王倩芳

摘要以保加利亚尖椒为试验材料,探索子叶离体组织培养与植株再生体系的建立。结果表明:诱芽率达到100%,不定芽伸长率达83%,生根率达到100%,从不定芽诱导到完整植株获得仅需约60d。

关键词辣椒;子叶;再生植株

中图分类号S641.3文献标识码A文章编号 1007-5739(2009)11-0023-01

辣椒(Capsicum annuum L.)是茄果类蔬菜和调料品[1]。近年来,辣椒病害日趋严重,通过转基因来培育辣椒抗病品种越来越受到重视。辣椒幼苗子叶的再生能力最强。本试验以高产的保加利亚尖椒为材料,以植物高活性剂诱导植株再生不定芽生长,优化培养基和再生条件,建立高效的植株再生体系,为辣椒转基因提供依据。

1材料与方法

1.1材料

选择保加利亚尖椒(Capsicum annuum L. Bulgaria pointed pepper)为试验材料,种子购于内蒙古赤峰县赤研种业有限公司。

1.2辣椒植株再生体系建立

1.2.1无菌苗的培养。将精选种子阳光下曝晒2~4h,50℃温水中浸泡2～3h,70%乙醇消毒30~50s,无菌水清洗2～3次后用50%(体积比)次氯酸钠(活性氯3.75%)[2]消毒13min,无菌水冲洗5～6遍,播种于MB培养基,置于暗处萌发。待胚根露出后转入人工气候箱中培育壮苗。培养条件:白天26 ℃,夜晚20℃,光照14h/d,光强2 000～2 500Lx。

1.2.2不定芽的诱导与伸长。自播种次日开始计算苗龄。取16d苗龄的幼苗子叶,近轴面朝上接种于诱芽培养基中。暗处理5d后转入人工气候箱培养,每8d更换新鲜培养基,20d后统计不定芽诱导情况。从带芽的子叶切出0.3cm的芽段,接种到伸长培养基上进行培养。以芽伸长率为依据,确定伸长培养基的激素组合。待不定芽发生茎伸长并长至约2cm高后切下幼苗。

1.2.3幼苗的生根与移栽。……