粤西某市液态奶中壬基酚的污染调查

2022-11-11刘海卿伍尚森程仕群

中国乳业 2022年10期

刘海卿，伍尚森，程仕群

广东产品质量监督检验研究院，广东佛山 528300

0 引言

我国近年来工业发展迅速，随着工业“三废”排放加剧，污染物会对奶牛养殖场周围的土壤、空气、水源造成污染。2021年10月国家生态环境部发布了《新污染物治理行动方案（征求意见稿）》，壬基酚作为高危污染物，被禁止用于农药助剂。壬基酚属于酚类外源性内分泌干扰物之一，是商业第二大使用量的非离子表面活性剂——烷基酚聚乙酰醚的副产物[1]。壬基酚的存在与人类活动密切相关，其高疏水的特性使其在高有机物的环境中累计存在。壬基酚会破坏肠道屏障和扰乱肠道菌群[2]，李仕旭[3]通过动物试验和细胞试验，发现壬基酚可以通过核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3通路导致胃黏膜发生炎症反应。

《2020年中国奶业质量报告》显示，2019年全国乳制品产量同比增长5.6%，液态奶消费量呈逐年增长趋势，因此，开展市售液态奶中壬基酚污染调查分析具有重要的意义。本研究在粤西某市采集了共计100 种市售液态奶样本，根据杀菌方式归类，分为巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳两类，使用液相色谱串联质谱法测定了样品中的壬基酚含量，以了解不同地区生产的液态奶中壬基酚含量情况和全国的总体水平，评价其安全性，为相关部门和消费者提供参考。

1 试验方法

1.1 样品采集

2021年上半年在粤西某市的各行政区采集灭菌乳及巴氏杀菌乳样品共100 个，涵盖利乐枕、屋脊包、百利包、玻璃瓶等不同包装形态，涉及25 个品牌。

1.2 仪器与试剂

液相色谱串联质谱仪（TripleQuad4500），美国Sciex公司；高速冷冻离心机，美国Sigma公司；电子分析天平，常熟市金羊砝码仪器有限公司；超纯水机，密理博中国有限公司。

乙腈（色谱纯），美国Thermo Fisher Scientific公司；甲醇（色谱纯），美国TEDIA公司；壬基酚标准品，国家标准物质研究中心。

1.3 样品提取与处理

1.3.1 样品的制备

取适量样品混合均匀，密封并标明标记，于-20 ℃冰箱冷藏保存。

1.3.2 样品前处理

准确称取1 g（精确至0.001 g）样品于15 mL具塞玻璃试管中，加入0.1 mL同位素内标混合标准工作液和5 mL乙腈，涡旋混匀，超声提取15 min，8 000 r/min离心5 min，取上层乙腈相；残留部分再用5 mL乙腈重复提取一次，合并乙腈相，置冰箱-20 ℃冷冻2 h，取出于8 000 r/min离心5 min，取上清液待净化。

取固相萃取柱，使用前用18 mL甲醇活化，6 mL水平衡。将所得上清液加30 mL水稀释，充分摇匀后以1～2 mL/min的速度上样，弃去滤液，用12 mL 60%甲醇水溶液（V/V）淋洗，弃去淋洗液，再用6 mL乙腈洗脱，洗脱液于50 ℃用氮气吹至近干。用1 mL甲醇溶解残渣，待测。

1.4 仪器分析条件

1.4.1 液相色谱条件

色谱柱：BEH-C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流速：0.2 mL/min；柱温：30 ℃；进样体积：5 μL；流动相：0.05%氯水，甲醇；梯度洗脱条件见表1。

表1 梯度洗脱程序表

1.4.2 质谱分析条件

多反应监测（Multipler Eaction Monitoring，MRM）：电喷雾负离子模式；电喷雾电压：-4 500 V；离子源温度：650 ℃；干燥气流量：11 L/min；气帘气压力：25 psi；雾化气压力：25 psi；辅助气压力：55 psi。

2 结果与讨论

2.1 乳制品中壬基酚检测结果及包装形态

对采集的100 份液态奶样本中壬基酚含量进行检测，结果如表2所示。在100 份样本中，有88 份样本检出壬基酚，检出率为88.00%，平均含量为82.43 μg/kg。

表2 市售液态奶中壬基酚检测结果

对不同类型样本中壬基酚污染状况进一步分析，巴氏杀菌乳中壬基酚含量区间为7.4～243 μg/kg，平均值为87.06 μg/kg；UHT灭菌乳中壬基酚含量区间为7.88～262 μg/kg，平均值为77.80 μg/kg。

UHT灭菌乳的包装形态均为盒装，巴氏杀菌乳的包装形态较多，涵盖瓶、杯、袋等多个品种，巴氏杀菌乳各类包装形态的数量见表3，有部分样本在包装上注明了包装材料的品牌，包括利乐、SIG、EVERPACK。

表3 市售巴氏杀菌乳包装形态统计

2.2 巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中壬基酚含量分布状况

对不同类型样本中壬基酚污染状况进行进一步分析，UHT灭菌乳样本中壬基酚检出率和含量均高于巴氏杀菌乳。对其分布状况进行分析，不同种类的样品测定含量分布区间见图1。结果多集中在检出限7.4～50.0 μg/kg之间，随着检出值增大，检出样本呈递减趋势。

图1 巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中壬基酚污染情况

2.3 不同人群对壬基酚的膳食暴露评估

按照世界卫生组织（WHO）推荐的风险评估方法原则进行壬基酚膳食暴露评估。暴露评估所用的不同人群的食物消费量数据和年龄、性别、体质量等数据来自2002年中国居民营养与健康状况调查数据库[4，5]。将总体目标人群按照年龄分为10组，并按照性别划分为20 个性别年龄组。其中，液态奶消费数据来自于我国最近一次居民营养与健康状况监测（2010—2013年）。对于每一性别年龄组，按照公式E=CT/W进行暴露评估研究，C代表组人群对液态奶的平均摄入量，T代表液态奶中壬基酚的平均含量，W代表该组人群的平均体质量，E代表该组人群通过液态奶对壬基酚的总体平均摄入量。

如表4所示，不同性别年龄组中，31～45岁男性消费人群通过液态奶对壬基酚的摄入量最低，2～4岁男性消费通过液态奶对壬基酚的摄入量最高，一般人群对壬基酚的平均摄入量为0.08 μg/kg·d，消费人群对壬基酚的平均摄入量为0.34μg/kg·d。总体分析原因为婴幼儿对液态奶等乳制品的消费量相对较高，同时体重远低于成年人和老年人。目前，壬基酚的毒性资料还不完全，仅丹麦环境保护局提出了壬基酚的每日耐受摄入量TDI值（5 μg/kg·bw），本次研究的壬基酚的平均摄入量数据远低于该TDI值，说明目前通过液态奶途径摄入的壬基酚量较少，风险较低。