徐安莉　　张丽蓉　　朱莉　　仇云临　　张若鹏

[关键词] 人型支原体;解脲支原体;男性不育;抗精子抗体

[中图分类号] R256.5          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2021）16-0019-04

Effects of mycoplasma infection and anti-sperm antibody types on semen quality in infertile patients

XU Anli   ZHANG Lirong   ZHU Li   QIU Yunlin   ZHANG Ruopeng

First Affiliated Hospital of Dali University， Dali   671000， China

[Abstract] Objective To investigate whether different types of mycoplasma infection have different effects on the types of anti-sperm antibodies in infertile patients， and whether different types of anti-sperm antibodies have different effects on semen quality. Methods A total of 260 male infertility patients treated in the First Affiliated Hospital of Dali University from January to August 2019 were selected. The results of primordia， anti-sperm antibody， routine semen and other tests were sorted out and analyzed. Results The positive rate of IgA anti-sperm antibody in patients infected with Ureaplasma urealyticum was significantly higher than that in patients not infected with Ureaplasma urealyticum. In infertility patients with mycoplasma infection，the forward motility sperm rates and sperm survival rates of patients with positive IgG and IgM type anti-sperm antibodies were significantly lower than those of patients with positive IgA type anti-sperm antibodies. Conclusion The types of anti-sperm antibodies in serum of patients with different types of mycoplasma infection are different， and the effects of different types of anti-sperm antibodies on semen quality are also different.It is very necessary to carry out the detection of mycoplasma infection type and anti-sperm antibody type in clinic.

[Key words] Mycoplasma hominis （Mh）; Ureaplasma urealyticum （UU）; Male infertility; Anti-sperm antibody

支原體是原核生物中个体最小、结构最简单的一类致病微生物，其可定居于人类生殖道，造成生殖系统感染。目前从生殖道中已分离出的可能与疾病相关的8种支原体中，人型支原体（Mycoplasma hominis，MH）和解脲支原体（Ureaplasma urealyticum，UU）的感染率最高，与男性不育症的关系最为密切[1-2]。抗精子抗体是导致不育症的主要免疫性因素之一，其可与不育症患者的精子结合，破坏精子的结构和功能，导致患者配偶不能受孕。有研究表明[3-4]，支原体感染和抗精子抗体的产生关系密切，故为探究支原体感染类型和抗精子抗体类型是否有关及它们对精液质量的影响，本研究对在我科就诊的260例男性不育症患者的检查结果进行整理分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年1—8月于大理大学第一附属医院因男性不育症就诊的260例患者。不育组纳入标准：①男性，年龄22～45岁;②排除女方因素引起的不孕，未采取避孕措施且有正常性生活1年或以上未能使女方受孕者;③其不存在射精障碍或梗阻性无精症等取精困难的情况。排除标准：①存在男性生殖系统发育异常、性功能障碍、梗阻性无精症等不能通过常规方式取精者;②泌尿生殖系存在沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、梅毒螺旋体等非支原体类病原微生物感染者;③近1个月存在感染症状史或接受过抗生素治疗者。

1.2 标本的采集与处理

①血标本：用加入促凝剂的采血管抽取血标本3～5 mL，待其凝固后以3500 r/min离心5 min后分离血清备用。②精液标本：禁欲3 d后，受试者按要求于取精室通过手淫法完整收集精液并存置标记过姓名的无菌取精杯中，立即送检，镜检前精液存放于37℃温箱中保存。③尿道分泌物标本：受试者用无菌棉拭子插入尿道约2～4 cm深处，旋转1周，停留约15 s后，取出尿道分泌物置于无菌塑料试管内，密封立即送检。

1.3 观察指标

1.3.1 血清抗精子抗体的检测  抗精子抗体（Anti-sperm antibody，AsAb）试剂盒（包括IgG、IgM、IgA三种抗体类型）使用福建省三明博峰生物科技有限公司生产的试剂盒，按说明书上操作要求对血清中抗精子抗体进行胶体金法检测。仅质控线阳性，說明检测结果有效，检测线和质控线均呈阳性表明被检样本血清中抗精子抗体为阳性;被检样本血清中抗精子抗体阴性。

1.3.2 精液常规检测  采用伟力WLJY-9000彩色精子质量检测系统，按照WHO标准对精液标本进行密度、前向运动精子率（PR）和畸形率进行检测，人工记录精液的量、液化时间。同时将精液和伊红Y染液按1∶1的比例滴于载玻片上，混匀，盖上盖玻片，30 s后于高倍镜下计数着色精子数、计算精子存活率。

1.3.3 解脲支原体的检测  采用珠海丽珠试剂股份有限公司的人型支原体分离培养试剂盒和解脲支原体（又称解脲支原体）分离培养试剂盒进行检测，严格按照说明操作。将尿道分泌物分别接种于两种培养基上，并于37℃下培养48 h，培养基内液体颜色仍为黄色，表明该标本对应的检测项目结果为阴性，由黄色变为红色或桃红色，则表明该标本对应的检测项目结果为阳性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计量资料以（x±s）表示，行方差分析，计数资料以[n（%）]表示，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 支原体感染情况与抗精子抗体类型的相关性

本研究中不育症患者人型支原体的感染率为33.1%（86/260），解脲支原体的感染率为46.2%（120/260）。根据支原体感染情况可将患者分为4组，MH+UU-组（人型支原体阳性、解脲支原体阴性）、MH-UU+组（人型支原体阴性、解脲支原体阳性）、MH+UU+组（人型支原体和解脲支原体均阳性）、MH-UU-组（人型支原体和解脲支原体均阴性），各组三种血清抗精子抗体阳性率见表1。经χ2检验，四组数据AsAb-IgG和AsAb-IgM的阳性率比较，差异无统计学意义（IgG：χ2=1.352，P=0.717;IgM：χ2=0.272，P=0.965）;而感染UU组（MH-UU+组和MH+UU+组）患者的AsAb-IgA阳性率明显高于未感染UU组（MH+UU-组和MH-UU-组）的患者（χ2=21.481，P<0.001）。

2.2 不同类型抗精子抗体对支原体感染患者精液质量的影响

为探讨不同类型抗精子抗体对支原体感染患者精液质量是否存在不同的影响，根据抗精子抗体类型将支原体感染（MH、UU一种或两种均阳性者）和抗精子抗体均为阳性的患者分成三组，并对其精液常规结果进行分析。从表2中可知，除IgG+组和IgM+组的前向运动精子率和精子存活率明显低于IgA+组外，在精液体积、精液液化时间、精子密度和精子畸形率方面三组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

3 讨论

目前有大量研究表明，支原体的感染和抗精子抗体的产生有密切的关系，但其具体机制尚不完全清楚[5-6]，而且各型抗精子抗体对精液质量影响的报道也较少。本研究中不育症患者的支原体感染率为59.2%（154/260）和抗精子抗体阳性率为46.5%（121/260），与以往的研究结果基本一致。同时本研究发现人型支原体感染患者血清中的抗精子抗体以IgG和IgM为主，解脲支原体感染时除IgG和IgM型抗精子抗体外，IgA型抗精子抗体的阳性率也显著升高。并且各类型抗精子抗体对精液质量的影响也不相同。

3.1 人型支原体与AsAb-IgG、AsAb-IgM

人型支原体是非淋球菌性尿道炎的一种常见致病微生物，其特点是生长时需要类固醇物质。人型支原体的潜伏期通常为1～3周，由于其急性期症状和非淋球菌性尿道炎十分相似，亚急性期又常伴前列腺感染，因此易漏诊或误诊造成长期或反复感染[7]。当发生人型支原体感染、血睾屏障遭到破坏时，精子的漏出和巨噬细胞的进入[8-9]均可导致精子与巨噬细胞接触，继而将精子作为抗原提呈，激活体液免疫和细胞免疫，活化B淋巴细胞和T淋巴细胞。活化的B淋巴细胞可以分化为浆细胞合成和分泌抗精子抗体，初次体液免疫应答血清中主要产生IgM，随后B细胞的IgC基因区可发生重排导致分泌的Ig类型变成IgG，再次应答时血清中主要产生高亲和力的IgG[10-11]。同时活化的致敏T细胞则可对抗原（精子和人型支原体）起到直接杀伤作用，并通过释放细胞因子和趋化因子等引起白细胞的聚集起到协同杀伤作用，所以人型支原体感染常会合并白细胞精子症，且伴有精子的损伤和死亡[12-13]，导致本研究中出现的前向运动精子率和精子存活率降低的情况。

3.2 解脲支原体与AsAb-IgA

解脲支原体可分为T960和parvo两大生物群，两群均定植于泌尿生殖道黏膜表面，parvo生物群主要是不致病的定植菌群，而T960生物群则会在机体免疫力降低时侵犯黏膜引起泌尿生殖系感染[14-15]。故解脲支原体感染时首先激活的是黏膜免疫系统导致黏膜免疫应答的主力军IgA分泌的局部增加[16]，此时精子作为抗原物质与抗原呈递细胞接触，自然也会诱导黏膜免疫系统产生IgA型的抗精子抗体。在清除解脲支原体方面IgA可以抑制其在黏膜表面粘附，还可以与之结合阻止其破坏细胞[17]。在对抗被识别为抗原的精子方面，IgA类抗体通常不激活补体途径，仅通过特异性结合、减弱其活动力、抑制顶体反应等非炎症性方式导致精子生理功能的减弱，而不是精子的严重损伤或死亡[18-19]。

综上所述，尽管目前支原体感染与抗精子抗体产生的相关性尚未完全阐明，但不同类型支原体感染时，患者血清中的抗精子抗体类型确实也有差别，而且不同类型抗精子抗体对精液质量的影响也不相同。故在临床上开展支原体感染类型和抗精子抗体类型的检查是有十分重要意义的。同时由于IgG、IgM类抗体主要分布于循环血清，而IgA类抗体主要分布于泌尿系黏膜局部，因此精浆和泌尿系局部组织中抗精子抗体类型和分布情况可能成为今后免疫性不育的一个研究方向[20-22]。

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（收稿日期：2020-12-25）