金桩 彭健 胡新文 林声汉 马燕

嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）属于乳杆菌属，是肠道重要的益生菌，对维持胃肠道的生理功能有重要作用，被广泛用于发酵食品与医药行业。但在饲料生产和养殖业中应用报道较少，为了探讨嗜酸乳杆菌在畜牧业生产上的标准化应用，本研究以产酸能力较强的嗜酸乳杆菌-1.557菌株为试验菌，优化了其培养条件和培养基成分，给乳酸菌发酵饲料的标准化生产提供依据。

1 材料和方法

1.1 菌种

嗜酸乳杆菌，由海南青牧原实业有限公司提供。

1.2 试验设备

振荡培养箱(SHZ-A型，上海跃进医疗机械厂生产)、生化培养箱 (DHP120型，上海实验仪器总厂生产)、高压灭菌器(MLS-3750型，日本三洋电子有限公司生产)、磁力搅拌器(JB-3型，上海智光仪器仪表有限公司生产)、便携式pH计(PHB-3型，上海伟业仪器厂生产)、生物洁净工作台(SA-960-2型，上海上净净化设备有限公司生产)、721可见紫外分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司生产）。

1.3 培养基

种子培养基（MRS培养改良基）：蛋白胨10 g、酵母提取物 5 g、牛肉膏 10 g、葡萄糖 20 g、乙酸钠 5 g、柠檬酸铵 2.15 g、Tween801 ml、MgSO4·7H2O 0.58 g、MnSO4·4H2O 0.05 g、K2HPO42 g、琼脂粉 17 g、水 1000 ml。

1.4 培养条件优化

菌种活化：从冰箱中取出嗜酸乳杆菌-1.557斜面菌种，室温静置40min。然后从中取两环菌种接于装有10ml液体种子培养基试管中，37℃静止培养12 h，备用。

1.4.1 静置培养和摇床培养对比

按1.0%接种量将活化的种子接种于装有100 ml MRS改良液体培养基的250 ml三角瓶中，37℃静置培养和60 r/min振荡培养48 h，每隔12 h取1次样(先摇匀后取样)，在610 nm处（以下同）测定培养液OD值。

1.4.2 培养基起始pH值的筛选

以6 mol/l的HCl和40%NaOH溶液将MRS改良培养基的起始pH值分别调节为4.5、5.5、6.5、7.5和8.5，接入1.0%活化菌液，37℃下恒温培养24 h，测定OD值。……