张立江，王 琨

(国药集团容生制药有限公司，河南 焦作 454950)

地塞米松注射液主要成分为：地塞米松磷酸钠，化学名称为16α-甲基-11β,17α,21-三羟基-9α-氟孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮-21-磷酸酯二钠盐。它是用于某些对皮质类固醇治疗有反应的内分泌和非内分泌疾病。地塞米松磷酸钠注射液可作为控制由脑肿瘤或与神经外科手术相关的脑水肿的辅助药物，但不适用于因颅脑外伤引起的水肿的情况。呼吸系统疾病、支气管哮喘和吸入性肺炎、皮肤病中毒性表皮坏死松解症、休克，需要高药物剂量的辅助治疗。地塞米松已被证明在休克的早期治疗中是有益的，但对整体生存情况可能不会产生影响。对美国药典、英国药典、中国药典的方法进行重复，并对中国药典测定方法进行优化色谱条件改用辛烷基硅烷健合硅胶为填充剂，结果表明，此方法稳定性好，结果准确可靠，灵敏度高。

1 方法对比与方法重复

对中国药典、美国药典、英国药典的方法进行对比，并对方法进行重复，结果显示，美国药典方法主峰出峰时间为 21.449 min，且存在拖尾(色谱图见图1)；英国药典方法主峰出峰时间为 21.000 min(色谱图见图2)；中国药典方法主峰出峰时间为 33.402 min，色谱图见图3。主峰出峰时间均较长。方法对比见表1

图1 美国药典方法重复典型图谱

图2 英国药典方法重复典型图谱

图3 中国药典方法重复典型图谱

2 方法优化结果

2.1 材料

1)仪器

高效液相色谱仪(Waters 2695)：美国Waters公司；S210-K pH计：梅特勒-托利多有限公司；梅特勒分析天平。

2)试剂

甲醇(HPLC级)：康科德科技有限公司；乙腈(HPLC级)：康科德科技有限公司；三乙胺(AR)：康科德科技有限公司；磷酸(AR):凤船公司；地塞米松磷酸酯对照品：批号10116-201803，含量99.1%；中国食品药品检定研究院。

2.2 方法

1)色谱条件

Kromasil C8(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相： 三乙胺溶液(取三乙胺7.5 mL，加水稀释1000 mL，用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇-乙腈(55∶40∶5)；流速 1.5 mL/min；检测波长 242 nm；柱温 30 ℃；进样体积 20 μL。

表1 地塞米松磷酸钠注射液含量检测方法比较

2)样品配制

①对照品溶液配制：取地塞米松磷酸酯对照品 20 mg，精密称定，置 50 mL 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 5 mL 至 50 mL 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

②供试品溶液配制：取本品10支混匀，精密量取 2 mL，置 25 mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取 2 mL 至 20 mL 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

2.3 结果

1)专属性试验

空白溶剂及空白辅料无干扰；系统适用性溶液中，地塞米松磷酸酯峰理论塔板数为7097(大于5000)，地塞米松磷酸酯峰与杂质地塞米松峰的分离度为7.29(大于4.4)；已知杂质不干扰主峰的检测，空白溶剂、辅料无干扰，主峰出峰时间为 13.667 min。色谱图见图4。

图4 专属性图谱

2)线性关系

取地塞米松磷酸酯用流动相配制成每 1 mL 含 0.016 mg、0.04 mg、0.048 mg、0.056 mg 的溶液。量取各质量浓度对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。浓度与峰面积关系见表2，线性关系见图5。

以峰面积为横坐标，对照品浓度为纵坐标，作线性回归方程。得回归方程为：y=26233254.83x+3515.07。

表2 线性关系

图5 线性关系

结果表明，在限度标准为40%～140%范围内，地塞米松磷酸酯和地塞米松磷酸钠质量浓度与峰面积间线性关系良好，r值均为1.00000(大于0.998)，Y轴截距相对于100%限度浓度响应值均小于2.0%，符合规定。

3)重复性试验

取地塞米松磷酸钠注射液，按供试品溶液配制法平行配制6份供试品溶液，进样，记录色谱图。数据见表3。

结果表明：地塞米松磷酸钠注射液6份供试品溶液中，含量的平均值为102.4%，RSD为0.12%(小于1.0%)，符合要求，该方法重复性良好。

表3 重复性试验

4)精密度试验

参照重复性试验于不同日期、不同仪器，重复检测。

结果表明(表4)，中间精密度试验中，6份供试品溶液中，含量的平均值为102.864%，RSD为0.74%(小于1.0%)，12份供试品溶液含量的RSD为0.74%(小于2.0%)，该方法精密度良好。

表4 精密度试验

5)回收率试验

取地塞米松磷酸钠按80%、100%、120%供试品溶液配制各3份。分别注入液相色谱仪，记录色谱图，计算回收率。数据见表5。结果表明，限度约为80%～120%的浓度范围内，9份供试品溶液回收率均在98.0%～102.0%范围内，回收率平均值为99.5%，RSD为0.70%(小于2.0%)，均符合规定，该方法准确度良好。

表5 回收率试验

3 讨论

地塞米松磷酸钠注射液含量测定方法在中国药典、美国药典、英国药典中都有收载，均采用高效液相色法。通过对各国药典测定方法对比发现，色谱柱填料基本一致(均为C18柱)，但供试品溶液质量浓度及检测波长不一致，流动相组成不同。尝试改用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂进行方法优化，并对检测方法进行必要的方法验证，可满足地塞米松磷酸钠注射液中地塞米松磷酸钠的含量检测，同时缩短检测时间，大大降低了成本，提高了工作效率。