杨琪 刘彩霞 王静 毋立华

摘要：目的：建立气相色谱法测定酒石酸美托洛尔中间体及环氧乙烷的含量。方法：采用气相色谱法，色谱柱为安捷伦DB-624毛细管柱（30 m×0.53 0mm，3.00 μm），氢火焰离子化检测器（FID），载气为氮气，流速2.0 ml·min-1，柱温采用程序升温，初始温度为40 ℃，保持3 min，以20 ℃·min-1升温至240 ℃，保持10 min，采用外标法定量。结果：该检测方法对中间体及环氧乙烷的分离效果、线性关系均良好。结论：本法专属性强、灵敏度高，可用于酒石酸美托洛尔中间体及环氧乙烷含量的测定。

关键词：气相色谱法;环氧乙烷;中间体;酒石酸美托洛尔

酒石酸美托洛尔是β 受体阻滞剂，为治疗高血压、心绞痛的首选药物[1-2]。酒石酸美托洛尔在各国药典中均有收载，但目前尚未检索到关于遗传毒性杂质的报道。酒石酸美托洛尔合成工艺中所用到的起始物料会引入环氧乙烷，该成分对人体毒害较大，具有一定的遗传毒性和致癌性[3]。合成工艺中的重要中间体[1，2-环氧-3[4-（2-甲氧基乙基）苯氧基]丙烷]具有警示结构单元，对人体有安全隐患。故本文通过实验建立测定酒石酸美托洛尔中环氧乙烷及其重要中间体含量的气相色谱法，能有效检测其残留量情况，防止其对人体健康造成危害。

1 仪器与试剂

气相色谱仪（Agilent 7890 A）;自动进样器（Agilent G4513A）FID检测器;电子分析天平（Mettler XS 205）。

乙腈（天津赛孚瑞科技有限公司）;环氧乙烷（阿拉丁）;中间体（TRC）酒石酸美托洛尔。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

采用安捷伦DB-624毛细管柱（30 m×0.530 mm，3.00 μm）;进样口温度为220 ℃;氢火焰离子化检测器（FID）温度为250 ℃;载气为氮气，流速为2.0 ml·min-1;柱温采用程序升温，初始温度为40 ℃，保持3min，以20 ℃·min-1升温至240 ℃，保持10 min;进样体积为5 μl。

2.2 溶液的制备

溶剂 乙腈：水=50：50

对照品溶液 取环氧乙烷对照品、中间体对照品各适量，加溶剂稀释制成每1 ml约含1 μg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液 取酒石酸美托洛尔适量，加溶剂稀释制成每1 ml约含250 mg的溶液，作为供试品溶液。

2.3 专属性试验

分别精密量取溶剂及对照品溶液各5 μl注入气相色谱仪，记录色谱图。试验结果表明，溶剂无干扰峰，对环氧乙烷及中间体测定无干扰，表明本法专属性强。

2.4 线性关系试验

精密称取中间体对照品约10 mg，置50 ml量瓶中，加乙腈定容至刻度，摇匀，分别精密量取上述溶液及环氧乙烷标准溶液（0.2 mg/ml）各1 ml置10 ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为线性贮备液;分别精密量取线性贮备液1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、2.5 ml、3.0 ml、3.5 ml各置50 ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为线性1#～6#溶液，分别精密量取5 μl，注入气相色谱仪，记录色谱图，以峰面积A对浓度C绘制标准曲线。进行线性回归，结果见表1。在表1所示线性范围内，各成分的峰面积与浓度呈良好的线性关系。

2.7 定量限与检测限

取对照品溶液，加溶剂稀释制成不同浓度的溶液，依法进样，当环氧乙烷的浓度为0.400 μg·ml-1、中间体的浓度为0.409 μg·ml-1时，其信噪比约为10，即为其定量限;当环氧乙烷的浓度为0.200 μg·ml-1、中间体的浓度为0.123 μg·ml-1时，其信噪比约为3，即为其检测限。

2.9 回收率试验

精密量取“2.4”项下线性贮备液2.5 ml置10 ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作為回收率试验用贮备液;取酒石酸美托洛尔（批号：20200101，环氧乙烷及中间体含量均为0）约1250 mg，共9份，精密称定，置9个5 ml量瓶中，分别精密加入回收率试验用贮备液0.8 ml、1.0 ml、1.2 ml，各浓度分别配制3份，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

依法测定并计算回收率。结果表明，环氧乙烷的回收率为100.92%，RSD为2.57%（n=9）;中间体的回收率为100.23%，RSD为1.58%（n=9）。

2.10 样品测定

称取酒石酸美托洛尔（批号：20200101、20190807、20191024、20191116）各约1250 mg，精密称定，置5 ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，依法测定环氧乙烷及中间体含量，结果显示四批样品中均未检出环氧乙烷及中间体。

3 讨论

结合酒石酸美托洛尔的合成路线，因工艺中使用的起始原料有可能会引入基因毒性杂质环氧乙烷;重要中间体[1，2-环氧-3[4-（2-甲氧基乙基）苯氧基]丙烷]具有警示结构单元，对人体有安全隐患;故两者均按照基因毒性杂质的控制策略进行控制。按毒理学关注阈值1.5 μg/天以酒石酸美托洛尔每日最大剂量400 mg计算，环氧乙烷及中间体的限度均为3.75 ppm。

参考文献：

[1]严菲，曹玲，李耕，等. 酒石酸美托洛尔原料及其片剂有关物质检查方法研究[J]. 中国药品标准，2020，21 （5）： 447-454.

[2]张增谦.心血管疾病的常见治疗药物及合理用药[J]. 中国医药指南，2015，13 （18）： 296

[3]江丰，吴婉琴，黎星，等. 顶空/气相色谱-质谱法测定食品中环氧乙烷及其代谢物2-氯乙醇残留量[J]. 食品科技，2021，46 （07）： 295-300.F1EE2CB1-5EAB-4F18-8116-9471A54E1253