刘素玉

（广饶县疾病预防控制中心，山东东营 257300）

生活饮用水是人们日常活动中不可缺少的物质，合格的水质量是保障居民日常生活的基础。大肠菌群超标是常见的生活饮用水质量问题，当生活饮用水中的大肠埃希菌、耐热大肠菌群等超标时，使用人群容易爆发水源性肠道传染病，给家庭、社会医疗增加负担[1]。在生活饮用水日常监测工作中，通常需要经过微生物检验来了解水中大肠菌群的含量，以便采取措施来改善饮用水质量，而不同微生物检验方法的检验效果存在差异。本研究观察比较了滤膜法、多管发酵法两种方法对生活饮用水中大肠菌群的检验效果。

1 材料和方法

1.1 材料与设备

试管、微孔滤膜（广东环凯生物科技有限公司，规格：直径47 mm，孔径0.45 μm）、显微镜（重庆市奥特光学仪器有限责任公司，愈械注准20192220096，型号规格B203）、无齿镊子、无油隔膜真空泵（四川福茂元生物科技有限公司，规格型号VP-10L）、培养皿（90 mm×90 mm）、恒温培养箱（松下冷链大连有限公司，辽械注准20182220097，规格MIR-180）、台式蒸汽压力灭菌器（腾氏常州医疗设备有限公司，苏械注准20182570922，规格型号2540EKA）。

1.2 水样采集

依据工作的要求，选取本地区20个监测点，开展供水工程的水质采样监测。在枯水期采集水样200份（出厂水水样100份，末梢水水样100份），丰水期采集水样200份（出厂水水样100份，末梢水水样100份），对所有水样开展研究。

1.3 检测方法

检测依据为《中华人民共和国水污染防治法》《生活饮用水标准检测方法 微生物指标》（GB/T 5750.12——2006），检测结果判定依据《生活饮用水卫生标准》（GB 5749——2022）。

1.3.1 滤膜法检验

将蒸馏水装入烧杯内，使用酒精灯对微孔滤膜加热灭菌，沸腾水浴15 min/次，取出换水继续煮沸灭菌，共3次。用镊子夹出滤膜，以粗糙面向上置于无菌滤床上。取待检测水样100 mL注入，进行抽滤，抽气5 s，使细菌被截留。用镊子将滤膜转移到红亚硫酸钠培养基上，装入恒温箱，37 ℃条件培养1 d。将滤膜置于显微镜下计数和鉴定大肠菌群数。

1.3.2 多管发酵法检验

培养液制备：蒸馏水1 000 mL+蛋白胨25 g+氯化钠15 g+乳糖15 g，加热牛肉膏10 g使其充分溶解，调节pH值为7.1～7.5，加1.5%溴甲酚紫乙醇溶液2 mL，混合均匀，装入试管内后高温（110～120 ℃）高压灭菌20 min，取出贮存备用。

准备15个试管，分成3份，每份5管。第1份5个管内装有培养液5 mL，分别加水样10 mL。第2份5个管内装有培养液10 mL，分别加水样1 mL。3份5个管内装有10 mL培养液，加入1∶10稀释的水样。将所有装有样本的试管置于37 ℃恒温箱内培养1 d。取出试管进行观察，无产酸产气说明阴性；有产酸产气情况则转种植于伊红美蓝琼脂板上，放入恒温箱37 ℃培养1 d。取出，肉眼观察菌落形态，取染色颜色较深区域的中心部位菌落，使用显微镜计数及鉴定大肠菌群数。

1.4 观察比较指标

①比较滤膜法、多管发酵法对枯水期水样的大肠菌群检出情况。②比较滤膜法、多管发酵法对丰水期水样的大肠菌群检出情况。③比较滤膜法、多管发酵法对出厂水的大肠菌群检出情况。④比较滤膜法、多管发酵法对末梢水的大肠菌群检出情况。

1.5 统计学分析

数据分析SPSS 25.0，计数资料用%表示，行χ2检验，P＜0.05表示有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 枯水期大肠菌群检出情况对比

如表1所示，多管发酵法对枯水期的大肠菌群总检出率（23.50%）高于滤膜法（16.00%）（P＜0.05）。

2.2 丰水期大肠菌群检出情况对比

如表2所示，多管发酵法对丰水期的大肠菌群总检出率（15.00%）高于滤膜法（9.00%）（P＜0.05）。

表2 滤膜法检验、多管发酵法对丰水期的大肠菌群检出情况比较[n（%）]

2.3 出厂水大肠菌群检出情况对比

如表3所示，多管发酵法对出厂水的大肠菌群总检出率（13.50%）高于滤膜法（8.50%）（P＜0.05）。

表3 滤膜法检验、多管发酵法对出厂水的大肠菌群检出情况比较[n（%）]

2.4 末梢水大肠菌群检出情况对比

如表4所示，多管发酵法对末梢水的大肠菌群总检出率（24.50%）高于滤膜法（16.50%）（P＜0.05）。

表4 滤膜法检验、多管发酵法对末梢水的大肠菌群检出情况比较[n（%）]

3 结论与讨论

当前，居民的饮用水主要来源是地表水、淡水湖泊、泉眼、地下水等，通常水源有大量动植物繁衍，加上水产养殖、各类垃圾排泄物的影响，水的质量难以保证[2]。生活饮用水质量会直接影响居民的生活及其身体健康，长期饮用微生物超标的饮用水，容易发生介水传染病，随着水污染越来越严重，居民饮用水的安全系数不断降低[3]。目前，为使水质符合生活饮用水质量相关标准，一般都会对水进行常规过滤、消毒等处理，但水质不合格情况仍时有发生，需要进行监测[4]。

多管发酵法、滤膜法检验是常用的生活饮用水检验方法，均不需要昂贵的设备，人员经过基本的技术培训便可以操作，易于在基层中推广普及。其中多管发酵法是将待检测水样稀释后，分别接种到培养液中培养，再通过观察、计数细菌生长情况判断水质，其优势是不受浊度的影响，但检测操作烦琐、耗费时间长[5]。滤膜法检验是将待测水样注入已灭菌的微孔滤膜上，抽滤使微生物被截留在滤膜上，再进行培养、鉴定，该方法操作简单、检查快速，可以去除样品中其他杂质的干扰[6]。本研究结果显示，多管发酵法、滤膜法检验均可以检验出饮用水中的大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、杂菌，其中多管发酵法对枯水期、丰水期、出厂水、末梢水的大肠菌群总检出率均高于滤膜法检验（P＜0.05）。因此，在生活饮用水丰水期、枯水期、出厂水、末梢水的监测中，使用多管发酵法检验对大肠菌群、杂菌等微生物的检出率更高、更加准确，可作为优先选择的水监测方法。