唐慧，潘延乐，邓梦玲*，王颖旺

（1.宜宾学院 四川宜宾 644000；2.翠屏区动物疫病预防控制中心 四川宜宾 644000）

口蹄疫（foot and mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）感染引起的偶蹄动物的急性、热性和远距离快速传播的烈性传染病，被列为我国一类传染病的首位。FMDV 现有3 种欧洲型（A、O、C）、3 种非洲型（SAT1、SAT2、SAT3）、1 种亚洲型（Asia1）共7 个血清型。其中，A 型和O 型在我国流行最为广泛。目前，对于该病的防控主要依靠疫苗免疫，但由于动物疾病常呈现混合感染、病原变异、免疫抑制、免疫程序不科学等原因，导致免疫失败的情况屡见不鲜。检测疫苗免疫抗体水平是评价免疫效力、制定免疫程序和疫病防控方案的重要依据。

翠屏区隶属于四川省宜宾市，是宜宾市主要的畜牧养殖区域，2020 年全区出栏生猪43.38 万头，增长7.6%；牛出栏0.61 万头，增长7.1%；羊出栏2.24 万只，增长3.2%。为掌握当前猪、牛、羊口蹄疫疫苗免疫抗体水平，及时杜绝疫情隐患，本研究采用液相阻断ELISA 试验对辖区内的14 个乡镇（街道）的猪、牛、羊采取简单随机抽样的方法，进行口蹄疫抗体水平检测，对口蹄疫疫苗的免疫效果进行评估，为后期该病的基层防控工作提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品

2019—2021 年春秋季动物强制免疫后，村级动物防疫员对翠屏区14 个乡镇（街道）（本文用字母代替）的不同的养殖场（户）进行随机抽样，共采集猪血清1,564 份、牛血清396 份、羊血清588 份。

1.2 试剂及仪器设备

口蹄疫O 型抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒，购自广东省深圳市康百得生物科技有限公司。主要设备有恒温培养箱（GKP-01，37±1℃），湖北黄石恒丰医疗器械有限公司产品；酶标仪（HBS-1096A）、96 孔全自动洗板机（HBS-4009）均为南京德铁实验设备有限公司产品；微量振荡器（W220-A），常州市金坛医疗公司产品；移液器。

1.3 检测方法及结果判定

1）检测方法严格按照O 型口蹄疫液相阻断ELISA 抗体检测试剂盒说明书进行操作。

2）结果判定阴性对照孔OD 值≥0.5，阳性对照孔PI≥60%实验有效；样品阻断率PI≥50%，判为口蹄疫病毒抗体阳性，PI＜50%，判为口蹄疫病毒抗体阴性。

2 结果

对翠屏区2019—2021 年辖区内的14 个乡镇（街道）的口蹄疫抗体进行检测，并统计分析，检测样品数量见图1。结果显示，翠屏区2019—2021 年猪、牛、羊O 型口蹄疫抗体平均免疫合格率分别为91.41%、92.01%、94.76%，合格率均在80%以上，符合农业农村部的相关要求。其中，2019 和2021 年的猪、牛、羊O 型口蹄疫免疫抗体合格率均达到90%以上，而2020 年的牛、羊O 型口蹄疫抗体合格率大于80%，具体见图2。

图1 翠屏区2019—2021 年血清样品数

图2 翠屏区2019—2021 年口蹄疫抗体合格率

2.1 猪O 型口蹄疫抗体合格率

从采集的1,564 份猪血清样品中检测出O 型口蹄疫抗体免疫合格样品数量为1,486 份，即翠屏区猪O 型口蹄疫抗体免疫总体合格率为95.01%，其中2019 年只有L 组抗体免疫合格率为100%，2020 年有B、F、G、H、I、K 组抗体免疫合格率为100%，2021 年抗体免疫合格率为100%的有A、B、C、D、E、F、H、I、J、K、L 组，见表1。

表1 2019—2021年翠屏区各镇、街道猪O型口蹄疫抗体合格率统计表

表2 2019—2021年翠屏区猪O型口蹄疫抗体检测结果

2019—2021 年共计检测规模场样品1,359 份，合格数1,317份，合格率为96.91%，散养户共计检测样品205 份，合格数为169份，合格率为82.44%。

2.2 牛O 型口蹄疫抗体合格率

从采集的396 份牛血清样品中检测出O 型口蹄疫抗体免疫合格样品数量为362 份，即翠屏区牛O 型口蹄疫抗体免疫总体合格率为91.41%，其中2019 年F、G、K 组抗体免疫合格率均为100%，2020 年F、I 组抗体免疫合格率为100%，2021 年A、F、G、H、L 抗体免疫合格率为100%，其他组的抗体免疫合格率见表3。

表3 2019—2021年翠屏区各镇、街道牛O型口蹄疫抗体合格率统计表

2019—2021 年共计检测规模场样品323 份，合格数297 份，合格率为91.95%，散养户共计检测样品73 份，合格数为65 份，合格率为89.04%。

表4 2019—2021年翠屏区牛O型口蹄疫抗体检测结果

2.3 羊O 型口蹄疫抗体合格率

从采集的588 份羊血清样品中检测出O 型口蹄疫抗体免疫合格样品数量为541 份，即翠屏区羊O 型口蹄疫抗体免疫总体合格率为92.01%，其中2019 年D、E、F、G、L、M、N 组抗体免疫合格率为100%，2020 年未见抗体免疫合格率为100%的组，2021 年C、F、L、M、N组抗体免疫合格率为100%，见表5。

表5 2019—2021年翠屏区各镇、街道羊O型口蹄疫抗体合格率统计表

2019—2021 年共计检测规模场样品468 份，合格数433 份，合格率为92.52%，散养户共计检测样品120 份，合格数为108 份，合格率为90.00%。

3 讨论

翠屏区2019—2021 年口蹄疫抗体免疫合格率均高于80%，高于农业农村部规定的抗体合格率70%，规模养殖场的抗体水平普遍较散养户高。主要原因是规模养殖场主的圈舍建设、管理技术及防疫水平更为规范和科学，养殖设备也更为先进，并且规模化养殖场配备有自己的驻场兽医，对免疫监测程序不断优化，能有效提高免疫工作的效率，在对样品的采集和保存方面更严格，保证了血清的质量。

某些组抗体水平相对较低，原因可能是乡镇干部及养殖户的疫情防范意识薄弱，担心疫苗对家畜产生应激反应，未按照国家制定的免疫制度进行疫苗免疫；饲养管理不当，饲料种类单一、品种不良，日粮搭配不合理；家畜圈舍环境卫生较差，消毒制度不健全，外来人员等未进行严格管控和消毒，冬春季未采取适当措施进行保温等，导致畜禽机体抵抗力低下，易患病；部分村防员缺乏专业知识和专业素养；未按照规定的免疫程序进行免疫。所以，需要加强对防疫人员专业知识和技术操作培训，与此同时，还应加强养殖方面的饲养管理和圈舍卫生，增强畜群抵抗力，做好生物安全防控，从而有效预防和控制口蹄疫疫情的发生。

表6 2019—2021年翠屏区羊O型口蹄疫抗体检测结果

本次实验仅代表随机抽检疫苗的免疫情况。牛O 型口蹄疫灭活苗、牛羊O-A 二价灭活疫苗、猪O 型口蹄疫灭活苗在免疫后，免疫后O 型口蹄疫抗体合格率均达到农业农村部规定的70%以上要求，对A 型口蹄疫疫苗的免疫效果评价不在本文中描述。牛、羊O 型口蹄疫的抗体合格率先降低后升高，牛O 型口蹄疫的抗体合格率涨幅较羊的大，猪O 型口蹄疫抗体合格率保持稳步上升的趋势，表明O 型口蹄疫免疫抗体合格率不稳定，疫情防控形势依然严峻。可能跟养殖场免疫程序制定不科学、操作不规范、其他免疫抑制病等相关。

疫苗免疫是预防重大动物疫病的重要手段，而免疫效果不仅与疫苗质量、免疫程序、接种方法、接种剂量、接种时间等有关，同时也与饲养管理及营养供给密不可分。近年来，口蹄疫给养殖业带来巨大的经济损失，为防止疫病对生产发展的影响，各镇、街道需加大宣传力度、人员培训及资金投入，做好每年的春、秋季动物集中免疫和日常补免工作，保障O型口蹄疫免疫密度，确保免疫质量。与此同时，养殖单位也需提高防控意识，加强饲养管理，发现疫情立即上报并隔离，按国家相关规定处置疫点、疫区和受威胁区的易感动物，扑杀并无害化处理易感动物，防止疫情发生。