RP-HPLC测定三种黄连中的生物碱含量
2010-03-21崔国辉袁汉尧周克元
海南医学 2010年16期
崔国辉,袁汉尧,周克元
(广东医学院检验学院临检教研室,广东 湛江 524023)
黄连是毛茛科植物黄连(Coptis chinensis franch)的干燥根茎,文献报道,它含有小檗碱、巴马亭、药根碱、黄连碱等多种原小檗碱型生物碱。祖国医学记载其具有清热、解毒的作用,很早就用于消化系统的治疗和研究。例如鲁劲松等[1]研究发现黄连总生物碱(TA)通过抑制胃炎时黏膜细胞的凋亡从而对幽门螺旋杆菌脂多糖(Helicobacterpylori,LPS)引起的大鼠胃部炎症有保护作用。而黄连中的主要成分小檗碱可以诱导人结肠癌细胞株增殖抑制[2]。利用高效液相色谱可以将黄连中主要的生物碱成分进行分离,可以用于黄连的质量控制以及主要成分含量的测定[3-4],但也存在很多问题,诸如分离差、峰型对称性差、色谱柱寿命短和试剂消耗大的问题。笔者参考有关文献,利用反相高效液相色谱检测黄连中生物碱含量,并对云南黄连、北美黄连以及四川黄连中三种生物碱的含量进行分析比较。同时对其加样回收率、样品稳定性、精密度进行分析。
1 仪器和试药
1.1 仪器和色谱条件 色谱柱为安捷伦 C18柱子(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈 -水(48∶52,每 1L含有磷酸二氢钾 3.4 g,十二烷基硫酸钠 1.7 g);流速为 1.0 ml/min;检测波长为 345 nm;进样量为 20μl。
1.2 试药 云南黄连、四川黄连于成都药材市场购买,北美黄连于哈佛大学康景轩教授提供,经由天然药物中心邓亦峰高级研究员鉴定。盐酸小檗碱、盐酸巴马亭、盐酸药根碱对照品由中国药品生物制品鉴定所购买。水为三蒸水,乙腈为色谱纯。甲醇、盐酸为分析纯。……
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