佘永红　杨德泉　向君

【摘 要】 目的：建立麸炒天麻的质量标准。方法：采用对性状，检查、浸出物测定法，薄层色谱法及HPLC色谱法进行研究。结果：修订麸炒天麻的成品性状、鉴别及含量测定，增订了水分、总灰分、二氧化硫残留量的检查及浸出物测定，15批麸炒天麻的水分在7.13%～11.27%之间、总灰分在2.29%～3.00%之间、二氧化硫残留量在1～210 mg/kg之间、浸出物在42.35%～66.32%之间、天麻素与对羟基苯甲醇总量在0.26%～0.58%之间。结论：建立了麸炒天麻的质量控制标准。

【关键词】 麸炒天麻;质量标准;天麻素;对羟基苯甲醇;HPLC

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2022）15-0035-05

Study on Quality Standard of Fuchaotianma

SHE Yonghong YANG Dequan XIANG Jun

Xiangxi Tujia and Miao Autonomous Prefecture of food and drug inspection office，Jishou 416000，China

Abstract：Objective Establish the quality standard of Fuchaotianma.  Methods Using the method of character， examination and extract determination，By Thin layer chromatography and HPLC.Results The character， identification and content determination of Fuchaotianma were revised. The test of moisture， total ash， sulfur dioxide residue and the determination of extract were added. The moisture content of 15 batches of Fuchaotianma ranged from 7.13% to 11.27%. The total ash content is between 2.29% and 3.00%. The residual amount of sulfur dioxide was between 1 and 210 mg/kg. The extract was between 42.35% and 66.32%. The total amount of gastrodin and p-hydroxybenzyl alcohol ranged from 0.26 to 0.58%.Conclusion The quality control standard of Fuchaotianma was established.

Key words：Fuchaotianma;Quality Standard;Gastrodin;P-hydroxybenzyl;HPLC

天麻為兰科植物天麻Gastrodia elataBI.的干燥块茎，具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络的功能。用于治疗小儿惊风、癫痫抽搐、破伤风、头痛眩晕、手足不遂、肢体麻木、风湿痹痛。明代《普济方》^[1]提出 “炙黄”“麸炒黄”和 “酒炙”等炮制方法。在临床应用中，炒天麻与人参、炒白术、炒白僵蚕等同用，如醒脾散用于治疗小儿慢惊风，吐泻不止，脾困昏沉，默默不食;与石决明（醋煅）、炒白蒺藜、蝉蜕等同用，如天麻退翳散用于治疗垂帘障，昏暗失明。天麻的现代炮制方法主要为润制和蒸制。《中国药典》^[2]2020 年版一部：“洗净，润透或蒸软，切薄片，干燥。”收载了天麻饮片的质量标准，麸炒天麻未收载。各省、市、自治区仍沿用历代方法，主要有酒天麻、姜天麻、麸炒天麻、煨制天麻等，麸炒天麻是《湖南省中药饮片炮制规范》^[3]2010年版收载品种，但是质量标准亟待提升。为了使麸炒天麻饮片质量得到更有效地控制，本标准研究修订了麸炒天麻的成品性状、鉴别及含量测定，增订了水分、总灰分、二氧化硫残留量的检查及浸出物测定，为保障临床疗效提供有效依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1260 高效液相色谱仪（含VWD 检测器、YMC HPLC  Column C18色谱柱、Rev.B.04.03色谱工作站）、AUW220D电子天平（岛津）、ZOOMWO Water Environmental超纯水机、KM5200D中文液晶超声波清洗器（功率200W，40KHz）;DZTW电子调温电热套;XMTD-4000电热恒温水浴锅;TDZ5-WS医用离心机。

1.2 试药 天麻素对照品（批号：110807-202010，含量以95.5%计）、对羟基苯甲醇对照品（批号：111970-201702，含量以99.4%计）、天麻对照药材（批号：120944-201611）均购自中国食品药品检定研究院。硅胶G板（德国默克公司），甲醇、乙腈为色谱纯;水为纯净水;其他试药均为分析纯。15批麸炒天麻由湖南省5家饮片生产企业，产地分别为四川、安徽、湖南、云南。

2 方法与结果

2.1 性状 通过考察15批麸炒天麻的性状特征，标准规定：本品呈不规则的薄片。外表皮黄色至黄棕色，有时可见点状排成的横环纹。切面黄色至黄棕色。角质样，半透明，略有焦斑。有特异气，味甘。如图1所示。

2.2 薄层鉴别 照《中国药典》2020年版一部升麻鉴别（2）方法，取本品粉末1 g，加甲醇10 mL，超声处理30 min，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取天麻对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。再取天麻素对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法《中国药典》2020年版四部通则0502试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10 μL，对照品溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（2∶4∶2.5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对羟基苯甲醛溶液（取对羟基苯甲醛0.2 g，溶于乙醇10 mL中，加50%硫酸溶液1 mL，混匀），在120 ℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。结果如图2所示。

2.3 检查

2.3.1 水分 照《中国药典》2020年版四部通则0832第二法，测定15批麸炒天麻样品的水分。结果见表1。

2.3.2 总灰分 照《中国药典》2020年版四部通则2302，测定15批麸炒天麻样品的总灰分。结果见表1。

2.3.3 二氧化硫残留量 照《中国药典》2020年版四部二氧化硫残留量测定法通则2331测定。15批麸炒天麻的二氧化硫残留量结果见表1。

2.4 浸出物 照《中国药典》2020年版四部通则2201水溶性浸出物测定法项下的热浸法，测定15批麸炒天麻饮片的浸出物。结果见表1。

2.5 含量测定

2.5.1 对照品溶液 取天麻素对照品，精密称定①22.14 mg、②11.02 mg，分置50 mL、25 mL量瓶中，加乙腈-水（3∶[KG-*3/5]97）混合溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得天麻素对照品储备液（422.8740 μg/mL、420.9640 μg/mL）。另精密称取对羟基苯甲醇对照品①22.98 mg、 ②11.42 mg分置50 mL、25 mL量瓶中，加乙腈-水（3∶[KG-*3/5]97）混合溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对羟基苯甲醇对照品储备液（456.8424 μg/mL、454.0592 μg/mL）。精密吸取天麻素对照品储备液及对羟基苯甲醇对照品储备液各2 mL及1 mL，加乙腈-水（3∶97）混合溶液依次稀释成含天麻素42.28740 μg/mL、对羟基苯甲醇22.84212 μg/mL的混合对照品溶液Ⅰ及含天麻素42.09640 μg/mL、对羟基苯甲醇22.70296 μg/mL混合对照品溶液Π。

2.5.2 供试品溶液 取本品粉末（过三号筛）约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，称定重量，超声处理（功率120W，40KHz）30 min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，滤过，精密量取滤液10 mL，浓缩至近干无醇味，残渣加乙腈-水（3∶97）混合溶液溶解，转移至25 mL量瓶中，用乙腈-水（3∶97）混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.5.3 色谱條件 色谱柱：YMC HPLC Column C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流动相乙腈-0.05%磷酸溶液（3∶97）;流速1.0 mL/min;检测波长为220 nm;柱温30 ℃。理论板数按天麻素峰计算，不低于5000。

取混合对照品溶液Ⅰ、供试品溶液按上述色谱条件进样，记录色谱图（图3）。结果表明，样品中其他成分对天麻素、对羟基苯甲醇的测定无干扰。

2.5.4 线性关系考察 精密吸取浓度为422.8740 μg/mL的天麻素对照品储备液10 mL及浓度为456.8424 μg/mL的对羟基苯甲醇对照品储备液5 mL，置20 mL量瓶中，加乙腈-水（3∶97）混合溶液稀释成含天麻素211.4370 μg/mL、对羟基苯甲醇114.2106 μg/mL的混合对照品储备液，吸取上述混合对照品储备液适量，依次稀释成天麻素浓度为2.6430 μg/mL、10.5718 μg/mL、21.1437 μg/mL、42.2874 μg/mL、63.4311 μg/mL、105.7185 μg/mL、211.4370 μg/mL及对羟基苯甲醇浓度为1.4276 μg/mL、5.7105 μg/mL、11.4211 μg/mL、22.8421 μg/mL、34.2632 μg/mL、57.1053 μg/mL、114.2106 μg/mL的混合对照品溶液，精密吸取上述混合对照品溶液各5 μL， 注入液相色谱仪，测定，以峰面积积分值为纵坐标，浓度（μg/mL ）为横坐标，绘制标准曲线。天麻素回归方程为：y=9.9956x-11.245，r=0.9999;对羟基苯甲醇回归方程为：y=20.75x-11.314，r=0.9999。结果表明：天麻素和对羟基苯甲醇对照品分别在2.6430～211.4370 μg/mL和1.4276～114.2106 μg/mL范围内线性关系良好。

2.5.5 精密度试验 取同一麸炒天麻供试品溶液（批号2019102206），连续进样6次，每次5μL，记录色谱峰面积，天麻素峰面积RSD为0.32%（n=6），对羟基苯甲醇RSD为1.8%（n=6），表明仪器精密度良好。

2.5.6 稳定性试验 取同一麸炒天麻供试品溶液（批号2019102206），分别于配制后的0 h、6 h、9 h、12 h、24 h，精密吸取5 μL，注入液相色谱仪，测定，天麻素峰面积RSD为0.20%，对羟基苯甲醇峰面积RSD为0.81%，表明供试品溶液在配制后24 h内稳定。

2.5.7 重复性试验 取同一麸炒天麻供试品溶液（批号2019102206），依法制备6份供试品溶液，按干燥品计算，含天麻素和对羟基苯甲醇的总量分别为3.064、2.963、2.959、2.964、2.960、3.027，RSD为1.6%，天麻素的平均含量为2.034 mg·g^-1，對羟基苯甲醇的平均含量为0.956 mg/g。

2.5.8 回收率试验 取已测定含量（含天麻素2.034mg/g、对羟基苯甲醇0.956mg/g）的同一麸炒天麻供试品（批号2019102206）供试品6份，精密称定，置具塞锥形瓶中，按干燥品计算（水分9.10%），按100%的水平精密加入浓度为422.8740 μg/mL的天麻素对照品储备液及浓度为456.8424 μg/mL对羟基苯甲醇对照品储备液各适量（见表2、3），依法制备供试品溶液，测定并计算，结果天麻素及对羟基苯甲醇平均加样回收率分别为101.4%、96.6%。

2.5.9 样品含量测定结果 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5 μL，注入液相色谱仪，测定，以外标法计算含量。结果见表4。

3 讨论

3.1 检查项目和浸出物限度的拟定 根据实验结果，水分最低值为7.13%，最高值为11.27%，平均值为9.29%，中位数为9.72%，水分定为“不得过12.0%”;总灰分最低值为2.29%，最高值为3.00%，平均值为2.58%，中位数为2.42%，总灰分限度定为“不得过4.0%”;二氧化硫残留量同《中国药典》2020年版天麻药材及饮片标准不得过400 mg/kg;浸出物中最低值为42.35%，最高值为66.32%，平均值为52.58%，中位数为51.02%，麸炒天麻的浸出物限度定为“不得少于40.0%”。

3.2 含量测定限度的拟定 15批次麸炒天麻含量测定结果显示，含量在0.26%～0.58%之间，平均值为0.36%。在天麻炮制加工过程中，使用硫磺熏蒸，饮片整洁美观且具保鲜、防霉、防虫效果，尹珉等^[4]采用 RP-HPLC对不同产地经过硫磺熏蒸与未经过硫磺熏蒸的天麻进行天麻素测定，得出结论，经过硫磺熏蒸后天麻中天麻素的含量普遍低于现行的质量标准。本实验含量最低值为0.26%，为硫磺熏蒸品种，但未超过规定的二氧化硫残留量400 mg/kg，综合考虑，麸炒天麻中天麻素及对羟基苯甲醇含量总量限度同《中国药典》2020年版天麻药材及饮片标准，即“本品按干燥品计算，含天麻素（C13H18O7）和对羟基苯甲醇（C7H8O2）的总量不得少于0.25%。

3.3 天麻麸炒的作用 天麻临床多用生品，味甘，质润，善治一切风证，以平肝息风止痉见长，通过对1批天麻饮片和用其加工成的3批麸炒天麻的含量测定变化情况比较，天麻饮片麸炒后的含量有所降低，可能天麻饮片经过麸炒后使天麻的药性缓和，利于儿童、老年患者用药治疗，同时可以矫正天麻的特异气味，减少黏腻之性，便于服用。

综上，本研究从麸炒天麻的性状、薄层色谱鉴别、水分、总灰分、二氧化硫残留量、浸出物及含量测定方面对麸炒天麻的质量进行了评价，为临床用药安全提供了有效的控制手段。

参考文献

[1]朱橚.普济方（第二册）[M].北京： 人民卫生出版社，1959： 48.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2020：58-59.

[3]湖南省食品药品监督管理局.湖南省中药饮片炮制规范（2010年版）[M].长沙：湖南科学技术出版社，2010：103.

[4]尹珉，毛克臣，陈志峰，等.不同炮制方法对天麻中天麻素含量的影响[J].中国中医药信息杂志，2010，17（7）： 49-50.

（收稿日期：2021-12-02 编辑：陶希睿）