孙璐莹 王少林

摘要：博落回是我国的传统中药，含有大量的异喹啉类生物碱以及多种有活性的药理成分，具有多种药理活性，抗菌效果好且无残留和耐药性等问题，作为饲料添加剂还有促进动物生长的作用，有着巨大的发展前景。本文介绍了博落回植物的培育方式及其抗菌消炎等多种药理作用，简述了目前在畜牧生产领域的应用情况，整理了提取分离到的生物碱成分并介绍了相关的提取分离方法。目前，博落回在畜牧行业主要应用是作为作饲料添加剂，其有效成分的分离提取方法较多，工业上还是以传统的浸提、渗漉、回流等方法为主。本文为博落回药材的进一步开发指明了方向，也为中药资源的综合开发利用提供了思路。

关键词：博落回;药理作用;活性成分;提取工艺

博落回作为我国的传统中药有着非常大的开发利用价值，具有抗菌谱广、无耐药性、无残留、安全性好，分布广等诸多优点，所含的生物碱以及其他的有效成分有着很大的发展前景。现今抗生素滥用带来的抗生素残留、细菌耐药性等问题，给人类的生存环境和身体健康造成了巨大的威胁，当前养殖业急需寻找或者开发绿色、高效、无污染的抗生素替代品来遏制耐药现象的进一步恶化。博落回作为一种纯天然绿色生物产品，有着良好的抑菌活性以及促进动物生长性能等多种功效，不管是作为兽药治疗还是作为饲料添加剂，都对促进畜禽健康生长起到了重要的作用。

1 博落回的生长培育以及药理作用

博落回在我国共有两个种，分别为博落回Macleaya cordata（Willd）R.Br.和小果博落回Macleaya microcar-pa（Maxim.）Fedde，系罂粟科博落回属植物[1]。在我国，博落回（大果）主要分布在湖南、安徽、福建、广东、广西、贵州、河南、湖北、江苏、江西、浙江11个省区，小果博落回主要分布在甘肃、湖北、河南、山西、陕西、四川、重庆7个省市。已有研究发现湖北省和河南省同时分布博落回和小果博落回的野生资源[1]，博落回在日本、俄罗斯、乌克兰也有分布。

1.1 生长培育

博落回具有较强的生态适应性，对气候环境要求不严，具有优秀的抗寒、耐旱能力，在多种质地类型的土壤上均能生长，但以pH值中性至偏碱性、通透性好、土层深厚和光照充足的肥沃土壤为宜[2]。博落回的栽培管理较为简单，人工培育时应选择背风向阳，地势较高、土壤肥沃、土质疏松的地块，3月上旬开始播种，适时采收[2-3]。在相同条件下，博落回植株地上部分各器官生物碱含量最高是果实，叶次之，茎最少[4]。叶片一年可在7月上旬或9月下旬采摘;蒴果最佳采收期为8月底至9月初，此时的蒴果的血根碱和白屈菜红碱含量最高[5]。

目前，我国科研人员利用杂交育种，已选获杂交变异（如三角形果等）品种，还获得博落回和小果博落回其他杂交种、不同产地博落回杂交种等[1];通过化学、辐射处理种子诱发突变，获得有价值的新突变体。研究人员利用植物组织培养技术建立了稳定高效的博落回花药离体培养以及植株再生体系，培育出了博落回单倍体材料[6]，为博落回的基因研究提供了优质素材。在全基因组数据支持下，利用SSR等分子标记技术，对博落回遗传多样性进行研究[7]，为今后利用分子标记技术、选育高生物碱含量的博落回提供基础，将选出的优势博落回植株进行杂交，可以拓宽遗传基础，发掘有利基因，从而促进博落回的遗传改良和新品种培育。

1.2 药理研究

博落回具有悠久的药用历史。文献记载其具有祛风镇痛、解毒消肿等功用。传统中草药博落回主要治疗毒脓肿、恶疮溃疡、疥癣、滴虫性阴道炎等;亦有杀虫、止痒之功效。博落回中含有生物碱、黄酮、萜类、甾体挥发油等多种化学成分，其中主要的生物活性成分为异喹啉类生物碱，主要有抗菌消炎、抗肿瘤和改善肝功能等药理作用。

博落回全草中所含的许多生物碱都具有抗菌性。从博落回不同部位获得的生物碱的粗提物对金黄色葡球菌、枯草芽胞杆菌、草分支杆菌和環状芽孢杆菌等代表性细菌均具表现出了较强的抑制作用，对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强[8]。汪学军等[9]以大肠杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌为指示菌，采用牛津杯法和纸片法证明了博落回根部的抑菌活性最佳;从博落回中提取分离得到的血根碱、白屈菜红碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡葡萄球菌和猪霍乱沙门氏菌的抗菌效果很好[10]。血根碱体外抑菌性实验表明，其对于金黄色葡萄球菌、侵袭性大肠埃希氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌等致病菌的效果优于盐酸金霉素。此外，血根碱能够有效清除由于抗生素滥用产生的细菌生物被膜。研究证明，血根碱具有影响沙门氏菌、大肠杆菌生物被膜及胞外多糖的作用，可以改变这两种菌的生物被膜结构形态[11]。除细菌外，博落回对某些真菌也表现出了抑制作用。博落回的有效成分血根碱对临床常见致病真菌如白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、新型隐球菌、烟曲霉菌以及红色毛癣菌等都有较好的抗菌活性，并且对一些对氟康唑耐药的真菌也表现出与对敏感菌类似的抗菌活性[12]。博落回的有效成分挥发油也具有一定的抗菌效果，且对真菌的作用效果突出，对根霉的作用最好[13]。博落回的抗虫效果明显，其有效成分生物碱对很多害虫能产生拒食、胃毒、毒杀、抑制生长发育、杀卵和种群抑制等多种作用[14]。此外，博落回还对福寿螺[15]、钉螺[16]等具有一定的杀螺效果。

除植物本身所含有效成分外，博落回植物的内生真菌和细菌能够产生与其宿主植物相似的化学有效活性成分。博落回内生细菌枯草芽孢杆菌、根瘤菌可产生生物碱[17]，从其根部分分离出的放线菌经验证具有一定的抑菌效果[18];博落回内生真菌也有抗菌活性，如层出镰刀菌可产生生物碱[19]。这些植物的内生菌产生相似有效成分也能够发挥相同的作用。博落回在发挥抑菌作用的同时还能够缓解病原菌感染引起的各种炎症反应，有研究证明血根碱能够使炎症因子基因的表达下降，IL-10基因的表达增高，通过NF-κB介导的信号通路发挥抗炎作用[20]。

博落回的生物碱是抗肿瘤的有效成分，可通过多种作用机制抑制肿瘤细胞，如通过影响酶的活性、信号转导通路、诱导细胞凋亡等[21]。其中含有的血根碱对肺癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌和血液恶性肿瘤都具有一定的效果[22]。博落回还有一定的护肝作用，临床上有以博落回为君药配伍组方用于病毒性肝炎的治疗，并取得了明显的疗效。杨军衡和汪葵[23]的药理实验表明，博落回对四氯化碳、半乳糖胺所致急性肝损伤模型，均有显著改善肝脏功能作用。肖俐等[24]通过实验证明博落回提取物对大鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用。此外，博落回对实验性肝纤维化有一定的防治作用，其机制可能与其保护肝细胞膜、减轻肝脏炎症及抗脂质过氧化作用有关[25]。

博落回所含的生物碱有局部麻醉作用，口服易引起中毒，轻者出现口渴、头晕、恶心、呕吐、胃烧灼感及四肢麻木、乏力等症;重者出现烦躁、嗜睡、昏迷、精神异常、心律失常而死亡[26-29]。王超等[30]对博落回总碱进行了半数致死量测定得到结论，博落回总碱按毒性分级标准属于大毒性。

2 博落回在畜牧生产中的应用以及药动学研究

2.1 临床应用

博落回作为中药外用可治疗手足股癣、痔疮感染等症[31-32]，在临床上已有治疗宫颈糜烂、宫颈间变、防止宫颈癌的博落回栓剂[33]，治疗皮肤病的煎剂、酊剂等。还可加工用作口服液[34]、生产注射液、颗粒剂、胶囊剂、酊剂、散剂、片剂及生物农药可湿性粉剂、溶液剂原料。目前，博落回相关产品已在动物养殖行业发挥了巨大的作用，博落回注射液被载入2003年版《兽药质量标准》，对仔猪的白痢、黄痢有较好的治疗效果。博落回被欧洲食品安全局认可为用于动物饲料添加剂的资源植物，湖南美可达生物资源有限公司的博落回散（“美佑壮”产品）获批为中国首个二类中兽药药物饲料添加剂[35]，主要用于家猪，也可用于家禽养殖和淡水水产养殖，在全球均有销售。

博落回生物碱具有广谱抗菌性，因此可作为抗生素替代物使用，不仅能够调节肠道微生物菌群结构，治疗细菌感染性疾病，除发挥多种治疗作用外，还能够加强免疫力，提高动物食欲，促进动物生长。这是由于博落回的有效成分血根碱可以减少芳香族氨基酸的降解，提高饲料中芳香族氨基酸的有效含量，有利于保持饲料中不同氨基酸之间的平衡，促进氨基酸向蛋白质的转化，从而提高整个饲料的营养水平[36]。

在猪生产中的应用中，博落回提取物能够降低腹泻率以及提高猪只生长性能，博落回添加在猪饲料中能够促进母猪采食量，增加食欲[37];何夏阳[38]在断奶仔猪饲粮中添加0.5mg/kg血根碱，结果显著提高了断奶仔猪平均日增重、降低了料重比和腹泻率。戴波[39]结合生产成本、效益与临床使用结果表明仔猪日粮中添加0.5mg/kg血根碱可预防和治疗仔猪腹泻，同时也印证了博落回能够提高饲料转化率，能够改善仔猪生长性能。博落回提取物能够提高断奶仔猪血清免疫球蛋白G、一氧化氮含量和溶菌酶活性，显著改善免疫功能，明显增强断奶仔猪抗病能力，从而改善生长性能，其效果优于土霉素[40]。

博落回在家禽生产中的作用主要集中于提高肉雞成活率、日增重、料肉比、生长性能以及改善肌肉品质等方面，博落回提取物也可以提高家禽食欲，促进生长，改善蛋品质[41]。博落回含有丰富的普罗托品类生物碱，主要是原阿片碱和别隐品碱已开发成博落回提取物产品——博普散，应用于治疗蛋鸡输卵管炎。有研究表明，博落回血根碱对沙门氏菌的抑菌效果优于青霉素钠，在鸡饲料中添加博落回生物碱可以有效改善黄羽肉鸡的空肠形态结构，提高空肠中的乳酸杆菌数量[42]，血根碱可改善细胞和体液免疫力，降低回肠微生物数量，进而改善蛋鸡的肠道健康指数[43]。此外，其生物碱还能够促进某些益生菌的增殖，直接或间接抑制有害菌的生长，促进黄鸡小肠绒毛形态结构的发育，改善小肠的消化吸收功能，从而提高动物生产效率。刘露露等[41]研究发现，饲料中添加200mg/kg博落回提取物可以显著提高雪峰乌骨鸡蛋壳厚度和蛋黄指数，改善蛋品质;李长虹等[44]研究发现在基础日粮中添加博落回散30g/t时对提高肉鸭的生产性能最有效。

除了在猪和家禽上的应用以外，博落回提取物还可在反刍动物、乳鸽等生产应用中发挥作用。在湖羊饲料中适当添加博落回提取物可以有效降低甲烷的生成，并且改变瘤胃的发酵模式，促进湖羊生长[45]。博落回提取物能够改善牛乳品质，提高血液抗氧化能力、血红蛋白水平等，缓解奶牛隐性乳房炎[46]。侯振东[47]的实验表明博落回的不同生物碱有促进乳鸽生长、提高日增重和降低料肉比的趋势。

2.2 博落回产品的药动学研究

博落回目前已应用于动物生产，但对于其产品在靶动物的药代动力学研究并不充分。博落回血根碱主要代谢途径是被还原成毒性较低的二氢血根碱[48]，有研究表明白屈菜红碱（CHE）、别隐品碱（ALL）和原阿片碱（PRO）的代谢残留在大鼠和猪的体外代谢存在种属差异，且三种生物碱的代谢率均是大鼠高于猪。此外，三种生物碱在大鼠体内组织中存在一定残留，但是大部分组织的残留量很低[49]。石琦[50]对血根碱和白屈菜红碱在鸡体内的药代动力学研究显示，血根碱在鸡体内吸收快、分布快、代谢快，但吸收率低，口服给药出现双峰，表明血根碱的吸收可能经过肝肠循环。陈梅[51]在1日龄健康白羽肉鸡饲料中添加博落回产品（Sangrovit）发现仅在添加量为500mg/kg组中测得血浆中二氢血根碱含量为0.552μg/L，肌肉中二氢血根碱残留量为0.804μg/kg。普罗托品类生物碱PRO和ALL在肉鸡体内吸收和消除快，吸收率较低，PRO在体内滞留的时间较长，ALL体内的滞留时间较短。PRO和ALL绝对生物利用度分别为2.07%和1.19%，表明生物碱在肉鸡体内的生物利用度低[52]。梁丰达[53]在博落回散在猪体内的药代动力学研究结果表明，在相同给药剂量的情况下，直肠给药的吸收效果优于口服给药。血根碱吸收快、代谢快，在体内只滞留2h左右就已经消除完毕，但是其代谢产物二氢血根碱在体内的滞留时间较长。冯宋岗[54]通过靶动物猪90d饲喂美佑壮（博落回散）的实验，对猪各组织中四种生物碱的药物残留进行定量分析，并结合博落回提取物的急慢性毒性试验等安全性评价结果表明，饲喂美佑壮的猪的肉食性产品是安全的。

3 博落回所含的生物碱及其提取分离

3.1 博落回分离出的生物碱

博落回总生物碱含量可达总质量的1.7%，主要化学成分为苯并菲啶异喹啉类生物碱，根据构成该类生物碱的基本结构（骨架）类型，异喹啉类生物碱可分为20多种[55]，目前，在博落回属植物中能分离到并且确定结构的生物碱有30余个，如血根碱，白屈菜红碱，原阿片碱和别隐品碱等和一些托品类生物碱。此外，还含有甾体化合物、萜类化合物、糖、多糖及其苷类、强心苷、香豆素内酯及其苷、皂苷、黄酮及其苷、挥发油类等多种成分。

3.2 博落回生物碱的提取分离

博落回作为药用植物，其成分复杂多样，须选用合适的方法将有效成分提取出来并进行分离，博落回植株的不同部位生物碱含量不同，其中以果荚血根碱含量较高，茎叶其次。从博落回的不同部位提取分离得到血根碱、白屈菜红碱、氧基血根碱、原阿片碱、别隐品碱、小檗碱等的方法较多，一般是从博落回植物中获得粗提物，再进行纯化以获得单体化合物。获得博落回总碱提取物的方法常用的包括浸提法、渗漉法、回流法、内部沸腾法、超声（辅助）萃取法等。

浸提法是使用最早、最为广泛的方法，博落回生物碱醇溶性较好，将博落回全草（或者植物的不同部位）使用乙醇或甲醇进行温浸（一般为60℃），取浸出液即可。酸化有利于生物碱的浸出，所以可适当降低pH值进行提取[66]。有研究表明，常用的4种提取方式中，提取率从低到高依次为沸水提取法、酸水浸提法、乙醇浸提法、酸性乙醇浸提法。乙醇浓度增高会促使提取率逐渐增大，80%-90%的乙醇提取率均在90%以上。因此，目前工业使用酸性乙醇作为提取液较为合适。在浸提法的基础上进一步演化出了渗漉法和回流法，渗漉法主要的步骤是加入过量稀硫酸进行浸泡，然后转移至渗漉柱中，再加入同浓度硫酸溶液以一定流速进行渗漉提取，收集渗漉液。回流法则主要是用酸性的水溶液或者乙醇溶液浸泡，在适当温度下水浴回流提取一定时间，回收溶剂即得。该类提取方法操作较为简单，但需要大量溶剂，且普遍耗时较长。内部沸腾法是一种在低温条件下快速提取植物有效成分的方法，具有回收率高、产品杂质少及容易实现等优点，适用于大规模生产化，可用于多种天然有效成分的提取。关键步骤是在一定浓度乙醇浸泡后加入一定浓度的沸腾稀硫酸，保温搅拌后冷却过滤，将滤液pH值调至碱性，静置后的溶液进行过滤，取滤渣，即得博落回总碱。有研究表明，该方法提取一次的提取率为13%，HPLC检测到的血根碱含量为6.6%，白屈菜红碱含量为3.1%[67]。

除传统的提取方法外，还有借助超声的方式提高提取效率的超声辅助提取（UAE）法，借助微波提取的微波辅助提取（MAE）法，利用超临界流体特殊性的超临界CO2流体萃取法等提取方法。超临界流体具有较高的溶解能力、较高的传质速率、较好的流动性能和很快到达平衡的能力，且具有良好的可调节性和选择性，由此发展出来的超临界萃取技术相对于传统的水蒸气蒸馏或有机溶剂萃取法具有獨特的优势[68]。

博落回中生物碱的分离一般遵循生物碱提取分离的通性，主要是利用生物碱的溶解性差异、碱度差异、极性差异等来进行分离。博落回中生物碱的分离主要有传统溶剂分离、大孔吸附树脂分离法[69-70]和离子交换树脂[71]等。新发展出的pH 区逆流色谱法（PZRCCC）、微流控芯片非水毛细血管电泳法[72]能够实现较高纯度的提取分离，还可通过调节溶液的 pH 值，制备高纯度苯并菲啶总生物碱，产品的纯度高达 98%[71]。除生物碱外，博落回中其他有效成分的分离也可通过相似的现代分离技术进行获取，色谱技术可以实现包括生物碱在内的多种成分的分离，如硅胶柱层析，凝胶色谱法和半制备高效液相色谱等[73-74]。

4 结束语

博落回作用广泛，且所含生物碱量很高，是一种非常有前景的抗生素绿色替代品，但由于其成分复杂，且具有一定毒性，使其在畜禽生产上的应用受到一定的限制。未来应在提取博落回生物碱的方法工艺上进行完善和创新，探索其在不同动物及不同生长阶段的安全应用剂量，丰富动物饲用安全性和效果方面的研究，开发不同组分的新兽药和不同应用领域的产品，扩大应用范围，对博落回植物不同部位进行综合利用开发，实现中药资源的综合利用。

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