许崇友 韩勇

(1.山东省日照市东港区动物疫病预防控制中心，山东日照 276800；2.山东省日照市动物疫病预防控制中心，山东日照 276800）

鸡白痢是由鸡白痢沙门氏菌引起的鸡细菌性疫病，在鸡群中广泛存在[1-2]。鸡白痢沙门氏菌感染可造成雏鸡严重白痢，有的呈急性败血症，发病率和死亡率较高。成年鸡感染后多呈慢性或隐性感染，可长期带菌[3]。鸡白痢既可水平传播，也可垂直传播，不仅给家禽养殖业带来严重危害和经济损失[4-5]，而且威胁到畜产品质量安全和公共卫生安全[6]。目前，国内规模鸡场鸡白痢感染水平较高，2017—2019 年李照伟等选取31个规模化鸡场抽检1340 份鸡血清样品，采用鸡白痢抗体平板凝集试验，结合鸡场生物安全措施及净化情况，开展了鸡白痢血清学调查，结果显示，鸡白痢平均场群阳性率为83.87%，个体阳性率为13.43%[7]，感染情况严重。

日照市家禽种业丰富，既有日照麻鸡优良地方品种，又有白羽肉鸡等引进品种，鸡白痢净化难度较大。为了解日照市日照麻鸡和白羽肉鸡的鸡白痢流行状况，为净化提供技术支撑。本研究对全市种鸡场和规模场开展了基础调查，建立了全市抽样框。对鸡场分类建立档案，每个场建立净化方案，推进鸡白痢净化工作。自2017—2021 年连续开展鸡白痢流行病学调查，采用流行病学采样方式，对全市的原种鸡场、祖代场、父母代和规模场进行抽样检测，掌握了鸡白痢的流行状况。

1 材料与方法

1.1 抽样框的建立

依托胶东半岛和山东省高致病禽流感无疫区建设，对全市禽场进行摸底调查，对种鸡场、规模鸡场和养鸡户建立抽样框。

1.2 样品及抽检方法

根据建立的抽样框，将全市鸡场按照原种、祖代、父母代、商品代进行建档，原种和祖代场群全部抽样，商品代场随机抽样。场群确定后群内采用流行病学抽样方式，由于采用实验室检测，考虑检测方法的敏感性，即检测到阳性动物，按照中国动物卫生与流行病学中心设计的Epi Sampling Calculator 软件，以估计流行率的抽样方法进行抽样检测，抽样样本量计算公式[8]为：

式中n 为抽样个数，CL 为置信水平，D 为群中的阳性动物数（等于群内个体数与预定流行率的乘积），N 为群内个体数，Se 为检测方法的敏感性。

每个场点按照群内阳性率10%，置信水平95%，每个场点随机抽样30 份。由于原种场阳性率较低，扩大了抽样数量，每个场随机抽样100 份。

2017—2021 年，在日照市采集20 个鸡场样品进行检测，其中包括原种鸡场2 个、祖代/父母代场6 个、商品代场12 个，采样情况见表1。

表1 日照市种鸡场和规模场采样情况

1.3 检测试剂与仪器

平板凝集试验抗原及阳性、阴性血清购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司。生物安全柜购自新西兰公司，超纯水纯化系统（Cascada）购自美国PALL 公司，移液器购自Eppendorf公司。

1.4 实验室检测方法

1.4.1 样品采集用酒精棉球或碘酒进行消毒后，用针头刺破鸡的肱静脉、鸡翅静脉或冠尖，用移液器或针管取血适量进行试验。

1.4.2 检测方法

用移液器吸取抗原0.05mL，垂直滴于玻板上，然后取血0.05mL，与抗原混合均匀，并涂散至直径2cm 的液面，2min内判定结果。发生50%（++）以上凝集者为阳性，不发生凝集者为阴性，介于上述两者之间者为可疑。同时设阳性、阴性血清对照，分别滴加抗原混匀，在2min 内，阳性血清应出现凝集，阴性血清应不凝集。

2 结果与分析

2.1 监测总体情况

2017—2021 年，连续对全市20 个种鸡场开展监测，其中日照麻鸡场9 个，白羽肉鸡11 个。结果显示，经过多年持续的净化，鸡白痢总体感染率呈明显下降趋势，但部分祖代和父母代鸡场阳性率仍较高，仍需继续坚持净化。

2.2 日照麻鸡和白羽肉鸡鸡白痢检测情况

2017—2021 年，对9 个日照麻鸡场和11 个白羽肉鸡场进行监测，鸡白痢群体阳性率和个体阳性率呈明显下降趋势，净化成效显著。但日照麻鸡的感染情况较白羽肉鸡严重，提示应需继续加强净化力度。

经过多年的监测净化，日照麻鸡原种场在2021 年未检测出鸡白痢，净化成效明显，但日照麻鸡祖代/父母代、商品代场的阳性率仍较高，个体阳性率均超过5%，感染情况不容乐观。白羽肉鸡的鸡白痢感染情况较日照麻鸡轻，但商品代场的个体阳性率也接近5%，感染情况也较严重（见表2、表3）。

表2 2017—2021 年日照麻鸡和白羽肉鸡群体阳性率检测情况

表3 2017—2021 年日照麻鸡和白羽肉鸡个体阳性率检测情况

3 结论与讨论

鸡白痢既可水平传播，也可垂直传播，其中垂直传播方式随种群繁育会造成病原扩散，造成危害扩大的继代效应。因此，种禽场的净化显得尤为重要。日照市种禽场品种资源丰富，既有地方优良品种日照麻鸡，又有白羽肉鸡等引进品种，鸡白痢净化任务难度较大。为做好日照市鸡白痢净化工作，2017—2021 年课题组采用流行病学抽样方式，考虑检测方法的敏感性，以估计流行率的抽样方法，抽检20 个养禽场开展净化监测。结果表明，日照市鸡白痢总体感染率呈明显下降趋势，表明净化成效显著。但部分祖代和父母代鸡场阳性率仍较高，尤其是日照麻鸡的祖代和父母代场阳性率较高，仍需继续加大净化力度。

日照麻鸡是山东省地方优良品种，抗病力强、耐粗饲、肉质风味好、产蛋多，属肉蛋兼用型品种，深受广大消费者的欢迎。1978 年，被列为山东地方家禽良种，2009 年被山东省畜牧兽医局列入《山东省畜禽遗传资源保护名录》[9]。日照市政府高度重视日照麻鸡的保种和推广工作，投入大量资金用于日照麻鸡核心群的发展建设，目前日照麻鸡存栏原种5000 余只，祖代鸡3 万套，年产父母代鸡苗100 万套，配套品种接近20 个。20 世纪八九十年代，由于外来品种的引进和杂交改良，日照麻鸡感染鸡白痢的病例报道逐渐增多，净化工作刻不容缓。本次监测也发现日照麻鸡的鸡白痢感染率比白羽肉鸡要高，尤其祖代/父母代、商品代场的个体阳性率均超过5%，在今后的净化工作中要加强种源净化，尽早解决鸡白痢对日照麻鸡这一优良地方品种的威胁，达到国家净化标准。

鸡白痢不但可以垂直传播，也可以水平传播，因此，在做好种源净化的基础上，还应在孵化期间减少种蛋在孵化过程中污染风险，同时在运输期间加强消毒灭源，在饲养环节中强化人员、物资、笼具、饮水、饲料的管理以及消毒灭源等风险环节的管控[10]。