侯景辉， 曾 敬， 吴惠瑜， 张惠忠， 符 珈， 吴秋良

Rho/ROCK信号通路与肿瘤发生、侵袭与转移、细胞周期调控及凋亡均有密切的关系[1]，已明确Rho蛋白几乎存在于肿瘤形成的每个阶段中，是很有前景的肿瘤治疗靶点[2]，ROCK蛋白是目前在功能研究方面最为清楚的Rho下游靶效应分子，与肿瘤血管生成、侵袭与转移有密切的关系[3]。RhoA、RhoB、ROCK-1及ROCK-2是Rho/ROCK信号通路中的重要分子，目前有关Rho/ROCK信号通路与人脑星形细胞瘤关系的研究报道甚少，本研究应用免疫组化法检测Rho/ROCK信号通路在人脑星形细胞瘤和瘤旁脑组织中的表达，探讨Rho与ROCK表达之间的关系，并观察其与肿瘤的病理类型以及患者临床资料之间的关系，可望为人脑星形细胞瘤的发生、分子病理分型和恶性程度分级找到一些新的提示。

1 材料与方法

1.1 材料 收集本校附属医院1998年1月至2003年1月经手术后病理确诊并存档的人脑星形细胞瘤60例(瘤旁脑组织20例)，其中男38例，女22例，年龄10～67岁，平均年龄39.81岁，按WHO(2000)标准进行分级，星形细胞瘤低级别30例(Ⅰ级7例，Ⅱ级23例)，高级别30例[Ⅲ级12例，Ⅳ级(胶质母细胞瘤)18例]，均为首发病例，术前未经放疗、化疗及生物治疗。

1.2 免疫组化 组织标本经甲醛固定，常规石蜡包埋，免疫组化法采用SP法，5 μm连续切片。RhoA购自Bioworld Technology Inc，USA；RhoB、ROCK-1及ROCK-2购自SANTA CRUZ Biotechnology, Inc，USA；SP、DAB试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。操作步骤按说明书进行。设有阳性对照及PBS液代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判定 RhoA、RhoB、ROCK-1及ROCK-2蛋白表达以瘤细胞胞浆内出现清晰棕黄色着色为阳性细胞，首先根据阳性肿瘤细胞所占百分比分为5个等级：阳性细胞数<5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分；……