辛清武 朱志明 缪中纬 郝晓娜,2 李 丽 章琳俐 吴胡强 甘 津 韦友坡 郑嫩珠*

(1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福州350013；2.福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)，福州350002；3.屏南县农业农村局，屏南352300；4.宁德华辰正大农业发展有限公司，屏南352300)

万寿菊为菊科万寿菊属一年生草本植物，又名臭芙蓉、金盏菊、臭菊和蜂窝菊等，每年的夏秋季节为万寿菊花的采收时间，其花和叶经干燥后可入药，具有去淤生新、补血通经和清热化痰之功效[1-3]。万寿菊原产自墨西哥，具有适应性极强、生存能力强等特点，在我国南北方常被作为观赏植物进行栽培，资源极其丰富[4-5]。研究表明，万寿菊主要含有黄酮类及其苷类[6]、叶黄素类[7-9]、精油类[7]、萜类和生物碱类[3,10-11]等成分；其花瓣中含有丰富的天然叶黄素，是提取叶黄素的优质植物原材料[12-14]。叶黄素类成分有抗肿瘤、抗氧化和预防心血管疾病等功效，并在缓解视力疲劳、白内障疾病防治和老年性黄斑退化病治疗等方面具有极其重要的作用[15]，目前在饲料添加剂、食品添加剂、化妆品以及医药等行业中有着广泛的应用[16-19]，具有巨大的经济价值和市场发展空间。

随着经济的快速发展和人民生活水平的不断提高，人们对食品的追求已由数量型向质量型转变，开始注重食品的色、香和味等品质，尤为关注食品的膳食成分和健康的关系。为了迎合市场和消费者的需求，在商业化生产中，家禽饲粮中通常会通过添加一定量的色素来增强家禽蛋和肌肉等的黄度值[20]。色素根据其来源可分为人工合成色素和天然色素。近些年合成色素在许多国家得到广泛的应用。尽管合成色素比天然色素性能更稳定，价格更低，但其安全性也受到了广大消费者的质疑。因此，天然色素受到了人们的关注。目前，万寿菊干花粉及其提取物是肉禽饲料中应用最为广泛的天然色素[21]。但万寿菊干花粉及其提取物在蛋鸡上的应用研究较少，因此本试验选用35周龄海兰灰蛋鸡为试验对象，旨在研究饲粮中添加万寿菊干花粉对蛋鸡生产性能、蛋品质以及蛋黄粗脂肪、胆固醇和叶黄素含量的影响，为万寿菊干花粉在蛋鸡饲粮中的合理开发利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物及材料

试验选用健康状况良好，体重、生产性能相近，食欲正常的35周龄海兰灰商品蛋鸡480只，随机分为5个组，每组4个重复，每个重复24只鸡。对照组饲喂基础饲粮，试验组在基础饲粮中分别添加5、10、20和40 g/kg万寿菊干花粉。试验预试期2周，正试期8周，分别于正试期的第4周末、第8周末采集试验数据进行分析。基础饲粮使用正大集团福州大福有限公司生产的蛋鸡产蛋期配合饲料，其营养水平见表1。万寿菊干花粉购自安国市某药材贸易有限公司，送至厦门谱尼测试有限公司进行检测，其营养水平见表2。

表1 基础饲粮营养水平(风干基础)

表2 万寿菊干花粉营养水平(风干基础)

1.2 饲养管理

试验在福建省屏南县甘棠乡新田村宁德华辰正大农业发展有限公司蛋鸡场进行。采用4层阶梯式笼养，每笼3只鸡，连续的8笼为1个重复。全程粉料饲养，恒定光照时间为16 h/d，光照强度20 lx，舍温控制在18～25 ℃。蛋鸡自由饮水，采食量按122.5 g/(只·d)添加，每日饲喂3次(分别在05:00、11:00和17:00)，每日09:30准时捡蛋，下午打扫鸡舍卫生。

1.3 指标检测

1.3.1 生产性能

正试期内以重复为单位记录每天蛋重、畸形蛋数、产蛋数和鸡只死淘数。每周末定时结料、称重，统计各重复的实际耗料量。根据记录整理统计各组的平均蛋重、产蛋率、料蛋比和畸形蛋率等。

1.3.2 蛋品质

分别于正试期的第4周末、第8周末，每个重复随机取5个重量接近的鸡蛋(n=20)，采用美国ORKA蛋品质分析仪(EA-01)测定鸡蛋的蛋黄色泽、蛋白高度和哈夫单位，使用北京天翔科技有限公司TENOVO蛋壳强度测定仪(KQ-1A)测定蛋壳强度，使用千分尺测定蛋壳厚度(钝端、中端和尖端)，利用游标卡尺测定鸡蛋纵径和横径并计算蛋形指数，采用电子天平准确称量蛋重、蛋壳重和蛋黄重。

1.3.3 蛋黄粗脂肪、胆固醇和叶黄素含量

分别于正试期的第4周末、第8周末，每个重复随机取10个鸡蛋(n=40)，分离蛋黄，冷冻干燥，置于-20 ℃冷冻备测。

蛋黄粗脂肪含量采用索氏抽提法(GB 5009.6—2016，第一法)进行测定，蛋黄胆固醇含量采用比色法(GB 5009.128—2016，第三法)进行测定，蛋黄叶黄素含量采用液相色谱法(GB 5009.248—2016)进行测定。

1.4 数据统计与分析

采用SPSS 19.0软件将所获得的试验数据进行统计分析，利用单因素方差分析(one-way ANOVA)及Tukey多重比较方法进行显著性检验，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著，结果用平均值±标准差(SD)表示。

2 结 果

2.1 万寿菊干花粉对蛋鸡生产性能的影响

由表3可知，与对照组相比，饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉均可显著或极显著提高产蛋高峰期蛋鸡第4和8周的平均蛋重(P<0.05或P<0.01)，其中均以40 g/kg万寿菊干花粉添加组的平均蛋重最高，显著或极显著高于其他添加水平和对照组(P<0.05或P<0.01)；与对照组相比，饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉可极显著提高蛋鸡第4和8周的产蛋率(P<0.01)，且各水平添加组之间无显著性差异(P>0.05)；与对照组相比，饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉均可极显著提高蛋鸡第4和8周的平均日产蛋重(P<0.01)，极显著降低蛋鸡第4和8周的料蛋比(P<0.01)，其中以40 g/kg万寿菊干花粉添加组的平均日产蛋重最高，料蛋比最低；饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉4和8周后，各水平添加组的平均畸形蛋率低于对照组，合格蛋率高于对照组。

表3 万寿菊干花粉对蛋鸡生产性能的影响

续表3项目Items时间Time万寿菊干花粉添加水平 Marigold dry meal supplemental levels/(g/kg)05102040P值P-value畸形蛋率Abnormal egg rate/%第4周 Week 40.5820.0770.2650.0390.307第8周 Week 80.1590.1160.2640.2250.257合格蛋率Qualified egg rate/%第4周 Week 499.41899.92399.73599.96199.693第8周 Week 899.84199.88499.73699.77599.743

2.2 万寿菊干花粉对蛋鸡蛋品质的影响

由表4可知，与对照组相比，40 g/kg万寿菊干花粉添加组第4周蛋黄色泽和蛋壳重以及第8周蛋重、蛋壳重、蛋黄重、蛋黄色泽和蛋壳强度显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01)，第4周哈氏单位和蛋白高度显著降低(P<0.05)；各组其他蛋品质指标之间无显著性差异(P>0.05)。

表4 万寿菊干花粉对蛋鸡蛋品质的影响

续表4项目Items时间Time万寿菊干花粉添加水平 Marigold dry meal supplemental levels/(g/kg)05102040P值P-value蛋壳强度Eggshell strength/N第4周 Week 446.52±5.3746.86±10.4049.16±7.5450.20±6.5951.08±7.750.490第8周 Week 847.91±4.42ABb46.99±7.29Bb49.02±7.40ABab54.47±6.50Aa54.69±9.78Aa0.007蛋白高度Albumen height/mm第4周 Week 46.979±1.300a6.631±0.589ab6.773±0.928ab6.625±0.54ab6.188±0.738b0.014第8周 Week 85.973±0.7175.657±0.7295.975±0.7475.827±0.5435.700±0.5510.710蛋黄色泽Yolk color第4周 Week 44.929±0.267Cc5.538±0.268BCbc6.133±0.274ABab6.875±0.364Aa6.875±0.352Aa0.006第8周 Week 87.333±0.888b7.500±1.454ab7.714±0.994ab7.800±1.145ab7.933±1.033a0.045哈氏单位Haugh unit第4周 Week 480.47±6.73a79.42±4.09ab79.93±5.93ab79.66±3.47ab76.29±5.97b0.037第8周 Week 874.85±5.2772.24±5.8873.99±5.9373.29±4.4571.74±4.310.507蛋壳厚度Eggshell thickness/mm第4周 Week 40.363±0.0180.373±0.0300.376±0.0210.360±0.0260.361±0.0210.359第8周 Week 80.389±0.0180.381±0.0170.389±0.0220.371±0.0270.389±0.0200.052

2.3 万寿菊干花粉对蛋黄粗脂肪、胆固醇和叶黄素含量的影响

由表5可知，与对照组相比，饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉对第4和8周蛋黄粗脂肪含量无显著性影响(P>0.05)；与对照组相比，饲粮中添加10和20 g/kg万寿菊干花粉可显著提高第4周蛋黄叶黄素含量(P<0.05)，但随着添加水平提高到40 g/kg，蛋黄叶黄素含量并未继续提高；与对照组相比，饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉极显著提高第8周蛋黄叶黄素含量(P<0.01)，且蛋黄叶黄素含量随着添加水平的升高极显著提高(P<0.01)。

表5 万寿菊干花粉对蛋黄粗脂肪、胆固醇和叶黄素含量的影响

3 讨 论

3.1 万寿菊干花粉对蛋鸡生产性能的影响

蛋鸡的蛋重、产蛋率和料蛋比是反映其生产性能的重要指标[22]。目前，国内外在蛋鸡饲粮中添加万寿菊干花粉对蛋鸡生产性能影响的研究报道较少。元娜[23]研究表明，在玉米-豆粕型饲粮中添加不同水平的万寿菊提取物可提高蛋鸡的产蛋率，降低料蛋比，但差异不显著。唐会会[24]研究表明，万寿菊叶黄素和维生素C联合添加能够显著降低热应激后蛋鸡的破壳率和死亡率，显著提高产蛋率，极显著提高采食量，这可能与维生素C和万寿菊叶黄素联合使用发挥了协同作用有关。朱艳芝等[25]研究表明，在蛋鸡饲粮中添加0.01%、0.02%的虫草多糖可显著降低料蛋比，显著提高产蛋后期的平均日产蛋重和产蛋率。本研究结果发现，在海兰灰蛋鸡饲粮中分别添加5、10、20和40 g/kg的万寿菊干花粉4和8周后，均可显著提高平均蛋重、产蛋率和平均日产蛋重，明显提高合格蛋率，且显著降低料蛋比和明显降低畸形蛋率，其中以40 g/kg添加水平效果较好。这可能与万寿菊干花粉中含有类胡萝卜素有关，而类胡萝卜素的使用能够提高家禽生产性能[26]。卢建等[27]研究表明，饲粮中添加0.05%、0.10%和0.20%的万寿菊提取物对苏禽青壳蛋鸡的蛋重、产蛋率和料蛋比等生产性能指标无显著影响。这与本研究结果不一致，这可能与选取的万寿菊原料的形态和添加水平等因素有关。

3.2 万寿菊干花粉对蛋鸡蛋品质的影响

蛋品质主要通过蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋形指数、哈氏单位、蛋黄色泽和蛋白高度等指标来综合评定[25]。蛋壳厚度和蛋壳强度直接影响鸡蛋的破损率，哈氏单位则直接反映蛋白品质及鸡蛋的新鲜程度[28]，蛋鸡摄取的类胡萝卜素等的数量和种类决定了鸡蛋蛋黄的色泽。

改善蛋壳质量并降低鸡蛋破损率是增加养殖效益的关键，研究表明，饲粮中添加核黄素可提高白来航鸡的蛋壳厚度[29-30]。本试验在饲粮中添加40 g/kg的万寿菊干花粉8周后可显著提高蛋重、蛋壳重、蛋黄重及蛋壳强度，但对蛋壳厚度没有显著影响。这与杨玉等[28]、Invernizzi等[31]在蛋鸡饲粮中添加酵母硒显著提高了蛋壳强度，但蛋壳厚度无显著变化的研究结果相一致。

蛋黄的重量和比例是反映鸡蛋营养水平的重要指标之一，其主要受蛋鸡的日龄、遗传因素和饲粮的影响[32]。目前针对万寿菊干花粉对蛋黄重量的研究较少，本研究结果发现，饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉8周后，蛋黄重不同程度地提高，推测万寿菊干花粉可能能够通过改善卵巢的营养吸收，从而提高卵黄的重量，其作用机理有待进一步研究。

鸡蛋蛋黄的颜色主要来自叶黄素的沉积，叶黄素在蛋鸡小肠内经被动扩散吸收，与血液中脂蛋白结合可稳固地沉积在蛋黄中，而万寿菊干花粉主要成分为叶黄素和叶黄素酯，是一种天然的食用色素，推测在蛋鸡饲粮中添加万寿菊干花粉及提取物会改善蛋黄的色泽。唐会会[24]、卢建等[27]研究表明，饲粮中添加万寿菊提取物可显著改善蛋黄颜色，本研究在饲粮中添加40 g/kg的万寿菊干花粉4和8周后，均可显著提高蛋黄色泽，与以上研究结果一致，证实万寿菊可以改善蛋黄颜色。

哈氏单位的大小与蛋重呈负相关，而与蛋白高度呈正相关。卢建等[27]报道了饲粮中添加万寿菊提取物与对照组相比可显著提高蛋白高度和哈氏单位。本研究中，饲粮中添加40 g/kg的万寿菊干花粉4周后，蛋白高度和哈氏单位有一定程度的下降趋势，而其他水平添加组无显著差异，这可能与添加组的蛋重显著提高及蛋鸡日龄、品种和饲粮的差异有关。

3.3 万寿菊干花粉对蛋黄粗脂肪、胆固醇和叶黄素含量的影响

3.3.1 万寿菊干花粉对蛋黄粗脂肪含量的影响

蛋黄营养价值较高，其中的脂肪主要以单不饱和脂肪酸为主，脂肪含量影响整个鸡蛋的香味和适口性[33]。王志[34]研究表明，在蛋鸡饲粮中添加200 mg/kg的姜黄素可显著降低鸡蛋中的粗脂肪含量。张旭等[35]研究表明，在蛋鸡饲粮中添加0.5%、1.0%和1.5%的姜黄渣对蛋黄中的粗脂肪含量无显著影响。本研究结果发现，蛋鸡饲粮中添加不同水平的万寿菊干花粉对蛋黄粗脂肪含量无显著影响，这表明万寿菊、姜黄素及姜黄渣等对蛋黄中粗脂肪含量的影响程度不一。

3.3.2 万寿菊干花粉对蛋黄胆固醇含量的影响

胆固醇不仅是组成机体细胞膜的主要成分，同时也是合成性激素和肾上腺皮质激素的重要物质。对动物和人来说，胆固醇是一种必不可少的营养物质，动物和人也必须通过摄入适量的胆固醇来维持正常的生理功能[36]。在人类膳食中，鸡蛋是胆固醇含量最高的5种食物之一，因个体对胆固醇摄入诱导心血管疾病的敏感度不同，因此鸡蛋的过多摄入是否会增加心血管疾病的发生还存在争议[37]。但美国在2015～2020年膳食指南中仍建议尽可能少的摄入胆固醇[38]。因此通过降低鸡蛋中的胆固醇含量来改善其食用价值具有重要意义。吴慧敏[39]研究表明，在蛋鸡饲粮中添加不同水平的茶末4周后，未显著降低鸡蛋蛋黄中的胆固醇含量；而添加不同水平的茶末8周后可显著降低蛋黄中的胆固醇含量。李凤龙等[40]研究表明，在蛋鸡饲粮中添加杜仲叶粉及发酵后的杜仲叶粉均可显著降低蛋黄中的胆固醇含量。李宁[41]研究表明，在蛋鸡饲粮中添加900 mg/kg苜草素可显著降低蛋黄中的胆固醇含量。本研究结果表明，在蛋鸡饲粮中分别添加5、10、20和40 g/kg的万寿菊干花粉4和8周后，对蛋黄中的胆固醇含量没有显著影响，这与元娜[23]的研究结果相一致。

3.3.3 万寿菊干花粉对蛋黄叶黄素含量的影响

万寿菊是天然叶黄素的主要来源之一[6]，万寿菊干花粉中叶黄素酯占类胡萝卜素的70%～90%。尽管叶黄素的最佳营养来源不是蛋黄，但从蛋黄中获得的叶黄素在人体内的生物利用率优于从植物来源或膳食补充剂中获得的叶黄素[42]。本研究结果表明，在蛋鸡饲粮中添加万寿菊干花粉4周后，仅10和20 g/kg添加组蛋黄叶黄素含量显著升高；而到8周后各添加组蛋黄叶黄素含量均极显著提高，最高差异达3倍以上，且随添加水平提高而累积增多。这提示万寿菊中的叶黄素在蛋黄中的累积可能呈时间与剂量依赖。Wang等[43]、张权等[44]研究也发现，蛋黄中的叶黄素含量会随着叶黄素类添加剂添加水平的提高呈递增趋势，但叶黄素在鸡体内的吸收与分布规律目前尚不清楚。王均艺[45]在蛋鸡饲粮中添加不同水平的虾青素复合添加剂，结果表明随着饲粮中虾青素复合添加剂添加水平的提高，蛋黄中的虾青素含量呈递增趋势。虾青素、叶黄素等都属于类胡萝卜素中的胡萝卜醇亚族，而目前关于类胡萝卜素沉积的研究仅涉及到组织、细胞和细胞器水平，关于类胡萝卜素选择性地分布于某些特定的组织及其进入方式，以及可能会产生怎样的生理效应、作用机制目前尚不清楚，还有待于进一步的研究。

4 结 论

① 饲粮中添加万寿菊干花粉可显著提高蛋鸡的产蛋率、平均蛋重和平均日产蛋重，极显著降低料蛋比，且以添加水平为40 g/kg的效果较好。

② 饲粮中添加40 g/kg万寿菊干花粉8周后，可显著提高蛋重、蛋壳重、蛋黄重、蛋黄色泽和蛋壳强度。

③ 饲粮中添加万寿菊干花粉对蛋黄粗脂肪和胆固醇含量无显著影响；饲粮中添加万寿菊干花粉可显著提高蛋黄叶黄素含量，且以添加水平为40 g/kg、添加8周的效果较好。