迟梦宇 陈子雷 毛江胜 卢琦 张艳 李慧冬

摘要 [目的]建立测定甲氧虫酰肼在番茄上残留的高效液相色谱检测方法。[方法]样品经过酸化的甲醇高速匀浆提取，经过二氯甲烷萃取，采用甲醇∶乙腈∶水（30∶55∶15，V/V）为流动相，利用symmetry C18柱（4.0 mm×250 mm）进行检测。[结果]在0.01、0.50、2.00 mg/kg 3个添加浓度水平下，甲氧虫酰肼在番茄上的回收率为85%～105%，相对标准偏差（RSD）为0.6%～1.4%。相关系数（r）为0.999 8。甲氧虫酰肼在番茄上的最低检出限为0.01 mg/kg，最小检出量为2 ng。在实际样品检测中检测出有甲氧虫酰肼的残留，但均未超过我国规定的最大残留限量值。[结论]在实际样品检测中，该方法能够快速、准确地对样品进行检测，为大量样品的检测提供了数据方法。

关键词 高效液相色谱法;甲氧虫酰肼;番茄;农药残留

中图分类号 TS 207.5+3  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2021）23-0201-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.23.056

Determination

of Methoxyfenozide Residues on Tomatoes by High Performance Liquid Chromatography

CHI Meng-yu1，2，3，CHEN Zi-lei1，2，3，MAO Jiang-sheng1，2，3 et al （1.Institute of Quality Standards & Testing Technology for Agro-Products of Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan，Shandong 251000;2.Shandong Key Laboratory of Testing Technology for Food Quality & Security，Jinan，Shandong 251000;3.Monitor Inspection &Test Center of Foods Quality of Ministry of Agricultural and Rural Affairs （Jinan），Jinan，Shandong 251000）

Abstract [Objective] To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） for the determination of methoxenozide residues on tomatoes.[Method]Methanol：acetonitrile：water （30∶55∶15，V/V） was used as the mobile phase，and a symmetry C18 column （4.0 mm×250 mm） was used for detection.[Result]At three additive concentration levels of 0.01，0.50，and 2.00 mg/kg，the recovery of methoxenozide on tomatoes was 85%-105%，and the relative standard deviation （RSD） was 0.6%-1.4%.The correlation coefficient （r） was 0.999 8.The minimum detection limit of methoxenozide on tomatoes was 0.01 mg/kg，and the minimum detection amount was 2 ng.The methoxenozide residues were detected in the actual samples，but none of them exceeded the maximum residue limit value stipulated by China.[Conclusion]In actual sample detection，this method could quickly and accurately detect samples，providing a data method for the detection of a large number of samples.

Key words High performance liquid chromatography （HPLC）;Methoxyfenozide;Tomato;Pesticide residue

基金項目

山东省农业重大应用技术创新项目（KY-NYZDJSCX2016）。

作者简介 迟梦宇（1993—），女，山东青岛人，硕士，从事农产品中农药残留检测技术研究。通信作者，副研究员，从事农药残留限量标准与检测技术研究。

收稿日期 2021-04-16

甲氧虫酰肼是由美国陶氏益农公司研发的一种新型的双酰肼类昆虫生长调节剂，它不但能够导致昆虫异常蜕皮抑制进食，而且还有一定的杀卵活性[1-3]，对鳞翅目害虫具有很好的防治作用。目前对甲氧虫酰肼的残留研究国内外均有报道[4-9]，但是在番茄上的残留研究目前国内还鲜有报道。笔者以番茄为样品，建立了测定甲氧虫酰肼在番茄中残留量的液相色谱检测法，为快速、准确地测定番茄中甲氧虫酰肼残留提供了有效的数据方法，满足了农药残留的要求。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

高压液相色谱仪，Waters公司，Alliance2695泵，2487紫外检测器;旋转蒸发器，德国 Heidolph laborota 4000;离心机，北京医用离心机厂LD5-2A。甲氧虫酰肼标样（德国，纯度 98.9%）;甲醇（色谱纯）;乙腈（色谱纯）;重蒸水;二氯甲烷（分析纯）;无水硫酸钠（分析纯）。

1.2 试验方法

1.2.1 样品处理。称取样品15.0 g加至80 mL离心管中，加入40 mL甲醇∶0.1 mol/L HCl（4∶1，V/V）混合溶液振荡提取10 min，10 000 r/h匀浆破碎1 min，然后离心5 min，取清液于分液漏斗中，残渣再加入40 mL甲醇∶0.1 mol/L HCl混合溶液，重复提取操作2次。

1.2.2 净化。

将2次提取的上清液合并加至分液漏斗中，用二氯甲烷重复萃取2次，过无水硫酸钠。40 ℃水浴旋转蒸发二氯甲烷至干，净化，甲醇定容，过膜，待测。

1.2.3 色谱条件。色谱柱为Waters symmetry C18柱（4.0 mm×250 mm）;流动相为水∶甲醇∶乙腈（15∶30∶55，V/V）; 柱温30 ℃;流速1.0 mL/min;检测波长200 nm;进样量10 μL。相对保留时间8 min。

1.2.4 标准溶液的配制。

准确称取0.01 g甲氧虫酰肼標准品，用甲醇溶液定容至10 mL棕色容量瓶中，配制成浓度为1 000 mg/L标准贮备溶液。将甲氧虫酰肼标准贮备液用甲醇溶液稀释配制成浓度为0.01、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/kg的标准工作溶液，按“1.2.3”色谱条件进行分析，测定峰面积，以峰面积（Y）为纵坐标、质量浓度（X，mg/L）为横坐标绘制标准曲线，进行线性回归分析[10]。

1.2.5 添加回收试验。

称取15个番茄空白样品各10 g，向空白样品中添加3个不同水平的甲氧虫酰肼标准溶液，使最终添加浓度分别为0.01、0.50、2.00 mg/kg，每个浓度设置5个重复，按照“1.2.1”和“1.2.2”样品处理和净化的方法进行处理，按“1.2.3”色谱条件对样品进行检测分析，计算加标回收率。

2 结果与分析

2.1 流动相的选择 选择甲醇-乙腈-水的梯度作为流动相，不仅能提高分离度，还能使农药与样品中的杂质完全分离开，避免杂质峰影响[6]。确定好流动相后对流动相的不同配比进行比较选择。在乙腈体积为55%时，分离效果较好，但出峰时间长[10]。对甲醇和水的比例进行了优化。结果表明，在甲醇∶乙腈∶水的比例为30∶55∶15时，能够使色谱分离效果最好，从而获得峰型好、灵敏度高的色谱峰（图1）。

2.2 线性关系的确立 将稀释好的系列浓度标准溶液按“1.2.3”色谱条件进行分析，以峰面积（Y）和质量浓度（X，mg/L）为坐标轴绘制标准曲线，进行线性回归分析，得出线性回归方程为Y=14 299.46X+1 871.79，线性回归系数（r）为0.999 8（图2）。结果表明甲氧虫酰肼的浓度在0.01～1.00 mg/L与峰面积呈线性关系，且线性关系良好，符合相关分析要求。

2.3 方法回收率和精密度

在没有检出的番茄样品中分别添加不同含量水平的甲氧虫酰肼标准溶液，使最终添加浓度分别为0.01、0.50、2.00 mg/kg，每个浓度设置5个重复。按照“1.2.1”和“1.2.2”样品处理和净化方法对样品进行处理后进样，得到添加回收图谱（图3～4）。计算得到的加标回收率为85%～105%，相对标准偏差（RSD）为0.6%～1.4%，表明该方法的准确度和精密度良好，符合农药残留检测要求。甲氧虫酰肼在番茄上的最低检出限为0.01 mg/kg，最小检出量为2 ng。

2.4 实际样品的检测

在济南市场随机抽取了番茄样品，按照该研究建立的样品前处理方法和检测方法对样品进行检测，其中有番茄样品检测出有甲氧虫酰肼残留，检出量分别为0.020、0.028、0.050、0.031、0.022、0.043 mg/kg，均小于国家规定的最大残留限量值（2 mg/kg），说明市场上销售的番茄相对比较安全。

3 结论

该试验研究并建立了检测番茄中甲氧虫酰肼残留量的高效液相色谱方法。通过酸化的甲醇提取，二氯甲烷萃取，流动相甲醇、乙腈、水的比例为30∶55∶15，检测到的色谱峰分离效果好、准确度高。在优化的最佳条件下，该分析方法的平均回收率为85%～105%，最低检出限为0.01 mg/kg，最小检出量为2 ng，满足残留检测要求。在实际样品检测中该方法能够快速、准确地对样品进行检测，为大量样品的检测提供了数据方法。

参考文献

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