刘婷婷，李凤玲，黄 鑫，刘峻池

（南京市动物疫病预防控制中心，江苏南京 210012）

枯草芽袍杆菌（Bacillus subtilis，BS）具有维护畜禽肠道微生态平衡、调节营养代谢、维护肠道黏膜屏障完整性和增强机体免疫力等功能[1]。目前市面上含枯草芽孢杆菌的微生态制剂种类繁多，含量也各不相同。本研究主要通过对比不同添加量对产蛋期蛋鸡各项性能的影响，为蛋鸡养殖过程中枯草芽孢杆菌的添加量提供科学依据。

1 试验方法

1.1 试验设计

选择216 只产蛋中期海兰褐壳蛋鸡，分为3 组，每组6 个重复，每个重复12 只鸡。第1 组为对照组，饲喂基础日粮，基础日粮营养水平参照海兰褐壳蛋鸡生产性能标准手册；第2 组基础日粮中添加浓度为1×1013CFU/t 的枯草芽孢杆菌生物制剂；第3 组基础日粮中添加浓度为1×1012CFU/t 的枯草芽孢杆菌生物制剂。换料过渡期7 d，试验期56 d。

1.2 饲养管理

试验蛋鸡采用全封闭鸡舍4 层H 型笼养。每日定时饲喂3 次（06:00、12:00、18:00），自由采食和饮水。恒定光照时间为16 h/d，舍内温湿度相对稳定，温度在（20±2）℃，相对湿度在（60±5）%。

1.3 指标测定及方法

1.3.1 粪便形态评价

试验期间，每周观察并记录1 次每组蛋鸡的粪便形态。

1.3.2 血清学评价

试验第14、28 和56 天，每个重复随机挑选5只鸡采集血清，采用平板凝集试验进行鸡白痢抗体检测，另将第56 天血清加做理化指标检测。

1.3.3 生产性能

以重复为单位每天记录产蛋数、蛋重、投料量、剩余料量、存栏鸡数。计算产蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比。

1.3.4 蛋品质评价

试验第56 天，每个重复采集4 枚新鲜鸡蛋用于测定蛋品质。用物性结构分析仪测定蛋壳强度；用螺旋测微器测量鸡蛋中间、锐端及钝端3 个位置的蛋壳厚度，并计算蛋壳厚度的平均值；用EMT-5200 型多功能蛋品测定仪检测蛋黄颜色、蛋白高度和哈夫单位。

1.3.5 肠道形态评价

试验第56 天,每重复分别选3 只鸡解剖，解剖后取十二指肠、空肠及回肠中段2～3 cm，用4%多聚甲醛固定。设置不同乙醇浓度对肠道样品进行脱水，再用二甲苯清洗，制作石蜡切片，观察肠道形态结构。通过Case Viewer 软件测量肠绒毛高度（villus height，VH)、隐窝深度（crypt depth，CD），计算绒毛高度隐窝深度（VH/CD）。

1.4 数据处理

血清理化指标、生产性能、蛋品质和肠道形态数据采用SPSS Statistics 26 统计软件ANOVA 检验程序进行单因素方差分析，P ＜0.05 为差异显著性判断标准。

2 试验结果

2.1 粪便形态评价

由表1 可知，试验初始，试验组和对照组粪便形态并无明显差别，软硬适中、色泽正常，偶见稀粪。2 周后，对照组个别鸡笼出现稀粪，粪便不成形，甚至呈水样，稀粪出现比例在1%～2%。试验后期，对照组鸡群的粪便状态依然不稳定，呈现时好时坏的状态，有的鸡笼粪便形态良好，有的鸡笼出现水便；而添加枯草芽孢杆菌的2 个试验组，粪便始终能保持软硬适中，形态稳定，整体均匀度较好。

表1 添加枯草芽孢杆菌后蛋鸡粪便形态的观察记录

2.2 血清学评价

2.2.1 鸡白痢抗体检测结果

由表2 可知，14 d 时，试验组和对照组鸡白痢抗体阳性率无显著差异；28 d 和56 d，试验组的鸡白痢抗体阳性率明显低于对照组。

表2 鸡白痢抗体检测结果

2.2.2 血清理化指标测定

由表3 可知，与对照组相比，第2 组鸡血清中的白蛋白含量显著提高（P ＜0.05），其他指标差异不显著（P ＞0.05）。

表3 添加枯草芽孢杆菌56 d 对蛋鸡血清生化指标的影响

2.3 生产性能评价

由表4 可知，与第1 组相比，第2 组产蛋率虽提高了2.96 个百分点，但差异不显著（P ＞0.05）；平均蛋重、日采食量和料蛋比也无显著差异（P＞0.05）。

表4 添加枯草芽孢杆菌56 d 对生产性能的影响

2.4 蛋品质评价

由表5 可知，与对照组相比，饲粮中添加枯草芽孢杆菌可使蛋白高度和哈氏单位显著提高（P＜0.05）；其他指标略有差异，但是差异不显著（P ＞0.05）。

表5 添加枯草芽孢杆菌56 d 对蛋鸡蛋品质的影响

2.5 肠道形态评价

由表6 可知，与第1 组相比，第2 组可空肠绒毛高度显著提高（P ＜0.05）；十二指肠绒毛高度也有所增长，但差异不显著（P ＞0.05）。

表6 添加枯草芽孢杆菌对蛋鸡肠道形态的影响

图1 第1 组空肠和十二指肠肠道形态

图2 第2 组空肠和十二指肠肠道形态

图3 第3 组空肠和十二指肠肠道形态

3 分析与讨论

3.1 粪便形态分析

枯草芽孢杆菌能明显改善鸡粪形态。这表明枯草芽孢杆菌对蛋鸡肠道有一定的调理作用，保持鸡群整体状态良好，尤其是可以为弱鸡或免疫力低下的鸡提供良好的肠道保护[2]。基础日粮中按1×1013CFU/t 添加枯草杆菌饲喂，与按1×1012CFU/t 添加相比较，在改善粪便形态方面没有明显差异。

3.2 血清学结果分析

枯草芽孢杆菌短时间内很难达到调控鸡群肠道健康，抑制沙门氏菌生长的效果。只有长期在饲料中添加枯草芽孢杆菌才可有效抑制沙门氏菌在肠道内的繁殖。因为枯草芽孢杆菌在肠道中能够产生乙酸、丙酸和丁酸等挥发性脂肪酸，降低肠道pH[3]，促进乳酸杆菌增殖的同时，间接抑制了肠道中沙门氏菌等病原微生物的繁殖[4]。同时，血清中白蛋白的含量显著增加，可能有益于提高鸡蛋的蛋白质量。基础日粮中按1×1013CFU/t 添加枯草杆菌饲喂，与按1×1012CFU/t 添加相比较，对沙门氏菌的抑制效果差异不显著，1×1013CFU/t 对血清中白蛋白含量的影响比较明显。

3.3 生产性能

枯草芽孢杆菌可以通过刺激肠道蠕动加强蛋鸡对营养物质的吸收，提高饲料的利用率和转化率[5]，从而降低料蛋比，提高产蛋率。基础日粮中按1×1013CFU/t 添加枯草杆菌饲喂，与按1×1012CFU/t 添加相比较，1×1013CFU/t 的添加浓度更有利于提高蛋鸡的产蛋率。

3.4 蛋品质分析

试验组的蛋白高度和哈氏单位，较于对照组均有升高的趋势。哈氏单位是用来评定蛋白品质，表示浓厚蛋白稀薄化程度的单位，它可以度量蛋白的稳固性，哈氏单位越低，蛋白越稀。试验结果表明枯草芽孢杆菌对提升蛋白质量、改善鸡蛋品质具有一定的作用[6]。基础日粮中按1×1013CFU/t 添加枯草杆菌饲喂，与按1×1012CFU/t 添加相比较，改善蛋壳颜色、蛋壳质量、蛋鸡的产蛋率、降低料蛋比方面差异不大。

3.5 肠道形态分析

添加枯草芽孢杆菌可有效增加十二指肠和空肠的绒毛高度，提高营养物质的消化吸收[7],促进肠上皮细胞的成熟，增强对肠道营养物质消化吸收的能力，同时也能减少有害微生物对肠道的损伤，从而维护肠道健康[8]。枯草芽孢杆菌还可以诱导肠道黏膜免疫应答[9],产生免疫蛋白和各种免疫因子，增强畜禽肠道免疫能力[10]。基础日粮中按1×1013CFU/t 添加枯草杆菌饲喂，与按1×1012CFU/t 添加相比较，按1×1013CFU/t 添加效果更显著。

3.6 结论

我国已要求蛋鸡产蛋期全期禁止使用饲用抗生素，无抗养殖未来必然是全球畜牧业的发展趋势。枯草芽孢杆菌作为一类无毒、无残留和无抗药性的益生菌，在畜牧养殖业中的应用也越来越广泛[11]。它不仅能通过调控肠道微生态菌群、调节肠道营养代谢以及肠道吸收来改善蛋鸡的肠道健康，还能提高蛋鸡的生产性能、改善鸡蛋品质、预防腹泻和增强免疫力，还能达到替代部分抗生素的效果[12]。但是，我们在添加含枯草芽孢杆菌的微生态制剂时，一定要对添加浓度进行严格把控，不同时期的蛋鸡，饲料中添加枯草芽孢杆菌的量不同。本试验研究是针对产蛋期蛋鸡开展的，研究结果表明，对开产蛋鸡而言，饲料浓度为1×1013CFU/t 的添加效果优于1×1012CFU/t 的添加效果。

4 结束语

本试验中所选鸡场是一家自动化规模鸡场，管理水平和生产能力也很高，再配合枯草芽孢杆菌的添加效果就会比较明显。但是在实际蛋鸡生产中，如果把蛋鸡肠道健康完全寄托于微生态制剂的添加上可能会杯水车薪，徒增养殖成本。全面的综合防控措施才是蛋鸡健康养殖的良药，提升蛋鸡场的饲养管理水平，严格种源管理、提高育雏水平、做好饲料防霉、提升饮水质量、减少应激反应，再配合益生菌进行肠道调理，就会起到锦上添花的效果，有效实现蛋鸡群的健康养殖。