胡鹏飞，解玉兰，耿婉如，马奎影，邵立群，于 淼，陈少青，王 羽，赵 明

（1.内蒙古民族大学附属医院心内科，内蒙古 通辽 028007；2.内蒙古民族大学，内蒙古 通辽 028043；3.内蒙古民族大学医学院，内蒙古 通辽 028043）

获得性扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）是心血管疾病中常见的疾病，其中最常见的是免疫性DCM（Immune dilated cardiomyopathy，IDCM）.研究发现病毒性心肌炎（viralmyoearditis，VMC）可演变为IDCM［1］.蒙药SD-3作为传统蒙药，可以调节三根、七素平衡，起到镇静、安神等作用，笔者临床研究中发现其有减少房早、室早发生率同时改善心率变异性，抗心律失常具有一定效果［2］.而蒙药SD-3对IDCM并发心律失常作用尚未见报道，本研究目的是明确蒙药SD-3对IDCM并发心律失常作用及可能的机制.

1 材料与方法

1.1 实验材料

实验动物为30只Balb/c雄性小鼠（13～15 g），购买于吉林大学基础医学院动物中心，许可证号：scxk（吉）2011-0004；CVB3（Nancy株）由吉林大学基础医学院微生物教研室赠送，病毒原液效价为10-5TCID50/L.CX40抗体、CX43抗体、内参抗体β-actin购于Abcam公司.

1.2 免疫性扩张型心肌病动物模型构建及给药

小鼠适应性喂养后，随机分成对照组（每组10只），IDCM组（每组10只），蒙药SD-3组（每组10只）.IDCM组、蒙药SD-3组腹腔内注射0.1 mL10-5TCID50CVB3，以后每4周腹腔内重复接种0.1 mL 10-5TCID50CVB3，对照组腹腔注射不含病毒的培养液，共3个月模型制备成功后，蒙药SD-3组给予蒙药SD-3（15 mg·kg-1），灌胃处理，一日一次；对照组和IDCM组小鼠则分别灌胃给予0.9% NaCl 0.2 mL，给药4周.

1.3 心电图检查及病理取材、切片制作

给药4周后，行心电图检测后高浓度CO2处死动物，4%多聚合甲醛（500 mL）经腔静脉灌流心脏，固定心脏，包埋，切片后，进行病理检测.

1.4 免疫印迹检测相关蛋白的表达

免疫印迹实验检测心肌组织中缝隙连接蛋白的表达情况.

1.5 统计学方法

应用统计软件SPSS17.0对相关的数据进行方差分析检验判断均数差异的显著性，统计的数据用（±s）表示.

2 结果

2.1 小鼠的一般情况

对照组小鼠活动自如无死亡；IDCM组小鼠在实验开始第2周，出现明显的活动减少、精神不佳、毛蜷缩无光泽、进食量减少，无死亡；蒙药SD-3组小鼠一般状态不如对照组小鼠，但强于IDCM组小鼠.

2.2 病理学改变

通过HE染色结果可知，对照组小鼠的心脏心肌组织整齐，无心肌坏死病理改变；IDCM组小鼠心肌排列紊乱，间质出现水肿，心肌间隔变宽，并出现淋巴细胞聚集等现象，给予蒙药SD-3后上面现象有所改善.通过Masson染色结果可知，与对照组相比，IDCM组小鼠心肌纤维化明显，而给予蒙药SD-3后，心肌纤维化明显受到抑制，见图1、图2.

图1 各组小鼠心肌HE染色（×200）Fig.1 HE staining of mouse myocardial muscle in each group(×200)

图2 各组小鼠心肌masson染色（×200）Fig.2 Masson staining of mouse myocardial muscle in each group(×200)

2.3 各组小鼠心肌组织CX40、CX43表达变化

较对照组小鼠心肌组织中蛋白CX40（1900±280）、CX43（545±57），IDCM组小鼠心肌组织CX40（733±89）、CX43（323±46）表达减少；与IDCM组小鼠相比，蒙药SD-3组小鼠CX40（1869±341）、CX43（538±72）表达明显增加（P＜0.05），见图3.

图3 蒙药苏格木勒-3对小鼠心肌组织中CX40、CX43表达的影响Fig.3 Effect of Mongolian medicine Sugemule-3 decoction on CX40 and CX43 expression in mouse myocardium

2.4 各组小鼠心电图变化

对照组小鼠未见明显心律失常，IDCM组小鼠室早明显增多，与IDCM组小鼠相比，蒙药SD-3组小鼠室早明显减少，见图4.

图4 各组小鼠心电图变化Fig.4 Changes of mouse electrocardiograms in each group

3 讨论

心肌病是由于多种原因导致的心肌发生炎症性的改变，其中由于病毒感染继发的免疫调节异常，即IDCM，在青少年中发病率呈逐年上涨的趋势.而目前IDCM的治病机制不明且尚未找到有效抵抗病毒的药物.因此，探索IDCM的致病机制和寻找到有效的干预手段已成为国内外研究的重点内容.

心肌细胞之间通过闰盘连接，闰盘作为一个蛋白网，参与心肌电传导等生理过程，当发生心肌纤维化、心肌重构等病理改变时，闰盘蛋白在上述病理改变后也会发生改变.闰盘中包括缝隙连接，其是由两个六聚体在细胞间相互对接形成，负责心肌细胞之间电信号的传导，心肌细胞缝隙连接蛋白由connex-in40、connexin43和connexin45构成［3］.大量文献报道，当各种原因导致connexin蛋白表达减少，可诱发心律失常［4-5］.本研究团队也在前期实验发现，阿霉素心肌病并发心律失常大鼠的心肌中，通过电子显微镜检测，可观察大鼠心室肌的闰盘结构被破坏，connexin40、connexin43及p-connexin43的表达明显减低［6-7］，文献报道，病毒性心肌炎小鼠心肌中CX 43和CX 45表达明显减少［8］.笔者在临床研究中发现蒙药苏格木勒-3汤有抗心律失常作用，但对IDCM心律失常作用及机制尚未清楚.本研究结果明确蒙药SD-3可减少IDCM并发心律失常，其作用机制可能与降低IDCM心肌纤维水平，提高心肌组织中Cx40、Cx43表达相关.