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非水反相色谱法测定球虫感染后三黄鸡血清中类胡萝卜素的含量

2010-06-07王德圣李永胜

饲料工业 2010年4期
关键词:血清标准实验

王德圣 李永胜 赵 剑

自然界中已发现的类胡萝卜素有600种,都可以看作是从β-胡萝卜素衍生而来的。但只有很少一部分类胡萝卜素能有效的沉积在禽体内。

类胡萝卜素从吸收入血液到沉积到相关部位受到很多因素的影响,其中疾病的感染最为严重。Ruff等(1974)报道了鸡在常见的6种球虫感染后,血清中类胡萝卜素含量在感染后的6~8 d都明显下降;Koutsos等(2003)报道了注射LPS或IL-1引起的血浆中类胡萝卜素含量发生变化。血液类胡萝卜素含量对疾病感染的敏感性引起了研究者的兴趣,而准确测定血液中类胡萝卜素含量的方法还有待完善。另外,测定血液中类胡萝卜素含量有利于真实准确地反映其生物学利用率,从而取代依靠饲料类胡萝卜素含量与产品色泽相关关系这一粗放的评价指标。

高效液相色谱法是近10年来应用最普遍的定性、定量检测血液中类胡萝卜素含量的方法。Waysek提出了以正相色谱法分离类胡萝卜素的标准,但是柱填料硅胶会促进类胡萝卜素的分解。采用常规反相色谱由于流动相中含有一定量水,导致洗脱类胡萝卜素这类非极性组分的峰型不对称,甚至还会发生组分的柱上沉淀。非水反相色谱法被认为是当前测定生物组织类胡萝卜素含量最好的方法(Su等,2002;Furr,2004),但这类研究以人血液为样本,分离的结果中没有出现对角黄素(Canthaxanthin)和Apo类胡萝卜素酯(Apo-Carotenioc ester)的特征描述,而这恰是家禽饲料中应用最多的两种色素成分。

本实验在前人研究的基础上,建立了一种非水反相液相高效色谱测定血液中角黄素和Apo类胡萝卜素酯的分析方法,并比较了在堆型或柔嫩艾美尔球虫感染下血清中这两种物质的变化。……

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