王 静，苗 姝，佟金平，王 涛，孙 伟

(1.大连大学附属新华医院呼吸与危重症医学科，辽宁大连 116021；2.大连大学附属中山医院呼吸与危重症医学一科，辽宁大连 116001；3.四川省医学科学院·四川省人民医院呼吸与危重症科，成都 610072)

支气管哮喘是一种由肥大细胞、嗜酸性粒细胞(eosinophil，EOS)、淋巴细胞等多种细胞及细胞因子参与的气道慢性炎症疾病[1]。最新流行病学调查研究显示全球约由3亿人患有支气管哮喘，而中国占1/10，且哮喘的控制现状并不满意[2]。气道炎症和气道高反应性是支气管哮喘典型病理特征[3]。研究发现气道炎性细胞的聚集与炎性介质、细胞因子的释放均受到趋化因子的调节[4]。趋化因子作为一种生物活性介质，在调节炎性细胞移动及释放活性介质调节方面发挥重要作用[5]。趋化因子配体13蛋白(C-X-C chemokine ligand 13，CXCL13)是非常重要的趋化因子，可通过促进免疫细胞和炎性细胞的迁移，将特异性的细胞群，如特异性T细胞、B细胞等聚集在肺组织周围，增加了气道的高反应性，从而参与了支气管哮喘炎性反应的全过程[6-9]。但目前CXCL13在支气管哮喘中的临床意义尚不明确，所以本研究拟通过检测支气管哮喘患者血清CXCL13水平，分析其与肺功能、炎性因子的相关性，为将来支气管哮喘的临床治疗、病情评估提供理论依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年3月至2021年3月大连大学附属新华医院收治的100例支气管哮喘患者为研究对象。纳入标准：(1)符合2016年版《支气管哮喘防治指南》的诊断标准；(2)1个月内未使用抗感染、激素、免疫抑制剂等药物；(3)患者及其家属对本研究表示同意、配合并签署知情同意书。排除标准：(1)合并其他疾病，如感染性相关疾病、免疫性系统性疾病、其他器官过敏性疾病；(2)其他气道及非特异性感染性疾病，如慢性阻塞性肺疾病、支气管扩张、肺结核等疾病；(3)患有严重肝肾功能障碍，高血压、糖尿病等系统性疾病。根据支气管哮喘临床指南，根据病情程度分为急性发作组和慢性持续组。急性发作组60例，其中男30例，女30例，年龄19～50岁，平均(35.35±7.45)岁，BMI 17.8～27.2 kg/m2，平均(21.05±4.03)kg/m2。慢性持续组40例，其中男20例，女20例，年龄21～53岁，平均(35.88±6.45)岁，BMI 18.6～25.7 kg/m2，平均(21.52±2.25)kg/m2。另选取40例门诊体检的健康志愿者作为健康对照组，均经门诊体检后除外呼吸道感染、哮喘、高血压、糖尿病、免疫性相关系统性疾病等。健康对照组中男20例，女20例，年龄20～55岁，平均(35.23±4.94)岁，BMI 17.2～24.5 kg/m2，平均(21.01±2.51)kg/m2。3组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究获得医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1生化指标检测

在入院后24 h内采集符合诊断标准的支气管哮喘患者肘静脉血(5 mL)，一份放置在干燥离心管内，另一份放置在抗凝的生化检查试管内。1 h内将干燥离心管置于TDZ4-WS低速自动平衡离心机(长沙湘智离心机仪器有限公司)4 ℃条件下3 000 r/min离心(离心半径为10 cm)，时间为15 min，之后取血浆保存于-80 ℃冰箱内(美国Thermo Fisher公司)。ELISA检测各标本血清中CXCL13的表达水平，试剂盒购自法国Diaclone公司。E601电化学发光仪(美国罗氏公司)及其配套试剂检测血清免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)的表达水平。另一份抗凝生化试剂管的血液标本充分摇匀后上机，采用Sysmex XT4000-i全自动血细胞分析仪检测外周血EOS计数。

1.2.2肺功能检测

符合诊断标准的支气管哮喘患者在入院72 h完成肺功能检查，健康对照组的检查时间不受限制。Master Screen肺功能仪(德国耶格公司)，检测前吸入200 μg沙丁胺醇，15 min后测量第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second，FEV1)，计算FEV1与用力肺活量(forced vital capacity，FVC)的比值(FEV1/FVC)、FEV1占预计值百分数(FEV1%pred)。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 3组CXCL13、IgE、EOS水平比较

急性发作组CXCL13、IgE、EOS水平高于慢性持续组和健康对照组，且慢性持续组高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组CXCL13、IgE、EOS水平比较

2.2 3组肺功能比较

急性发作组FEV1、FEV1/FVC、FEV1%pred低于慢性持续组和健康对照组，而慢性持续组低于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 3组肺功能比较

2.3 CXCL13水平与IgE、EOS和肺功能的相关性分析

以急性发作期患者CXCL13水平为因变量，IgE、EOS、FEV1、FEV1/FVC、FEV1%pred为自变量，进行多元线性回归分析。结果发现CXCL13与IgE、EOS呈正相关，与FEV1、FEV1/FVC、FEV1%pred呈负相关，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 CXCL13与IgE、EOS和肺功能参数的相关性分析

2.4 ROC曲线

ROC曲线结果显示，CXCL13、IgE、EOS用于预测支气管哮喘急性发作曲线下面积分别为0.833 9、0.546 7、0.632 6。CXCL13预测支气管哮喘急性发作的效能最佳，见图1。

图1 ROC曲线

3 讨 论

支气管哮喘是影响人们日常生活质量的常见呼吸道疾病[10]。在过敏等因素诱发支气管哮喘发作过程中，T淋巴细胞、B淋巴细胞、酸性粒细胞及中性粒细胞在支气管黏膜处的聚集后释放一系列生物活性物质，引起气道的高反应性，导致患者出现明显的呼吸困难[11-12]。但上述细胞相互作用后产生的这一系列生物学效应受到了趋化因子的调节[13]。趋化因子通过与其特异性受体结合后招募了炎性细胞的活化、积聚，最终触发了气道内的过敏炎性反应[14-15]。CXCL13是趋化因子CXC家族成员之一，基因定位在4号染色体长臂2区1代，主要分布于淋巴组织中，而气道中CXCL13主要由成纤维细胞和内皮细胞分泌，由于其具有趋化、募集EOS、B淋巴细胞、T淋巴细胞的生理作用，因此，在支气管哮喘发作中扮演了重要角色[16-17]。

目前关于CXCL13在呼吸道疾病中的临床意义少有报道，而在基础研究中曾发现在流感病毒感染的小鼠模型中CXCL13促进了气道支气管相关淋巴结的形成，并在支气管哮喘小鼠模型中检测出CXCL13表达水平增加，以此证明了CXCL13水平与支气管相关淋巴组织产生的IgE与EOS募集相关[18]。此外，也发现了使用CXCL13抑制剂对支气管哮喘小鼠模型进行干预后，气道炎症明显减轻[18]。同时，国外的报道也发现支气管哮喘患者的支气管肺泡灌洗液中存在CXCL13的高表达[19]。所以，本研究推测CXCL13可能通过调节IgE、EOS参与了支气管哮喘的急性发作。

目前的研究已经证实了IgE是参与支气管哮喘发病的重要因素，且IgE的表达水平能够直接反映支气管哮喘患者的炎症程度[20]。所以，本研究将IgE作为对照指标，比较支气管哮喘急性发作期患者血清中CXCL13与IgE之间的相关性。本研究结果表明IgE在急性发作组血清中的表达水平明显高于慢性持续组和健康对照组，且血清CXCL13水平与IgE水平呈正相关，说明CXCL13和IgE均能反映支气管哮喘患者的炎症水平。

EOS一直被公认是支气管哮喘急性发作的重要标志，也是支气管哮喘发生过程的主要效应细胞，在过敏性疾病中发挥关键作用[21]。大量证据支持支气管哮喘的严重性与气道内EOS的水平呈正相关[21]。在气道内积聚的EOS可以直接损伤气道黏膜，增加气道平滑肌的收缩及气道高反应性。因此，本研究也将外周血EOS百分比作为反映支气管哮喘中气道炎症的指标，并将支气管哮喘急性发作期患者血清中的CXCL13的表达水平与EOS百分比水平进行相关性分析，也发现了两者之间呈正相关。除此之外，本研究中发现CXCL13对预测支气管哮喘急性发作的临床效能要优于IgE、EOS，这些结果更加证明了CXCL13可以作为评估支气管哮喘急性发作的血清学标志物。

综上所述，CXCL13水平与患者肺功能、IgE、EOS密切相关，监测血清CXCL13水平可辅助评估哮喘急性发作的可能，对医生指导哮喘防治及改善疾病预后也具有重要的临床意义。