李昶，姜敏，于兆进

（中国医科大学 附属第一医院消化内科，沈阳 110001）

粪便钙卫蛋白在肠道疾病鉴别诊断中的价值

Value of Fecal Calprotectin in the Differential Diagnosis of Intestinal Diseases

李昶，姜敏，于兆进

（中国医科大学 附属第一医院消化内科，沈阳 110001）

采用ELISA方法检测粪便中的钙卫蛋白浓度，鉴别肠道器质性疾病和功能性疾病。

钙卫蛋白；炎症性肠病；肠易激综合征

炎症性肠病（inflam matorybowel disease，IBD）、结肠癌、肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）是消化道常见的3种疾病。症状上都有腹痛、排便习惯和粪便性状的改变，需要借助一些辅助检查加以鉴别。内镜较为准确，但属于侵入性的检查。粪便潜血试验（fecaloccultbloodtest，FOBT）是通过检测粪便中的血红蛋白、血红素等成分而判断消化道疾病的，因此不能发现无出血的病变。C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）和红细胞沉降率（erythrocyte sed imentation rate，ESR）敏感性低，易受全身多种因素影响，对肠道病变的特异性较差。近些年，对于钙卫蛋白的研究越来越引起国内外学者的重视。Bjarnason等［1］研究认为：钙卫蛋白在鉴别IBD和IBS时，敏感度和特异度分别达到了100%和97%。Roseth等［2］研究表明：在预测结肠癌方面，钙卫蛋白敏感度达到了90%，超过了ESR、CRP、FOBT。本研究旨在利用钙卫蛋白检测鉴别IBD、结肠癌、IBS及健康者。

1 材料与方法

1.1 临床资料

以我院2008年11月至2009年10月期间消化内科门诊及住院患者为入选对象，IBD组60例，结肠癌组60例，均经结肠镜检查及病理证实。I B S组30例，为结肠镜检查无异常，且符合罗马Ⅲ诊断标准的患者。另选取体检无任何异常者30例作为健康组。入选者均排除了上消化道疾病，均无心、肝、肺、肾等重要脏器病变，无神经及精神疾病史，近期无糖皮质激素和免疫抑制剂使用史，无长期服用非甾体抗炎药史，并排除了酗酒者、药瘾者、孕妇。所有受试者均知情同意。

1.2 标本收集

结肠镜检查前3d内的粪便约5g，低温留置（≤30℃）送往医院，密封后置于-20℃的冰箱内保存。

1.3 实验方法

选用PhicalTest试剂盒（挪威CALPRO公司生产）。标本室温下解冻，无菌接种环取约100m g放入试管内，加入1/50的提取缓冲液，漩涡仪上充分混匀，吸取1m l匀浆离心（10000g）25min，提取0.5m l上清液。再将上清液以1/50比例稀释，常规ELISA流程。将酶标仪置于405n m处，当1000n g/m l标准品的光密度O D值达到2.0时，立即用自动化酶标仪测定。

1.4 钙卫蛋白浓度的计算方法

以试剂盒中标准品的钙卫蛋白浓度（n g/m l）及对应O D值做曲线，将酶标仪所得的样本O D值带入曲线函数中，乘以校正稀释度（2.5）后得到各组钙卫蛋白的浓度值（m g/k g）。

1.5 统计处理

经正态性检验，各组钙卫蛋白浓度呈非正态分布，因此计算中位数、四分位间距、全距。用SPSS 16.0统计软件进行分析。采用秩和检验，P<0.05有统计学意义。

2 结果

各组钙卫蛋白浓度值的分布趋势见表1。

结果显示，IBD组与结肠癌组、I B S组、健康组比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结肠癌组与I B S组、健康组比较，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。而I B S组与健康组比较，差异无统计学意义（P=0.16）。

表1 各组粪便钙卫蛋白统计结果

3 讨论

钙卫蛋白是1980年由Fagerhol等［3］从中性粒细胞中分离发现的一种杂合性的钙结合蛋白，分子量为36000，由两条重链M R P 14和一条轻链M R P 8非共价结合而成的异二聚体。每条链可以结合两个钙离子，因而具有抗蛋白酶的活性，因其具有螯合锌离子的能力而具有抗热性，因此可以在肠腔和外界环境中长期保持稳定而不被各种酶和细菌破坏。钙卫蛋白［4］是粒细胞、单核细胞和角质细胞的主要蛋白质，是中性粒细胞更新的标志物，在许多炎症情况下都升高。

本研究结果显示，钙卫蛋白浓度中位数从高到低依次为IBD组、结肠癌组、I B S组、健康组。IBD组和结肠癌组的钙卫蛋白的浓度分布比较离散，而I B S组和健康组浓度分布比较密集，且范围都在0～100m g/k g之间。因此认为钙卫蛋白主要在炎性细胞中表达，炎症越重，浓度越高。这同以往研究结果较为一致［5］。

各组阳性率显示钙卫蛋白检测同结肠镜检查结果具有较高的一致性，因此可为临床诊断提供相对简便易行、无创、可靠的依据。检测粪便中的钙卫蛋白浓度不仅可以将IBD、结肠癌同I B S与健康者区分开，而且在IBD与结肠癌的鉴别上也极具有参考价值。

钙卫蛋白的理化特性决定了其检测结果可靠，但是它同样受一定因素的影响，如药物、年龄、环境等。P o u l l i s等［6］发现质子泵抑制剂能够使钙卫蛋白的含量增加。O l a f s d o t t i r等研究表明［7］：＜12周的健康婴儿粪便钙卫蛋白含量明显升高，含量与老年IBD患者的含量相似。S a v i n o等［8］近期的研究结果显示婴儿的喂养方式同样会影响到粪便中钙卫蛋白的浓度，这可能与母乳中的促进肠道免疫系统形成的激素（如瘦素）、细胞因子、生长因子（如表皮生长因子、粒细胞集落刺激因子等）等有关。

综上，钙卫蛋白是定量检测，能发现早期不出血病灶，其方法简便、经济、无创，不仅能够较准确地区分肠道器质性疾病和功能性疾病，而且在鉴别IBD和结肠癌方面同样具有较高的参考价值。对于IBD急性发作期的重症患者，结肠镜检查往往被视为禁忌，此时粪便钙卫蛋白检测就显得尤为重要。另外，对于已经确诊患者的病情监测、药物疗效的评价、治疗方案的调整等具有重要指导意义。

［1］Bjarnason I，Sherwood R.Fecal calprotectin：a significant step in the noninvasive assessment of intestinal inflammation ［J］.Pediatr Gastroenterol Nutr，2001，33（1）：11-13.

［2］Roseth AG，Fagerhol MK，Aadland E，et al.Fecal calprotectin：a novel test for the diagnosis of colorectal cancer? ［J］.Scand J of Gastroenterol，1992，27（9）：793-798.

［3］Fagerhol MK，Dale I，Anderson T，et al.Release and quantitation of a leucocyte derived protein［J］.Scand J Haematol，1980，24（6）：393-398.

［4］Johne B，Fagerhol MK，Lyberg T，et al.Functional and clinical aspects of the myelomonocyte protein calprotectin ［J］.Mol Pathol，1997，50（3）：113-123.

［5］Roseth AG，Aadland E，Jahnsen J，et al.Assessment of disease activity in ulcerative colitis by fecal calprotectin，a novel granulocyte marker protein［J］.Digestion，1997，58（3）：176-180.

［6］Poullis A，Foster R，Mendall MA，et al.Proton pump inhibitors are associated with evaluation of fecal calprotectin and may affect specificity［J］.Eur J Gastroenterol Hepatol，2003，15（5）：573-574.

［7］Olafsdottir E，Asknes I，Fluge G，et al.Fecal calprotectin levels in infants with infantile colic，healthy infants，children with inflammatory bowel disease，children with recurrent abdominal pain and healthy children［J］.Acta Paediatr，2002，91（3）：45-50.

［8］Savino F，Castagno E，Calabrese R，et al.High fecal calprotectin levels in healthy，exclusively breast-fed infants［J］.Neonatology，2009，97（4）：299-304.

（编辑武玉欣，英文编辑郑华川）

R574.1

B

0258-4646（2010）09-0770-02

李昶（1984-），女，硕士研究生.

姜敏，E-mail：jiang-min@163.com

2010-03-31