何 芳，曲 英

(大连市普兰店区生态环境事务服务中心，辽宁 大连 116200)

1 引言

松材线虫病又称松树萎蔫病(Pine wilt disease)，是由松材线虫寄生在松树体内引起的一种毁灭性森林病害。该病具有致死率高、极难防治等特点，被列为国际Ⅰ级检疫对象[1],给我国林业生态系统造成严重危害[2]。由于松材线虫病的传播速度非常迅速，危害性极高，松树感染松材线虫病后难以治愈，病死率极高，因此又被称之为 “松树癌症”[15]。松材线虫病适生范围广、传播速度快、寄主种类多、感病松树死亡率高、防治困难[16]。在热带、亚热带地区蔓延较为迅速、危害严重，造成严重的经济和生态损失[17]。而我国是遭受松材线虫病危害最严重的国家之一，目前约有17个省区仍受松材线虫病影响[3]。2016年松材线虫病在辽宁首次发现后，迅速扩散蔓延，目前已在沈阳、大连、丹东、铁岭等7市20个县(区)发生[4]。

松材线虫的不同生长阶段(虫卵期、幼虫期、成虫期)的生长特性有所不同，具有不同的危害程度[5]。该病害早期疾病症状不明显，很难被发现[6]。主要依靠松褐天牛携带传播，其生活史主要发生在松树或松褐天牛体内，而松褐天牛的幼虫主要在松树体内活动[7]。松材线虫进入松树木质部的途径为天牛取食树皮时的伤口，通过取食寄主植物的上皮细胞或树脂道，从而大量繁殖逐渐扩散至全株[8]，也可通过在衰弱木伤口上产卵进行传播[9]。由于该疫病在我国出现较晚，相关技术人员对松材线虫病的认识不够深入，因此对我国的森林资源造成巨大威胁，并因此浪费了大量的人力、物力[10]。和普通的植物病害相比，松材线虫病具有较为复杂的发病条件，寄主作物、媒介昆虫、松材线虫以及发病环境等共同导致了松材线虫病的发生与流行[11]。

松材线虫属于线形动物门，是目前我国危害最严重的入侵物种之一[12]。该虫病源于北美洲等地，松树感染松材线虫后致病率为100%，且防治极为困难[13]。松树如果患病，将在6周左右死亡，防控如果不及时，松树林可在几年内大面积毁灭殆尽[14]。

辽宁地区森林资源丰富，林产经济发达，具有大型林业产业基地和木材集散地，交通网络发达。自2016年大连市出现松树线虫病害后，病害发生区已经向北推移超400 km[18]。2018年辽宁省被国家林业和草原局正式列为松材线虫病新发生区，疫情发生面积3400 hm2，由松材线虫造成的经济损失和生态损失难以估量，疫情防控形势极为严峻[19]。研究发现，注干施药技术是将有效成分注入树体，发挥药效主要依靠树木蒸腾作用传导分布药剂，药剂实施精准、防治效率高，适合对我国松材线虫病的主动预防[20]。本研究选用目前大连普兰店地区市售的4种杀线虫剂，利用药剂浸渍法对松材线虫分别进行了毒力测定，以期为当地松线虫病害的防治提供参考。

2 试验方法

2.1 试验药剂

30%克线磷乳油(山东百士威农药有限公司)、3%克百威颗粒剂(汝州市试剂厂)、30%阿维菌素乳油(威海韩孚生化药业有限公司)、5%高效氯氰菊酯乳油(绍兴天诺农化有限公司)。

2.2 试验用虫

松材线虫：将松材线虫接种在琼脂培养基上(灰葡萄孢菌丝体)，在25 ℃恒温培养箱中培养7 d，待菌丝体被食用完后放入4 ℃冰箱备用。采用贝曼漏斗分离法收集，使用3% H2O2进行表面消毒7 min，然后用ddH2O清洗至少3次后为实验所用松材线虫。

2.3 药剂处理

采用浸渍法测定药剂对线虫的毒力。具体步骤如下：吸取2 mL待测药液于直径6 cm的凹面皿中，随后在每皿中挑入100条处理好的松材线虫，置于25 ℃恒温培养箱中分别培养12、24、36、48 h；于解剖镜下利用针刺触碰法判断线虫的死活情况。

计算死亡率(%)：死亡率=死亡线虫数/处理线虫数×100%。同一处理重复3次。

2.4 数据处理

采用Excel对数据进行处理，SPSS26.0计算EC50值。

3 结果与讨论

3.1 不同药剂对松材线虫的毒力效果

不同药剂对松材线虫的杀死率情况如表1所示。

由表1可知，不同的药剂对松材线虫表现出不同的致死作用，同时不同浓度的药剂毒力效果也有所差异。其中毒力效果表现最好的药剂为30%阿维菌素乳油，毒力随着药剂浓度的增加而增强，当浓度为10、20、30、40、50 g/L时，用药12 h时松材线虫的死亡率分别为11.26、23.59、35.12、55.67、63.13%，并随着时间的增加毒力持续升高，当时间达到48 h，50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率高达91.86%；30%克线磷乳油毒力效果相对较差，当浓度为10、20、30、40、50 g/L时，用药12 h时松材线虫的死亡率分别为2.35、12.37、23.24、34.51、41.39%，当时间达到48 h，50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率为61.35%；5%高效氯氰菊酯乳油与3%克百威颗粒剂毒力效果最差，当时间达到48 h，两种药剂浓度为50 g/L时，松材线虫的死亡率分别为18.53%、21.35%。

3.2 30%克线磷乳油在不同时间段对松材线虫的毒力效果

30%克线磷乳油在不同时间段毒力效果如表2所示。

由表2可知，30%克线磷乳油在12 h、24 h、36 h、48 h各阶段表现出不同的毒力效果，EC50值分别为57.576、55.445、47.240、42.471 g/L，随着时间的增长，半数致死量降低较为缓慢。EC50值越小，说明该药剂对松材线虫抑制作用越好。

表1 不同药剂对松材线虫的杀死率

3.3 30%阿维菌素乳油在不同时间段对松材线虫的毒力效果

30%阿维菌素乳油在不同时间段毒力效果如表3所示。

表2 30%克线磷乳油在不同时间段毒力

表3 30%阿维菌素乳油在不同时间段毒力

由表3可知，30%阿维菌素乳油在12 h、24 h、36 h、48 h各阶段表现出不同的毒力效果，EC50值分别为37.794、28.636、22.046、16.433 g/L，与30%克线磷乳油相比，半数致死量显著降低，毒力效果较好。在用药48 h时，30%阿维菌素乳油的EC50值为16.433 g/L，显著低于30%克线磷乳油(42.471 g/L)。

4 结论

本文选用目前大连普兰店地区市售的四种杀线虫剂，即30%克线磷乳油、3%克百威颗粒剂、30%阿维菌素乳油、5%高效氯氰菊酯乳油，利用药剂浸渍法对松材线虫分别进行了毒力测定。结果显示：不同的药剂对松材线虫表现出不同的致死作用，同时不同浓度的药剂毒力效果也有所差异，毒力随着药剂浓度或时间的增加而增强。毒力效果表现最好的药剂为30%阿维菌素乳油，当用药时间达到48 h，50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率高达91.86%；其次为30%克线磷乳油，当用药时间达到48 h，50 g/L浓度药剂下松材线虫的死亡率高达61.35%；5%高效氯氰菊酯乳油与3%克百威颗粒剂毒力效果最差，当时间达到48 h，两种药剂浓度为50 g/L时，松材线虫的死亡率分别为18.53%、21.35%。