职爱民 左建军 黄志毅 邹仕庚 冯定远

肠粘膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)是肠道的重要功能细胞，参与肠道食糜的消化、吸收、免疫屏障和应激反应等，并与肠道的内、外分泌功能关系十分密切。长期以来，在研究IEC的生物学功能、细胞增殖和分化的调控因素，物质吸收与代谢等多采用肠道肿瘤细胞系为试验模型[1]。然而癌细胞是非正常的细胞，其生理特征明显不同于正常细胞，单纯由癌细胞系的研究结果来解释正常细胞的行为，明显有其不足。原代培养是从供体取得组织细胞后在体外进行的首次培养，原代培养的细胞生物学特性变化较少，最能反映和接近体内生长特性，是一种良好的试验载体。国外早在1993年就有猪肠细胞原代培养的报道[2]，其它类型的猪组织细胞原代培养的报道也不少[3-5]，国内关于动物体细胞原代培养的报道多集中在其它动物身上[6-9]，而关于猪IEC原代培养的方法一直属于空白。本试验的目的就是通过机械和酶消化结合的方法建立猪IEC原代培养的系统，为猪肠道营养的研究提供新的试验材料。

1 试验材料

1.1 试验动物

新生杜×长×大三元杂交仔猪（未吮奶），购于广东省原种猪场。

1.2 主要仪器设备与试剂

NU-2500型CO2细胞培养箱(Nuaire公司，美国)；IX70型倒置生物显微镜(Olympus公司，日本)；5804R型高速大容量冷冻离心机(Eppendorf公司,德国)；SWCJ-1F型超净工作台(苏州净化，中国)；HVE-50型高压蒸汽灭菌锅(HIRAYAMA公司，日本)；GF-M2000型酶标仪（山东高密彩虹仪器公司）；CS101-2AB型鼓风干燥箱(重庆试验设备厂)；79-1型磁力加热搅拌器(江苏金坛荣华仪器总厂)；……