耐药率稍高于住院患者的MRSA。MSSA对除红霉素外的抗菌药物耐药率均很低，对克林霉素的耐药率稍高，但也低于红霉素;分离自门诊或急诊患者的MSSA对庆大霉素耐药率低于分离自病房患者的MSSA。MRCNS除利福平和氯霉素外，对其他抗菌药物耐药率均在50.0%以上。MSCNS对氯霉素和利福平的耐药率与MRCNS无明显差异，但对其他抗菌药物的耐药率明显低于MRCNS。MSCNS对喹诺酮类、氯霉素、红霉素和复方新诺明的耐药率高于MSSA，二者对其他抗菌药物耐药率无明显区别。CNS耐药率总体上略低于国内学者报道［6］，这可能与本次观察对象中相当部分为儿童和青少年患者，较少在基层医院使用抗菌药物有关。未发现对万古霉素或替考拉宁耐药的菌株。万古霉素和替考拉宁仍是治疗葡萄球菌感染尤其是重症感染和多重耐药的首选药，但肾功能不全者应慎用万古霉素。

观察结果显示，不同标本或同类标本不同来源，其检出细菌的分布及耐药性各具特点，这与不同医生用药习惯、用药剂量及病种、治疗对象等因素有关。MRSA检出率有所上升，葡萄球菌的耐药率有上升趋势，这将给临床治疗带来更大困难。应加强对葡萄球菌的耐药监测，为临床合理使用抗菌药物提供依据。

［1］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.第3版，南京:东南大学出版社，2006.

［2］McDonald LC.Trends in antimicrobial resistance in health careassociated pathogens and effect on treatment［J］.Clin.Infect Dis，2006，42:65-71.

［3］孙宏莉，王 辉，陈民钧，等.2006年中国七家教学医院革兰阳性球菌耐药性研究［J］.中华检验医学杂志，2008，31(6):635-642.

［4］鹿杏林，郑桂丽，李孝权，等.医院感染凝固酶阴性葡萄球菌分布及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2007，17(10):1 289-1 291.

［5］汪 复.2005中国CHINET细菌耐药性监测结果［J］.中国感染与化疗杂志，2006，6(5):289-295.

［6］甘 丹.老年患者医院下呼吸道感染凝固酶阴性葡萄球菌耐药性分析［J］.检验医学与临床，2009，6(3):165-166.